生物法制备低分子大豆蛋白肽

论文摘要

大豆蛋白肽具有多种生理活性和功能,其利用价值极高,目前已经被广泛应用到食品、保健品行业,开发前景十分可观。利用酶水解法和微生物发酵方法制备大豆蛋白肽是目前常采用的方法。本文分别用以上两种方法水解大豆蛋白,得到制备大豆蛋白肽的适宜条件。在酶法制备大豆蛋白肽的工艺优化中,分别探讨了Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶和Flavourzyme复合风味酶四种酶对大豆蛋白的水解条件,得出Alcalase碱性蛋白酶在65℃,底物浓度为5%,pH为8,加酶量为0.5%的条件下,水解大豆蛋白2h,大豆蛋白水解率可达到61.5%；Neutrase中性蛋白酶在45℃,底物浓度为5%,pH为7,加酶量为1%的条件下,水解大豆蛋白2h,大豆蛋白水解率可达到51.8%；Protamex复合蛋白酶在60℃,底物浓度为6%,pH为7.5,加酶量为1%的条件下,水解大豆蛋白2h,大豆蛋白水解率可达到53.8%；Flavourzyme复合风味酶在50℃,底物浓度为7%,pH为7,加酶量为1%的条件下,水解大豆蛋白3h,大豆蛋白水解率可达到35.6%。在微生物发酵法制备大豆蛋白肽的工艺优化中,分别以纳豆菌固体发酵和纳豆菌液体发酵两种方法制备大豆蛋白肽,得到适宜的发酵条件。其中纳豆菌固体发酵在初始pH为9,加水量为60%,接种量为6%,发酵温度为37℃的条件下发酵大豆蛋白24h,大豆蛋白的水解率最高值可达到24.3%；纳豆菌液体发酵在初始pH为8,发酵原料的质量分数为5%,接种量为1%,装瓶量为250 mL锥形瓶分装30mL,发酵温度为42℃,摇床震荡速度为180 r/min的条件下发酵大豆蛋白12h,大豆蛋白的水解率最高值可达到44.4%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 大豆蛋白肽概述
• 1.1.1 大豆蛋白肽的组成
• 1.1.2 大豆蛋白肽的生物活性
• 1.1.2.1 丰富的营养与高效的吸收
• 1.1.2.2 较低的抗原性
• 1.1.2.3 调节免疫力和抗衰老
• 1.1.2.4 辅助调节血糖和降低血压
• 1.1.2.5 降低胆固醇
• 1.1.2.6 促进脂肪的代谢
• 1.1.2.7 促进矿物质的吸收
• 1.1.3 大豆蛋白肽的开发现状及其应用
• 1.2 大豆蛋白肽制备工艺的概述
• 1.2.1 酶水解法制备大豆蛋白肽
• 1.2.1.1 酶水解法制备大豆蛋白肽的研究现状
• 1.2.1.2 酶水解法操作要点及存在的问题
• 1.2.1.3 Alcalase、Neutrase、Protamex、Flavourzyme四种酶简介
• 1.2.2 微生物发酵法制备大豆蛋白肽
• 1.2.2.1 微生物发酵法制备大豆蛋白肽的研究现状
• 1.2.2.2 微生物法制备大豆蛋白的工艺要点
• 1.3 大豆蛋白肽测定方法-TCA-双缩脲法
• 1.4 发酵菌种纳豆菌的简介
• 1.4.1 纳豆菌的起源、种类及特点
• 1.4.2 纳豆菌的主要研究应用
• 1.5 本论文研究意义、内容
• 1.5.1 研究意义
• 1.5.2 研究内容
• 第二章 酶水解法制备低分子大豆蛋白肽
• 2.1 前言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 材料
• 2.2.1.1 原料
• 2.2.1.2 药品与试剂
• 2.2.1.3 仪器
• 2.2.2 方法
• 2.2.2.1 凯氏定氮法测定蛋白质含量
• 2.2.2.2 TCA-双缩脲法测发酵液中大豆蛋白肽含量
• 2.2.2.3 大豆蛋白的预处理
• 2.2.2.4 大豆蛋白的酶解
• 2.2.2.5 TCA-双缩脲法测定小肽含量
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 大豆蛋白的蛋白质含量
• 2.3.2 Alcalase碱性蛋白酶水解大豆蛋白的条件优化
• 2.3.2.1 底物浓度的影响
• 2.3.2.2 加酶量的影响
• 2.3.2.3 pH的影响
• 2.3.2.4 温度的影响
• 2.3.2.5 水解时间的影响
• 2.3.3 Neutrase中性蛋白酶水解大豆蛋白的条件优化
• 2.3.3.1 底物浓度的影响
• 2.3.3.2 加酶量的影响
• 2.3.3.3 pH的影响
• 2.3.3.4 温度的影响
• 2.3.3.5 水解时间的影响
• 2.3.4 Protamex复合蛋白酶水解大豆蛋白的条件优化
• 2.3.4.1 底物浓度的影响
• 2.3.4.2 加酶量的影响
• 2.3.4.3 pH的影响
• 2.3.4.4 温度的影响
• 2.3.4.5 水解时间的影响
• 2.3.5 Flavourzyme复合风味酶水解大豆蛋白的条件优化
• 2.3.5.1 底物浓度的影响
• 2.3.5.2 加酶量的影响
• 2.3.5.3 pH的影响
• 2.3.5.4 温度的影响
• 2.3.5.5 水解时间的影响
• 2.3.6 四种酶最优条件下水解大豆蛋白水解率的比较
• 2.4 小结
• 第三章 发酵法制备低分子大豆蛋白肽
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 材料
• 3.2.1.1 原料
• 3.2.1.2 药品与试剂
• 3.2.1.3 仪器
• 3.2.2 方法
• 3.2.2.1 种子液培养基配方及种子液培养条件
• 3.2.2.2 固体发酵培养基及固体发酵初始条件
• 3.2.2.3 液体发酵培养基及液体发酵初始条件
• 3.2.2.4 凯氏定氮法测原料中蛋白质含量
• 3.2.2.5 TCA-双缩脲法测发酵液中大豆蛋白肽含量
• 3.2.2.6 大豆蛋白水解率的计算
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 原料蛋白质含量
• 3.3.2 固体发酵条件的优化
• 3.3.2.1 发酵时间的确定
• 3.3.2.2 培养基加水量的确定
• 3.3.2.3 接种量的确定
• 3.3.2.4 培养基初始pH的确定
• 3.3.2.5 培养温度的确定
• 3.3.2.6 适宜条件下的发酵
• 3.3.3 液体发酵条件的优化
• 3.3.3.1 发酵时间的确定
• 3.3.3.2 发酵原料质量分数的确定
• 3.3.3.3 接种量的确定
• 3.3.3.4 初始pH的确定
• 3.3.3.5 培养温度的确定
• 3.3.3.6 装瓶量的确定
• 3.3.3.7 适宜条件下的发酵
• 3.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录A 大豆蛋白肽含量标准曲线的绘制