论文摘要
本实验将屠宰后延边黄牛的卵巢取回，用抽吸法回收卵母细胞，在不同条件下进行卵母细胞的体外成熟培养，然后对成熟卵母细胞进行核移植、融合、激活以及胚胎的体外培养。实验分别比较了在不同季节、不同的卵巢保存温度、不同的操作时间、成熟培养时间以及有无黄体和卵泡直径大小对牛卵母细胞体外成熟率、卵裂率、4-6C发育率和8-16C发育率的影响。得出的实验结果如下：1、分别在四个季度进行实验，我们可以看出：秋季的成熟率、卵裂率、及4-6C发育率均最高，与其它组之间存在显著差异。所以秋季的实验效果最好，是适宜延边黄牛体细胞克隆的最佳季节。2、卵巢保存温度为20-29℃组的成熟率为47.25％，卵裂率为40.82％；30-39℃组的成熟率为46.60％，卵裂率为44.63％；4-6C发育率分别是37.04％和45.00％。各项数据在两组间的差异均不显著。结果表明：运输时间在6h以内时，20-39℃间的卵巢保存温度对牛卵母细胞体外成熟率和核移植后早期胚胎发育率不存在显著差异。3、在实验三中我们将操作时间分为1h、2h、3h。其中，操作2h组的成熟率最高，为74.45％，显著高于1h（62.95％）组；三组的卵裂率分别是55.87％、55.16％和49.84％；4-6C发育率为42.86％、41.46％、35.85％；8-16C发育率分别是30.25％、24.39％和23.90％。三个处理组之间都没有显著差异。说明3h的操作时间可能对卵母细胞产生了不良影响，不利于牛卵母细胞的体外成熟，所以实验操作应尽量在2h内完成。4、将成熟时间分成18-20h、20-22h和22-24h三个时间段，三组的成熟率分别为69.33％、77.35％和81.52％，其中18-20h的成熟率最低，22-24h的成熟率最高；卵裂率与成熟率相反，最高的是18-20h组，53.38％，最低的是22-24h组，49.07％，差异均不显著；4-6C发育率为42.25％、43.64％、37.74％；8-16C发育率为16.90％、18.18％和26.42％，三组间都不存在差异。说明18-24h的成熟时间对牛卵母细胞体外成熟和核移植后早期胚胎发育的影响不大。5、根据卵巢表面的黄体将实验分为有黄体组（+）和无黄体组（-）。两组的成熟率为60.63％和62.75％，4-6C发育率为34.41％和37.23％，8-16C发育率为26.89％、17.52％，不存在显著差异；无黄体组的卵裂率（80.12％）高于有黄体组（58.86％），但没有显著差异。结果表明卵巢表面有无黄体对延边黄牛卵母细胞的体外成熟和核移植后胚胎的早期发育没有显著影响。6、根据卵巢表面卵泡的直径将实验分成三组：小于4mm组，4-6mm组和大于6mm组。三组的成熟率分别是60.74％、59.34％、69.17％，卵裂率为62.42％、71.11％、49.06％，4-6C发育率为36.56％、57.81％和53.85％，8-16C发育率为20.43％、21.88％和23.08％，各组数据间都没有显著差异，结果表明：卵泡直径对延边黄牛卵母细胞的体外成熟率和核移植后早期胚胎发育率的影响差异不显著。
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标签：延边黄牛论文; 卵丘卵母细胞复合体论文; 核移植论文; 成熟率论文; 卵裂率论文;