导读:本文包含了抑制素亚基基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:北极狐,乌苏里貉,抑制素α(INHα)亚基基因,克隆
抑制素亚基基因论文文献综述
张宇飞,李晓霞,王士勇,曹新燕,刁云飞[1]（2017）在《北极狐及乌苏里貉抑制素α亚基基因克隆及生物信息学分析》一文中研究指出试验旨在克隆北极狐及乌苏里貉抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因并对其进行生物信息学分析。根据GenBank中犬科INHα预测mRNA序列(登录号:XM_545660.5)设计1对引物,用RT-PCR技术从北极狐及乌苏里貉的卵巢组织中扩增出INHα亚基基因,同时将其插入到克隆载体中,进行测序及生物信息学分析。测序结果表明,北极狐及乌苏里貉的INHα亚基基因CDS序列全长为1 107bp,编码369个氨基酸。北极狐及乌苏里貉的INHα亚基基因与犬的同源性最高,分别为97.9%与97.6%。系统进化树分析表明,北极狐及乌苏里貉与犬亲缘关系较近,同时也说明INHα亚基基因在不同物种及进化过程中具有高度保守性。对INHα亚基蛋白的高级结构预测发现,由于半胱氨酸间形成的二硫键导致其采用"蝴蝶形"或"开放手"构型,其中α-螺旋形成分子的"手腕"结构,β-折迭形成分子的"手指"结构。本研究成功克隆了北极狐及乌苏里貉的INHα亚基基因,同时进行了系统的生物信息学分析,为今后研究抑制素在卵母细胞-颗粒细胞同步发育过程中的生物学功能奠定了基础。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2017年12期）
刘晨,魏全伟,李平华,吴燕,吴望军[2]（2017）在《抑制素α亚基基因5'UTR区在苏淮猪中的多态性分析》一文中研究指出[目的]探究抑制素α亚基基因(INHA)5'UTR区多态性与苏淮猪产仔数相关性,为苏淮猪的分子选育工作提供理论依据。[方法]选取189头健康苏淮母猪,通过PCR扩增和测序对INHA基因5'UTR区基因多态性进行了检测,同时利用生物信息学方法分析该序列特征,最后通过群体遗传学和生物信息学分析了不同基因型对苏淮猪产仔数的影响。[结果]在苏淮猪INHA基因5'UTR调控区-42G>A处发现一个SNP位点,对其进行多态性分析,存在3种基因型,分别为GG、GA、AA,且基因型分布不符合哈代温伯格定律(P<0.01)。G等位基因为优势等位基因,GG型为优势基因型,GG型苏淮猪的平均总产仔数比AA型多0.63头(P<0.05)。[结论]INHA基因5'UTR区多态性可用于苏淮猪繁殖性状的分子标记辅助选择,加速育种进程。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊2017年06期）
刘晨[3]（2017）在《苏淮猪抑制素α亚基基因多态性分析和仔猪卵巢发育研究》一文中研究指出抑制素α亚基与βA亚基异构化形成抑制素A,而α亚基与βB亚基形成抑制素B,且抑制素α亚基上存在糖基化位点,因此抑制素α亚基是形成抑制素的关键因子。抑制素A是TGFβ家族成员之一,在调控卵巢发育及激素分泌中具有重要的作用。在哺乳动物外周血中INHA除了与激活素(activin)及卵泡抑素(FSH-suppressingprotein,FSP)共同调控FSH的形成和分泌,还可以通过旁分泌模式和自分泌模式调节卵巢颗粒细胞和膜细胞的生长、增殖、分化,进而影响卵泡的发育。并且INHA也参与卵巢黄体细胞形成及凋亡过程。INHA基因及其免疫制剂在哺乳动物分子育种繁殖,特别是反刍动物育种繁殖中发挥者重要的作用。INHA也在多囊卵巢综合症、卵巢早衰、卵巢癌的发生中起着重要作用,许多卵巢疾病都是与INHA表达紊乱相关。随着现代文明发展,环境污染越来越严重,仔猪在生长过程中,极易受到外部环境的干扰,特别是环境内分泌干扰物(EEDs)不仅能引起人的性早熟,也能导致猪的生殖器官过早发育。本研究旨在分析苏淮猪抑制素α亚基基因多态性和研究仔猪卵巢过早发育对其功能的影响。根据GeneBank上已经登录的猪(Susscrofa)的基因序列设计引物,利用生物信息学软件分析该序列。分析抑制素α亚基基因在苏淮猪中的的多态性,对抑制素α亚基基因存在的多态位点与苏淮猪产仔数进行关联分析。对60日龄育屠宰的肥仔猪卵巢卵巢切片,利用HE染色和免疫组织化学进行分析。主要研究结果如下:1.抑制素α亚基基因5'UTR区生物信息学分析苏淮猪抑制素α亚基基因5'UTR区序列全长为67bp,通过同源比对发现猪抑制素α亚基基因5'UTR序列与人、山羊、猪同源性较高。使用在线软件Methprimer(http://www.urogene.org)对猪抑制素α亚基基因5'UTR区序列进行预测发现,在抑制素α亚基基因5'UTR序列没有CpG岛。使用在线软件genomatic(www.genomatic.de.com)对猪抑制素α亚基基因5'UTR区序列进行转录因子预测分析,结果表明抑制素α亚基基因5'UTR区存在多个转录因子,如PLAG1、PRDM5、EKLF、TBX21、CAX6 等。2.苏淮猪抑制素α亚基基因多态性与产仔数的关系分析苏淮猪抑制素α亚基基因的单核苷酸多态性(SNP),测序结果发现在5,UTR区存在1个多态位点(-42G>A),在CDS区存在4个多态位点(分别为3241C>T、3249A>G、3285G>A和3294G>A),这四个位点均能引起氨基酸改变,但不影响抑制素α亚基的三级结构。在-42G>A位点,G为优势等位基因(频率为0.553)。关联分析发现GG基因型的苏淮猪产仔数显着高于AA型。通过5'UTR区上的转录因子预测发现,-42G>A位点能够改变结合的转录因子,进而影响抑制素α亚基的转录。而在CDS区存在4个多态位点上的基因型与苏淮猪产仔数差异不显着。3.仔猪卵粟过早发育的组织学及其PCNA和Caspase3表达特性在60日龄仔猪中,随机选取8头屠宰取卵巢和子宫,根据屠宰结果分成卵巢发育正常组和卵巢过早发育组。进行组织学观察和免疫组织化学分析。结果表明,60日龄卵巢发育正常组与卵巢过早发育组卵巢、子宫重差异极显着(P<0.01),卵巢过早发育组卵巢已经出现大量有腔卵泡,通过HE染色显微镜观察,60日龄卵巢发育正常组以原始卵泡、次级卵泡为主兼少量初级卵泡。60日龄卵巢过早发育组卵巢出现多个叁级卵泡,这些叁级卵泡发育正常。PCNA、Caspase-3主要在颗粒细胞中表达,在卵巢卵巢过早发育组和卵巢发育正常组中,PCNA、Caspase-3在原始卵泡、次级卵泡、初级卵泡颗粒细胞中表达没有差异。在卵巢过早发育组卵巢叁级卵泡中,PCNA在颗粒细胞中强表达,而Capase-3弱表达,有腔卵泡中的颗粒细胞具有正常增值功能,说明这些叁级卵泡能够继续发育乃至排卵,卵巢过早发育组能够形成发情周期。原始卵泡库中的原始卵泡数量是固定的,从原始卵泡到形成叁级卵泡过程中会发生大量卵泡闭锁。卵巢过早发育组与卵巢发育正常组相比,消耗大量原始卵泡,易出现卵巢和子宫发育不良。我们结果提示:卵巢过早发育会耗及卵巢卵母细胞库,对母猪后期利用年限产生不利影响。(本文来源于《南京农业大学》期刊2017-06-01）
黄增文,木尔扎提,郑婷婷,罗玉江,赛务加甫[4]（2016）在《羊卵泡抑制素α亚基基因siRNA真核表达载体的构建》一文中研究指出为了构建羊抑制素α亚基(IHNα)基因靶向siRNA真核表达载体,以也木勒白羊为试验动物,依据Gen Bank的INHα基因序列(KP-113678.1)设计3个不同位点的干扰片段,利用RNAi技术和实验室常规方法将3个干扰片段连接到干扰RNA真核表达载体中,并对干扰载体进行相关检测和鉴定。结果表明:干扰表达质粒能在绵羊颗粒细胞中成功表达,且转染率50%左右,通过Q-PCR和蛋白表达试验发现,沉默率达到83%。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2016年04期）
吴迪,邢书涵,齐晓龙,刘云海,郭勇[5]（2015）在《牛抑制素α亚基基因克隆及表达载体的构建》一文中研究指出为克隆牛抑制素α亚基基因,构建抑制素p ET32a-成熟肽表达载体,从河北大厂县屠宰场采集卵巢,提取总RNA并反转录成c DNA,根据Gen Bank NM_174094.4设计一对引物扩增出成熟肽c DNA,将所扩增基因插入到p ET32a表达载体Bam HⅠ与HindⅢ酶切位点之间,构建重组质粒抑制素p ET32a-成熟肽。结果成功构建出抑制素α亚基基因。笔者初步得到了抑制素重组质粒,为今后重组蛋白原核表达的研究奠定了基础。(本文来源于《中国农学通报》期刊2015年35期）
李婷,张英杰,刘月琴[6]（2015）在《RNA干扰对绵羊抑制素α亚基基因(INHA)表达的抑制效果》一文中研究指出引言/目的抑制素(inhibin,INH)是由绵羊的卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌的糖蛋白质激素,它是由一个α亚基和一个β亚基通过二硫键构成的,其中抑制素α亚基(INHA)是抑制素发挥生理功能必不可少的。抑制素能抑制雌性动物促卵泡素(FSH)的释放,调节卵泡的生成;对雄性动物表现为抑制精子的发生,降低睾丸的生精能力。通过抑制/NHA基因的表达,降低动物体内的抑制素水平,从而促进卵泡发育和精子的生成,继而提高动物的繁殖力。因此本研究根据绵羊INHA基因序列设计干扰序列,构建shRNA重组质粒,转染到绵羊的卵泡颗粒细胞。采用qRT-PCR和western(本文来源于《2015年全国养羊生产与学术研讨会论文集》期刊2015-08-19）
薛琳琳[7]（2015）在《抑制素α-亚基成熟区基因在大肠杆菌中的原核表达》一文中研究指出本试验成功获得抑制素α-亚基编码序列的克隆载体后,从阳性细菌中提取质粒,经SacI和XhoI酶切,回收354bp目的片段,与表达载体pET-32a连接,将构建好的pET32a(+)-INH-α原核表达质粒转化到受体菌E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,Tricine-SDS-PAGP电泳鉴定,检测到仔鹅与东北白鹅抑制素-α成熟区基因的表达。(本文来源于《中国畜禽种业》期刊2015年07期）
黄增文,木尔扎提,吾热力哈孜·哈孜汗[8]（2015）在《也木勒羊抑制素α亚基基因克隆及其真核表达》一文中研究指出为了克隆也木勒白羊抑制素α(inhibinα,INHα)亚基基因和表达其重组蛋白质,本试验采集发情期也木勒白羊卵巢组织,并从中快速抽提总RNA,以此作为模板并根据白羊INHα亚基基因编码区序列(GenBank登录号:XM_004004955.1)设计合成1对引物,经反转录扩增获得了也木勒白羊INHα亚基基因编码区全长序列。并将扩增产物克隆到表达载体(pEGFP-N1)的ScalⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间,构建重组质粒pEGFP-INHα并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,后进行鉴定、测序,证明成功构建了INHα亚基基因的真核表达载体。将也木勒白羊INHα亚基基因与人、大猩猩、牛等动物的INHα亚基基因序列进行同源性比对分析,相似度都在50%以上,说明了抑制素基因具有高度保守性。用RT-PCR和Western blotting方法验证了INHα亚基基因的真核表达载体在BHK细胞中的成功表达及蛋白表达。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2015年06期）
李婷[9]（2014）在《RNA干扰对绵羊抑制素α亚基基因（INHA）表达的抑制效果》一文中研究指出抑制素(inhibin，INH)是由绵羊的卵巢颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌的糖蛋白质激素，它是由一个α亚基和一个β亚基通过二硫键构成的，其中抑制素α亚基（INHA）是抑制素发挥生理功能必不可少的。抑制素能抑制雌性动物促卵泡素(FSH)的释放，调节卵泡的生成；对雄性动物表现为抑制精子的发生，降低睾丸的生精能力。可见，可通过抑制抑制素α亚基基因的表达，来降低动物体内的抑制素水平，从而促进卵泡发育和精子的生成，继而提高动物的繁殖力。RNA干扰技术是内源性或外源性双链RNA诱发的mRNA水平上的基因沉默技术，具有高度的特异性。然而，根据以前的研究报告显示shRNA表达载体只能转录生成一种特异性的小干扰RNA，来阻断单一靶点的表达，干扰效率比较低。为了提高shRNA的干扰效率，我们在一个载体上插入两个靶点shRNA表达序列，即构建含有双启动子的shRNA表达载体，并将其与单个靶点shRNA载体的干扰效率作比较。本研究利用RNA干扰技术，根据绵羊INHA基因的cDNA序列设计构建shRNA重组质粒，通过双重PCR方法扩增启动子序列，构建含有U6和H1双启动子的不同靶特异干扰序列shRNA表达载体pGenesil1.2-INHA1+2，单个靶特异性序列的单启动子表达载体pGenesil1.2-INHA以及不针对任何序列的阴性对照重组质粒pGenesil1.2-HK。用lip2000将阴性对照、pGenesil1.2-INHA、pGenesil1.2-INHA1+2分别转染到绵羊的卵泡颗粒细胞中，用荧光定量PCR的相对定量法来检测转染了48小时后，各样品瞬时转染后基因的表达量，计算干扰的效果。western blot检测转染细胞INHA的蛋白表达情况。结果如下：1.酶切结果显示，试验成功的构建了双启动子shRNA表达载体pGenesil1.2-INHA1+2和单启动子表达载体pGenesil1.2-INHA。2.各重组质粒表达载体转染绵羊卵泡的颗粒细胞，瞬时转染48h荧光定量PCR检测结果显示，实验组与对照组相比，构建的shRNA表达载体pGenesil1.2-INHA，pGenesil1.2-INHA1+2对INHA基因都有抑制作用，其中双启动子表达载体pGenesil1.2-INHA1+2抑制效率较高，基因沉默达到83%。3.western blot检测结果显示，在干扰作用下，细胞中蛋白的表达与空白对照组和阴性对照组相比明显减少，与对照组相比，实验组pGenesil1.2-INHA，pGenesil1.2-INHA1+2细胞中INHA荧光蛋白的表达量都有降低，而这两组相比，pGenesil1.2-INHA1+2的荧光蛋白表达量降低更加明显。结论：综上所述，双启动子shRNA载体转染卵泡的颗粒细胞后，可显着降低INHA基因mRNA与蛋白的表达，相比单个靶特异性序列的单启动子shRNA载体有更高的抑制效率。(本文来源于《河北农业大学》期刊2014-05-26）
贾启涛[10]（2013）在《水牛抑制素α亚基基因（INHA）RNAi载体干扰效果分析及其转基因小鼠模型的构建》一文中研究指出水牛是我国南方非常重要的役用动物,肉用和乳用潜力很大,但是水牛繁殖性能和泌乳性能低下。抑制素(inhibin,INH)负反馈调控FSH的合成与分泌,降低水牛的繁殖性能；水牛妊娠期长而且实验成本高,因此,我们以小鼠为试验动物模型,开展水牛INH的RNAi的干扰效果的研究,为生产具有高繁殖性能的转基因水牛提供参考。在本研究中,我们以水牛INHA为靶基因构建RNAi载体,在小鼠卵巢颗粒细胞上进行干扰效果的分析,筛选出干扰效果较好的RNAi片段,随后应用显微注射技术将该片段整合到小鼠基因组中,以进一步在转基因RNA i小鼠中分析该片段的干扰效果,为高繁殖力转基因水牛的研究打下基础。本研究主要结果如下：(1)根据水牛INHA(EU884446.1) mRNA CDS设计四条s hRNA,分别命名为：shRNA-b1, shRNA-b2, shRNA-b3和shRNA-b4(阴性对照)。(2)利用PiggyBac转座子载体phi5,成功构建了四个RNAi干扰表达载体,分别命名为：phi5siRNA-b1, phi5siRNA-b2, phi5siRNA-b3 和 phi5siRNA-b4(阴性对照)。(3)采用阴性对照载体phi5siRNA-b4进行转染条件优化,经荧光观察,转染效率最高时重组载体使用量为750ng,载体和脂质体比例为1：3。(4)将重组载体phi5siRNA-b1, phi5siRNA-b2, phi5siRNA-b3, phi5siRNA-b4和本实验室前期构建的两个干扰载体phi5siRNA-3、phi5siRNA-4转染小鼠卵巢颗粒细胞,荧光定量检测干扰效率分别为47.9%,28.8%,30.7%,20.4%,29.8%,其中phi5siRNA-b1的干扰效率最高(为47.9%)。(5)将载体phi5siRNA-b1用SacI和ScaI双酶切线性化之后,胶回收纯化包含shRNA-b1及其他表达元件的片段,为生产转基因小鼠提供线性化的RNAi片段。(6)采用显微注射技术,将其注射到小鼠受精卵中(公司协助),获得新生小鼠60只,通过常规PCR鉴定,初步鉴定出5只转基因阳性小鼠(4雄1雌)。(本文来源于《华中农业大学》期刊2013-06-01）
抑制素亚基基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[目的]探究抑制素α亚基基因(INHA)5'UTR区多态性与苏淮猪产仔数相关性,为苏淮猪的分子选育工作提供理论依据。[方法]选取189头健康苏淮母猪,通过PCR扩增和测序对INHA基因5'UTR区基因多态性进行了检测,同时利用生物信息学方法分析该序列特征,最后通过群体遗传学和生物信息学分析了不同基因型对苏淮猪产仔数的影响。[结果]在苏淮猪INHA基因5'UTR调控区-42G>A处发现一个SNP位点,对其进行多态性分析,存在3种基因型,分别为GG、GA、AA,且基因型分布不符合哈代温伯格定律(P<0.01)。G等位基因为优势等位基因,GG型为优势基因型,GG型苏淮猪的平均总产仔数比AA型多0.63头(P<0.05)。[结论]INHA基因5'UTR区多态性可用于苏淮猪繁殖性状的分子标记辅助选择,加速育种进程。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抑制素亚基基因论文参考文献
[1].张宇飞,李晓霞,王士勇,曹新燕,刁云飞.北极狐及乌苏里貉抑制素α亚基基因克隆及生物信息学分析[J].中国畜牧兽医.2017
[2].刘晨,魏全伟,李平华,吴燕,吴望军.抑制素α亚基基因5'UTR区在苏淮猪中的多态性分析[J].南京农业大学学报.2017
[3].刘晨.苏淮猪抑制素α亚基基因多态性分析和仔猪卵巢发育研究[D].南京农业大学.2017
[4].黄增文,木尔扎提,郑婷婷,罗玉江,赛务加甫.羊卵泡抑制素α亚基基因siRNA真核表达载体的构建[J].畜牧与兽医.2016
[5].吴迪,邢书涵,齐晓龙,刘云海,郭勇.牛抑制素α亚基基因克隆及表达载体的构建[J].中国农学通报.2015
[6].李婷,张英杰,刘月琴.RNA干扰对绵羊抑制素α亚基基因(INHA)表达的抑制效果[C].2015年全国养羊生产与学术研讨会论文集.2015
[7].薛琳琳.抑制素α-亚基成熟区基因在大肠杆菌中的原核表达[J].中国畜禽种业.2015
[8].黄增文,木尔扎提,吾热力哈孜·哈孜汗.也木勒羊抑制素α亚基基因克隆及其真核表达[J].中国畜牧兽医.2015
[9].李婷.RNA干扰对绵羊抑制素α亚基基因（INHA）表达的抑制效果[D].河北农业大学.2014
[10].贾启涛.水牛抑制素α亚基基因（INHA）RNAi载体干扰效果分析及其转基因小鼠模型的构建[D].华中农业大学.2013
标签：北极狐; 乌苏里貉; 抑制素α(INHα)亚基基因; 克隆;