复健片保护缺血性卒中血脑屏障的作用研究

复健片保护缺血性卒中血脑屏障的作用研究

论文摘要

目的:探讨滋补肝肾中药复健片对缺血性卒中后血脑屏障的保护机制。方法:基于“肾生髓”的中医理论,以大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠为实验对象,通过观察复健片调控血脑屏障通透性和结构的研究,初步探索滋补肝肾中药保护血脑屏障的机制。利用渗出血管外的依文氏蓝(EB)染色法,以依文氏蓝含量为指标,观察复健片对血脑屏障通透性的影响;以脑组织含水量为指标,观察复健片对脑水肿的影响;利用酶联免疫法,以组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)为指标,观察复健片对血脑屏障基膜损伤的纤溶酶系统的影响;利用酶联免疫法,以基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)为指标,观察复健片对血脑屏障基膜损伤的明胶酶系统的影响;利用原位杂交法,以内皮细胞内ET-1 mRNA、ecNOS mRNA和P-gp mRNA为指标,观察复健片对内皮细胞功能活性的影响;利用放免法,以环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)为指标,观察复健片对星形胶质细胞活性的影响;利用酶联免疫法,以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素10(IL-10)为指标,观察复健片对炎性细胞因子的影响。结果:复健片可显著降低血脑屏障的通透性,减轻脑水肿;抑制t-PA、MMP-2和MMP-9的表达,防止血脑屏障的基膜损伤;抑制血管内皮细胞内病理性上调的ET-1 mRNA表达,增强ecNOS mRNA、P-gp mRNA表达以保护内皮细胞;降低cGMP表达、提高cAMP,有促使星形胶质细胞协同诱导维持血-脑屏障特性的作用;降低TNF-α含量,提高IL-10含量,降低炎症反应对脑毛细血管内皮、基底膜和星形胶质细胞的损害,使血脑屏障的通透性降低。结论:以滋补肝肾立法组方的复健片可在体调控MCAO大鼠血脑屏障的基膜-星形胶质细胞-内皮细胞功能,从而有利于保护血脑屏障的功能,防止脑水肿的发生。

论文目录

  • 提要
  • Abstract
  • 引言
  • 第一章 复健片影响血脑屏障的理论依据
  • 第一节 血脑屏障结构及其功能调控基础
  • 一、血脑屏障的发育
  • 二、血脑屏障的分布
  • 三、血脑屏障的结构
  • 四、血脑屏障的功能
  • 第二节 缺血性卒中对血脑屏障的损伤机制
  • 一、脑水肿的提出及分类
  • 二、脑水肿与血脑屏障损伤的关系
  • 三、脑缺血半暗带
  • 四、缺血性卒中后血脑屏障改变的机制
  • 五、缺血性卒中后血脑屏障通透性的检测
  • 第三节 中药对缺血性卒中后血脑屏障的干预机制
  • 一、肝肾阴亏是缺血性卒中的基本病机
  • 二、补益肝肾是缺血性卒中的基本治法
  • 三、复健片组方体现调补肝肾治法
  • 四、复健片现代药理研究概要
  • 五、复健片保护血脑屏障的可能性
  • 第二章 复健片保护缺血性卒中血脑屏障的实验研究
  • 第一节 实验基本情况
  • 一、实验动物
  • 二、动物分组
  • 三、实验仪器
  • 四、实验试剂
  • 五、用药方法
  • 六、标本制备
  • 七、统计学方法
  • 第二节 缺血性卒中模型的制备
  • 一、实验材料
  • 二、模型的制备及评价方法
  • 三、小结
  • 第三节 复健片对血脑屏障的保护作用
  • 实验一 复健片对血脑屏障通透性和脑水肿的影响
  • 实验二复健片对组织型纤溶酶原激活剂含量的影响
  • 实验三 复健片对基质金属蛋白酶含量的影响
  • 实验四 复健片对内皮细胞的影响
  • 实验五 复健片对星形胶质细胞的影响
  • 实验六 复健片对炎性介质的影响
  • 第四节 讨论
  • 一、复健片对血脑屏障通透性和脑水肿的影响
  • 二、复健片对缺血性卒中血脑屏障结构的调控效应
  • 结语
  • 参考文献
  • 综述
  • 附录
  • 致谢
  • 查新报告
  • 相关论文文献

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