棘托竹荪孢子与胶质生物活性物质的研究

论文摘要

本研究以棘托竹荪废弃物为材料,对棘托竹荪孢子和胶质的生物活性物质进行研究,课题主要研究内容及结果如下：（1）竹荪废弃物的开发价值。统计分析竹荪不同部分鲜重比、干重比及含水率,结果表明竹荪菌体占竹荪总干重的31.62%-39.07%,孢子粉占17.94%-20.51%,胶质占5.28%-9.51%；竹荪各部分中胶质粗多糖和总多酚含量最高,分别为11.51%和5.951mg/g；竹荪各部分醇提物均具有不同程度的抗氧化活性；棘托竹荪孢子粉营养丰富,破壁孢子粉抗氧化活性显著高于未破壁孢子粉。（2）棘托竹荪孢子形态与破壁方法探讨。采用光学显微镜、扫描电子显微镜和透射电子显微镜的方法观察棘托竹荪孢子形态,结果显示：完整的孢子为椭圆形,孢子大小为1.5×3.5μm,表面光滑,局部有内凹形成隆脊,细胞壁厚度为0.15-0.25μm,可明显地分为三层；采用生物、物理及综合处理等研究孢子破壁方法,其中机械破壁效果最好,超微粉碎20min,破壁率可达90.7%。（3）超临界CO2萃取破壁棘托竹荪孢子粉挥发油。获得超临界CO2萃取破壁孢子粉挥发油最佳工艺条件为：萃取时间80min,萃取温度45℃,萃取压力35MPa,CO2流量25L/h；挥发油浓度为20mg/mL时,DPPH自由基清除率可达到73.66%；GC-MS分析挥发油成分,共鉴定出34种成分,其中16种为首次从竹荪中检测到,挥发油中不饱和脂肪酸含量为42.90%,单一成分二十烷醇含量最高,为26.27%,其次为油酸。（4）破壁棘托竹荪孢子粉抗氧化活性物质研究。得到抗氧化活性物质最佳提取工艺：乙醇浓度80%,回流温度90℃,回流时间3h,料液比1：40；孢子粉多糖具有抗氧化活性；孢子粉小分子类抗氧化活性组分经分离纯化得到ZS1和ZS3两种TLC纯物质,ZS2为三种物质的混合物,经分析鉴定,ZS1为有机溶剂累积物质,ZS3为油酸,ZS2为麦角甾醇、3,5-环麦角甾烷-6,8（14）,22-三烯和ZS3的混合物。（5）棘托竹荪胶质抑菌作用及多糖研究。棘托竹荪胶质乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和肠炎沙门氏菌等7种食源性致病菌均有较强的抑制作用；胶质多糖具有抗氧化活性,优化出多糖提取工艺为提取温度99℃,提取时间2.5h,料液比1：3,pH=2；分级醇沉中90%醇沉多糖含量为83.09%,并通过DE-52纤维素柱纯化得到ZJ1和ZJ2两种多糖,紫外光谱分析其基本不含杂质。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 引言
• 1.1 竹荪概述
• 1.1.1 竹荪简介
• 1.1.2 竹荪营养价值
• 1.1.3 竹荪药用价值
• 1.2 竹荪生物活性研究进展
• 1.2.1 竹荪多糖研究
• 1.2.2 竹荪抑菌作用
• 1.2.3 竹荪挥发油
• 1.2.4 竹荪抗氧化作用
• 1.3 抗氧化物质研究进展
• 1.3.1 自由基的产生及危害
• 1.3.2 抗氧化剂对自由基的清除机理
• 1.3.3 抗氧化评价方法
• 1.3.4 天然抗氧化活性物质的研究进展
• 1.3.4.1 维生素类
• 1.3.4.2 类黄酮物质
• 1.3.4.3 多糖及其衍生物
• 1.3.4.4 多肽和蛋白质类
• 1.3.4.5 微量元素
• 1.4 竹荪开发现状及存在的问题
• 1.5 论文选题依据、主要内容及创新点
• 1.5.1 论文选题依据
• 1.5.2 主要研究内容
• 1.5.3 创新与特色
• 第二章 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 培养基
• 2.1.3 主要试剂
• 2.1.4 主要仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 棘托竹荪收集及前处理
• 2.2.1.1 棘托竹荪各部分鲜重比及干重比的测定
• 2.2.1.2 棘托竹荪各部分生物活性物质含量测定
• 2.2.1.3 棘托竹荪各部分体外抗氧化作用
• 2.2.1.4 棘托竹荪孢子粉成分分析
• 2.2.1.5 棘托竹荪孢子粉体外抗氧化作用
• 2.2.2 棘托竹荪孢子形态及破壁方法研究
• 2.2.2.1 棘托竹荪孢子粉的获得及处理
• 2.2.2.2 棘托竹荪孢子粉的光学显微形态
• 2.2.2.3 棘托竹荪孢子粉扫描电镜
• 2.2.2.4 棘托竹荪孢子粉透射电镜
• 2.2.2.5 棘托竹荪孢子破壁方法选择
• 2萃取及挥发油成分分析'>2.2.3 破壁棘托竹荪孢子粉超临界CO₂萃取及挥发油成分分析
• 2萃取工艺优化'>2.2.3.1 破壁竹荪孢子粉超临界CO₂萃取工艺优化
• 2.2.3.2 棘托竹荪孢子粉挥发油GC-MS成分分析
• 2.2.4 棘托竹荪孢子粉生物活性物质研究
• 2.2.4.1 棘托竹荪孢子粉抗氧化活性物质提取工艺优化
• 2.2.4.2 棘托竹荪孢子粉抗氧化活性物质的分离纯化与鉴定
• 2.2.5 棘托竹荪胶质生物活性物质的研究
• 2.2.5.1 棘托竹荪胶质多糖提取
• 2.2.5.2 棘托竹荪胶质多糖提取工艺优化
• 2.2.5.3 棘托竹荪胶质多糖纯化及活性测定
• 2.2.5.4 棘托竹荪胶质抑菌作用
• 第三章 结果与分析
• 3.1 棘托竹荪各部分测定及分析
• 3.1.1 棘托竹荪各部分鲜重比、干重比及含水率
• 3.1.2 棘托竹荪各部分活性物质含量测定
• 3.1.2.1 棘托竹荪各部分粗多糖含量测定
• 3.1.2.2 棘托竹荪各部分多酚含量的测定
• 3.1.3 棘托竹荪各部分抗氧化作用
• 3.1.3.1 羟基自由基
• 3.1.3.2 DPPH
• 3.1.3.3 超氧阴离子自由基
• 2+的螯合力'>3.1.3.4 对Fe²⁺的螯合力
• 3.1.3.5 总还原力
• 3.1.4 棘托竹荪孢子粉营养成分分析
• 3.1.5 棘托竹荪孢子粉生物活性物质测定
• 3.1.6 破壁与未破壁孢子粉抗氧化活性比较
• 3.1.6.1 羟基自由基清除力
• 3.1.6.2 DPPH自由基清除力
• 3.1.6.3 超氧阴离子自由基清除力
• 2+的螯合力'>3.1.6.4 对Fe²⁺的螯合力
• 3.1.6.5 总还原力
• 3.1.7 小结
• 3.2 棘托竹荪孢子粉形态
• 3.2.1 棘托竹荪孢子光学显微形态
• 3.2.2 扫描电镜
• 3.2.3 透射电镜
• 3.2.4 棘托竹荪孢子破壁方法结果
• 3.2.4.1 破壁率标准曲线绘制
• 3.2.4.2 生物酶对棘托竹荪孢子破壁的影响
• 3.2.4.3 不同破壁方法对棘托竹荪孢子破壁的影响
• 3.2.5 小结
• 2萃取工艺结果'>3.3 破壁棘托竹荪孢子粉超临界CO₂萃取工艺结果
• 2萃取工艺优化'>3.3.1 超临界CO₂萃取工艺优化
• 3.3.2 挥发油抗氧化作用
• 3.3.3 挥发油GC-MS成分分析
• 3.3.4 小结
• 3.4 棘托竹荪孢子粉生物活性物质研究
• 3.4.1 破壁棘托竹荪孢子粉抗氧化物质提取工艺优化
• 3.4.1.1 料液比对抗氧化物质提取的影响
• 3.4.1.2 回流温度对抗氧化物质提取的影响
• 3.4.1.3 回流时间对抗氧化物质提取的影响
• 3.4.1.4 乙醇浓度对抗氧化物质提取的影响
• 3.4.1.5 正交实验设计及结果分析
• 3.4.2 不同有机溶剂对抗氧化活性的影响
• 3.4.3 棘托竹荪孢子粉粗多糖的抗氧化活性
• 3.4.4 抗氧化活性物质的分离纯化与鉴定
• 3.4.4.1 TLC分析
• 3.4.4.2 正相硅胶柱层析粗分
• 3.4.4.3 小极性正相硅胶柱层析细分
• 3.4.4.4 大极性反相硅胶及sepdehax LH-20柱层析
• 3.4.5 小结
• 3.5 棘托竹荪胶质生物活性物质初步研究
• 3.5.1 棘托竹荪胶质抑菌作用
• 3.5.2 棘托竹荪胶质多糖提取及抗氧化活性
• 3.5.2.1 硫酸-苯酚法葡萄糖糖标准曲线的绘制
• 3.5.2.2 温度对竹荪胶质多糖提取的影响
• 3.5.2.3 提取时间对竹荪胶质多糖提取的影响
• 3.5.2.4 料液比对竹荪胶质多糖提取的影响
• 3.5.2.5 pH对竹荪胶质多糖提取的影响
• 3.5.2.6 竹荪多糖提取工艺优化结果
• 3.5.3 竹荪胶质多糖的分级醇沉淀
• 3.5.4 DE52-纤维素柱纯化竹荪胶质多糖
• 3.5.5 竹荪胶质多糖的紫外光谱分析
• 3.5.6 小结
• 结论与讨论
• 展望
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历
• 附录