Ang-1及其受体Tie-2在哮喘大鼠气道中的表达

论文摘要

研究背景支气管哮喘（以下简称哮喘）的基本特征是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞、淋巴细胞等多种细胞及细胞组份引起的慢性气道炎症，同时气道形态的变化反映了其结构的变化，即气道重塑（airway remodeling）。现在已被人们共同认可，它包括上皮细胞的脱落，基底膜的增厚，血管的扩张和增殖，气道平滑肌的增殖，黏液腺和杯状细胞的增生、胶原的沉积。血管从原始的管腔变成各级由内皮细胞和血管周细胞及平滑肌细胞组成的网络的过程中，促血管生成素-1（angiopoietin-1，Ang-1）及其受体Tie-2起着非常重要的作用。Ang-1是肌肉分泌型配体，在生理性和病理性血管生成过程中都起着重要作用。据报道Ang-1能调控内皮细胞黏附分子与细胞之间的连接，还能阻止由血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）或炎性介质引起的血管渗漏从而发挥抗炎作用。也能够通过内皮特殊受体Tie-2活化磷酸二酯酶，磷酯酰肌醇3′激酶和酪氨酸激酶，显著抑制VEGF引起的嗜酸性粒细胞的趋化。因此，Ang-1可能对与炎症所致的微血管渗漏有治疗意义。在Ang家族中，有四种形式，分别是Ang-1，Ang-2，Ang-3，Ang-4，Ang-1广泛表达在成人多种组织中。目前大多研究集中在Ang-1和Ang-2。Tie是血管内皮细胞上特异的酪氨酸激酶型受体，包括Tie-1、Tie-2两种，由于尚未发现Tie-1受体的配体，所以目前大多数研究都集中在Tie-2受体。Tie-2主要表达在血管内皮细胞（endothelial cells，ECS）和早期造血细胞。目前国内尚未见到研究Ang-1及其受体Tie-2在哮喘中的作用，国外也刚刚开始。本实验中通过激发复制哮喘模型，采用免疫组化（immnohistochemical）方法检测Ang-1及其受体Tie-2在正常组、哮喘组及干预组不同组间气道壁表达变化，采用计算机病理图象分析系统分析各组大鼠气道壁厚度与上述两因子之间的关系，旨在探索Ang-1及其受体Tie-2在哮喘病理生理发展过程中的作用，从而为哮喘气道重塑的治疗和预防提供新的思路。材料和方法将45只健康雌性SD大鼠（体重J10±10g，5-6周龄），随机分为以下各组：（1）对照组：腹腔注射1ml生理盐水，并吸入生理盐水。（2）模型组：制备哮喘模型，OVA（鸡卵白蛋白）致敏，1％OVA激发。第1d每只大鼠腹腔注射1ml 10％OVA混悬液（内含1ml生理盐水，100mg氢氧化铝，100mgOVA）致敏，第8d、15d各重复一次，第16d始用OVA激发，将大鼠置于特制密闭玻璃容器中，用超声雾化器喷入1％OVA，隔日一次，每次20min，激发20次。（3）地塞米松干预组：激发前30min，按2mg／kg腹腔注射地塞米松溶液，其他同模型组。各组大鼠分别于末次激发后24h内用苯巴比妥钠腹腔麻醉（100mg／只）处死。HE染色观察气道结构，免疫组化染色后，采用计算机病理图象分析系统分析各组大鼠气道壁表达Ang-1及其受体Tie-2阳性百分数，在10×20下测气道壁厚度，分析Ang-1及Tie-2与气道壁厚度两者之间的关系，统计分析均采用SPSS（11.0）统计软件进行计算，结果以算术平均数±标准差（（?）±s）表示。各组资料经方差齐性检验后采用单因素方差分析法（one-way ANOVA），并进行直线相关分析，以α=0.05为检验水准，P＜0.05为差异具有显著性。结果1．各组所测得的气道的厚度与对照组比较，模型组（47.266±2.531）和干预组（39.267±2.011）气道壁厚度较对照组（36.533±2.166）显著增加（P＜0.01），模型组（47.266±2.531）较干预组显著增加（P＜0.01）。2．Ang-1及其受体Tie-2在大鼠气道壁的表达在对照组及干预组，Ang-1及其受体Tie-2相对弱表达于气道上皮细胞，平滑肌细胞和血管内皮细胞等。而在模型组中，Ang-1及其受体Tie-2则强表达于气道上皮细胞，平滑肌细胞和血管内皮细胞等。Ang-1模型组（103.9487±8.2914）与对照组（76.0320±3.7728）及干预组（90.6180±5.2339）比较，表达均显著增加（P＜0.01），干预组与对照组比较也显著增加（P＜0.01）。Tie-2模型组（99.2307±8.1913）与对照组（75.3153±3.7321）及干预组（86.6633±3.7321）比较，表达均显著增加（P＜0.01），干预组与对照组比较也显著增加（P＜0.01）。3．Ang-1及其受体Tie-2和气道壁厚度之间的相关性分析Ang-1及其受体Tie-2的表达与气道壁厚度呈明显正相关(rAng-1=0.719，rTie-2=0.746，P＜0.01)，Ang-1与其受体Tie-2间也呈明显正相关(rAngl-Tie-2=0.742，P＜0.01)。结论1．Ang-1及其受体Tie-2在气道中广泛表达。2．哮喘模型大鼠气道壁中Ang-1及其受体Tie-2表达明显上调，且与气道壁厚度密切相关。3．Ang-1及其受体Tie-2可能抑制哮喘气道重建过程。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 论文部分 Ang-1及其受体Tie-2在哮喘大鼠气道中的表达
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 附图
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 综述部分 Ang-1及其受体Tie-2在哮喘中的作用
• 参考文献
• 缩写缩引
• 致谢