论文摘要
目的观察温郁金正丁醇提取物对二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDC）诱导的大鼠慢性胰腺炎（CP）胰腺纤维化的干预作用,并探讨其可能机制。方法66只雄性、健康、清洁级SD大鼠,按随机数字表法分为空白对照组（A组,n=12）、模型组（B组,n=18）、温郁金正丁醇提取物高剂量组（C组,n=18）、温郁金正丁醇提取物低剂量组（D组,n=18）。腹腔注射DDC制备大鼠CP胰腺纤维化模型：第1周至第4周,每次以750mg/kg的剂量腹腔注射DDC,每周2次；第5周至第9周,每次以750mg/kg的剂量腹腔注射DDC,每周1次,第10周可获得大鼠CP胰腺纤维化模型。空白对照组大鼠在正常饲养1周后,予以生理盐水灌胃（1 ml/kg,1次/d）；模型组在造模1周后,造模同时予以生理盐水灌胃（1 ml/kg,1次/d）；温郁金正丁醇提取物高剂量组在造模1周后,造模同时予以温郁金正丁醇提取物灌胃（每次剂量相当于温郁金生药5g/kg,1次/d）；温郁金正丁醇提取物低剂量组在造模1周后,造模同时予以低剂量温郁金正丁醇提取物灌胃（每次剂量相当于温郁金生药1.25g/kg,1次/d）。至第10周,麻醉大鼠,腹主动脉取血,取大鼠胰腺组织,观察胰腺大体形态、胰腺HE染色评分、MASSON染色测定胰腺胶原纤维面积、观察免疫组化胰腺a-SMA表达及ELISA法测定血清羟脯氨酸水平,并进行其相关性分析。结果①一般情况及胰腺大体形态：空白对照组大鼠一般情况好,胰腺大体形态无异常；模型组大鼠一般情况较差,胰腺大体损伤严重；温郁金正丁醇提取物干预组（C、D组）大鼠的一般情况、胰腺大体损伤均较模型组明显改善。②HE染色：空白对照组胰腺组织结构基本正常,损伤积分为（0.08±0.29）分；模型组胰腺损伤严重,损伤积分为（4.56±1.13）分；温郁金正丁醇提取物高、低剂量干预组的胰腺病理损伤积分分别为（0.81±0.83）分、（0.93±0.96）分,较模型组均明显减轻（P均<0.05）。高、低剂量干预组间比较,无统计学差异（P>0.05）。③MASSON胶原纤维染色：空白对照组胰腺血管周围可见少量胶原纤维,胶原纤维面积百分比为（1.83±1.02）%；模型组大鼠胰腺中胶原纤维广泛分布于胰腺小叶内或小叶间,较密集,胶原纤维面积百分比为（13.46±5.58）%；温郁金正丁醇提取物高、低剂量干预组胰腺胶原纤维面积百分比为（3.34±1.48）%、（3.51±2.19）%,较模型组均明显减少（P均<0.05）。干预组间比较,胰腺胶原纤维面积无统计学差异（P>0.05）。④免疫组化a-SMA表达：空白对照组胰腺组织a-SMA表达只见于血管周围；模型组胰腺组织a-SMA表达较强,棕黄色颗粒分布广泛；温郁金正丁醇提取物干预组（C、D组）胰腺a-SMA表达比模型组均明显减弱（P均<0.05）,可见淡黄色颗粒散在分布,温郁金正丁醇提取物高、低剂量组间比较,胰腺a-SMA表达无统计学差异（P>0.05）。⑤血清羟脯氨酸（Hyp）水平：空白对照组血清羟脯氨酸水平较低,为（21.37±4.94）μg/L；模型组血清Hyp水平较高,为（34.03±15.87）μg/L；温郁金正丁醇提取物高、低剂量干预组血清Hyp水平分别为（23.50±12.67）μg/L、（22.66±10.65）μg/L,温郁金正丁醇提取物干预组血清Hyp水平均比模型组低（P均<0.05）。温郁金正丁醇提取物高、低剂量组间比较,血清Hyp水平差异无统计学意义（P>0.05）。相关性分析显示：胰腺胶原纤维面积、a-SMA表达、血清Hyp水平与胰腺病理损伤评分呈正相关（r值分别为0.819,0.910,0.468,P均<0.01）；胰腺a-SMA表达、血清Hyp水平与胶原纤维面积呈正相关（r值分别为0.736、0.340,P<0.01、P<0.05）；血清Hyp水平与胰腺a-SMA表达呈正相关（r值为0.054,P<0.05）。结论温郁金正丁醇提取物能有效缓解DDC诱导的CP大鼠的胰腺纤维化。温郁金正丁醇提取物缓解大鼠胰腺纤维化的途径可能和其抑制胰腺组织a-SMA表达水平、从而减少胰腺胶原纤维面积有关。
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