腺病毒介导的突变型p27基因转染对大肠癌裸鼠模型抑制作用的研究

论文摘要

目的 以腺病毒为载体构建突变型p27 kip1（p27mt）,并将其注射到人大肠癌SW480裸鼠模型肿瘤瘤体内,通过观察肿瘤生长情况及肿瘤生长抑制率,研究外源性突变型p27 kip1（p27mt）基因对大肠癌的体内抑制作用。 方法 应用细胞移植法把人大肠癌SW480细胞接种于BalB/c裸鼠皮下,成功构建大肠癌裸鼠模型27只,随机分为p27mt组、Lac-Z组和空白对照组,每组9只。将已成功构建的腺病毒介导的突变型p27 kip1（Ad-p27mt）0.1ml(病毒含量1010pfu)、Lac-Z0.1ml(病毒含量1010pfu)和PBS0.1ml采用瘤体内直接注射法注射到瘤体内,3日一次,共3次,注射后每3日一次测量肿瘤最长径及最短径,计算每组肿瘤平均体积,绘制肿瘤生长曲线。4周后断颈椎处死裸鼠,剥离肿瘤,称质量,计算肿瘤生长抑制率。利用剥离肿瘤组织制备单细胞悬液,进行细胞调亡的相关检测。 结果 应用细胞接种法接种后,肿瘤生长潜伏期7～10日,14日肿瘤平均体积0.5cm（0.48±0.23）左右,成瘤率100%,肿瘤生长较为均一,动物生长状况良好,连续治疗观察4周,动物无死亡。肿瘤生长曲线:组间比较P27mt与对照组、Lac-Z组差异有显著性（P<0.01）,空白对照组与Lac-Z组无统计学差异（P>0.05）,断颈椎处死动物无菌剥离肿瘤后,称瘤质量,肿瘤抑制率38.2%,差异有显著性（P<0.01）,P27mt与对照组、Lac-Z组差异有显著性（P<0.01）,空白对照组与Lac-Z组无统计学意义（P>0.05）。细胞调亡检测:P27mt组凋亡细胞42.8%,Lac-Z组6.38%,空白对照组7.25%,P27mt组与对照组、Lac-Z组差异有显著性（P<0.01）,空白对照组与Lac-z组无统计学意义（P>0.05）。 结论 Ad-p27mt基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制,有更强的促调亡作用,与Lac-Z、对照组比较,差异有显著性（P<0.01）。Ad-p27mt基因对大肠癌裸鼠模型的体内肿瘤生长有明显的抑制作用。

论文目录

• 一、中文摘要
• 二、英文摘要
• 三、引言
• 四、正文
• 1、材料和方法
• 2、结果
• 3、讨论
• 4、结论
• 5、附图
• 6、参考文献
• 五、综述
• 1、正文
• 2、参考文献
• 六、后记