论文摘要
目的本文通过观察鲤鱼汤对阿霉素肾病大鼠营养状况、血清γ干扰素(interferon-γ, IFN-γ)和白介素4(interleukin-4, IL-4)水平以及肾小球足细胞CD2相关蛋白(CD2-associated protein, CD2AP)和肾病蛋白(nephrin)表达的影响,探讨其治疗阿霉素肾病大鼠水肿的作用制剂。方法成年健康Wistar大鼠70只,随机分为正常对照组(N组)、模型对照组(M组)、福辛普利组(F组)、鲤鱼汤低剂量组(YD组)和鲤鱼汤高剂量组(YG组),尾静脉注射阿霉素(Adriamycin, ADR)6.5mg/kg·bw复制肾病模型。观察大鼠体重变化;检测大鼠血清总蛋白(total protein, TP)、白蛋白(albumin, Alb)、球蛋白(globulin, G)、血糖(glucose, Glu)、总胆固醇(cholesterol, CHO)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)、肌酐(creatinine, Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、钾(K)、钠(Na)、氯(C1)水平及12h尿蛋白排泄量;采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IL-4和IFN-γ的水平;采用免疫组化方法检测各组大鼠肾脏中CD2相关蛋白、nephrin的表达,并计算其阳性表达的平均光密度值(average optical density, AOD)。结果(1)一般状况正常对照组皮毛光泽,精神状态良好,反应灵敏,较活跃,体重增长较快,摄食量较多。实验组体毛发黄蓬松,精神状态差,活动少,多静卧,体重增加缓慢甚至减轻,摄食量不同程度地减少,大便稀溏;F组、YD组和YG组较M组有不同程度改善。(2)血清生化指标①YD组、YG组TP均升高(与M组比较,P<0.05);但较F组差异无统计学意义(P>0.05);YD组、YG组大鼠血清Alb较M组、F组均升高,但仅YG组差异有统计学意义(P<0.05)。②造模大鼠CHO、LDL均升高(与N组比较P<0.05);YG组、YD组、F组之间差异无统计学意义。③F组、YD组和YG组Glu与M组比均有所升高(P<0.05):F组、YD组和YG组间Glu差异无统计学意义(P>0.05)。④各组大鼠Cr、BUN差异无统计学意义(P>0.05)。⑤各组大鼠血清血清钠、钾、氯等离子水平差异无统计学意义(P>0.05)。(3)12h尿蛋白排泄量造模大鼠12h尿蛋白排泄量(UP)呈升高趋势。在各时间点上,前两周各组UP差异无统计学意义;第3周实验组UP开始升高且与N组差异有统计学意义(P<0.05);第4周,YD组、YG组与M组开始出现差异;第8周起,YD、 YG组UP与M组差异有统计学意义(P<0.05)。(4)IL-4和IFN-γ各组IFN-γ水平差异均无统计学意义(P>0.05)。F组、YD组、YG组IL-4水平较N组升高,且差异有统计学意义(P<0.05);与M组相比,F组、YD组和YG组均有不同程度降低,且差异有统计学意义(P<0.05);F组、YD组和YG组之间差异无统计学意义(P>0.05)。(5)肾脏组织病理形态学观察光镜下,与M组比较,YD组和YG组大鼠肾小球肿胀明显改善,肾小囊腔清晰可见,病变肾小球周围炎性细胞浸润减少,肾小管管腔内蛋白管型少。电镜下,YD组、YG组和F组足突融合现象较M组减轻,内皮细胞形态基本正常,系膜细胞增生减轻,间质炎性细胞减少,且3组电镜下形态无明显差异。(6)CD2AP和nephrin肾病大鼠肾组织内两种蛋白表达均较N组降低,且以M组最少;接受鲤鱼汤和福辛普利干预的大鼠CD2AP和nephrin阳性表达区域分布较M组增强,点状及团块状区域增多,但仍未呈较为连续的分布。免疫组化阳性表达区域的AOD分析显示,M组、F组、YD组和YG组大鼠肾组织中CD2AP及nephrin的表达均较N组均下降(P<0.05),但YG组nephrin的表达与正常组差异无统计学意义(P>0.05):与M组比较,各干预组的蛋白表达均有不同程度增加(P<0.05)。YG组nephrin阳性表达区域的平均光密度与F组差异也有统计学意义(P<0.05)结论鲤鱼汤可不同程度改善阿霉素肾病大鼠营养状况,降低大鼠血清IL-4的水平,逆转大鼠体内炎性因子紊乱,增强大鼠肾小球足细胞CD2AP和nephrin蛋白的表达,改善阿霉素肾病大鼠肾小球的损伤,进而起到治疗作用。
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