一种新型CpG ODN对乙肝疫苗增效作用的研究

论文摘要

重组乙型肝炎表面抗原（HBsAg）疫苗是在世界范围内广泛应用的预防乙型肝炎病毒的有效疫苗,但在我国约10%的人群对其反应低下或无反应,因此研制一种高效的乙型肝炎疫苗已成为当务之急。CpG ODN 是人工合成的含有CpG 的单链寡聚脱氧核苷酸,具有强效免疫增强作用。CpG ODN 可分为A、B、C 三类,其中B 类CpG ODN（CpG-B）能有效刺激B 细胞介导的体液免疫应答,可望成为增强HBsAg 免疫效果的理想分子佐剂。为了寻找能够有效增强HBsAg 免疫原性的CpG ODN,我们进行了大规模的新型CpG ODN 筛选工作,发现一种新型的CpG ODN（CpG-684）能够刺激淋巴细胞增殖、活化、刺激IFN-γ的产生,且能明显提高HBsAg刺激小鼠产生抗体的能力。说明这种新型CpG ODN 有可能成为乙肝疫苗的高效佐剂。

论文目录

引言

1. 乙型病毒性肝炎现状

2.CpG ODN 的概述

2.1 CpG ODN 发现

2.2 CpG ODN 模序的分类

2.3 CpG ODN 的免疫激活作用

3.C pG ODN 的应用

4.C pG ODN 作为乙肝疫苗佐剂的研究应用

4.1 CpG ODN 对乙型肝炎疫苗的免疫增强作用

4.2 CpG ODN 是一种安全有效的乙肝疫苗佐剂

4.3 CpG ODN 能够降低乙肝表面抗原的使用量

4.4 CpG ODN 能够协同HBsAg 诱发黏膜免疫反应

4.5 CpG ODN 作为乙肝疫苗的佐剂已经进入临床试验

5. 结语及展望

材料与方法

1. 实验材料

1.1 实验动物

1.2 抗体

1.3 主要试剂盒

1.4 其他试剂

1.5 主要实验设备

2. 实验方法

2.1 体外实验鉴定CpG-684 的活性

2.2 鉴定HBsAg 及商品化乙肝疫苗

2.3 实验动物的免疫接种

2.4 Anti-HBs antibody（IgG）测定

2.5 抗-HBs IgG2a/IgG1 比值测定

2.6 检测IFN-γ水平

实验结果

1.C pG-684 的质量监控

1.1 琼脂糖凝胶电泳定性分析CpG-684

1.2 用可见光分光光度计定量分析CpG-684

2.C pG-684 活性鉴定

2.1 人体外实验鉴定CpG-684 的活性

2.2 小鼠体外实验鉴定CpG-684 的活性

3. 鉴定HBsAg 及商品化乙肝疫苗

3.1 鉴定HBsAg

3.2 鉴定商品化乙肝疫苗

4. 小鼠体内实验结果

4.1 单一剂量的CpG-684 对HBsAg 的肌肉免疫增强作用的检测

4.2 不同剂量的CpG-684 对乙肝疫苗肌肉免疫增强作用的检测

4.3 CpG-684 对乙肝疫苗的腹腔免疫增强作用的检测

讨论

1. 诱导体液免疫反应

2. 诱导Th1 型免疫反应

结论

参考文献

附录

1. 图片

2. 英文缩写词表

中文摘要

ABSTRACT

致谢

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作者简历

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