慢性间歇性缺氧对人肝癌细胞HIF-1α、TNF-α、IL-6表达的影响

论文摘要

目的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）是一种具有潜在危险的疾病,发病率2%-4%,在老年人中发病率更高。OSAHS与冠心病、高血压病、动脉粥样硬化关系密切。慢性间歇缺氧是其主要致病机制之一,已有研究发现慢性间歇缺氧与氧化应激、炎症反应关系密切。本实验拟通过对人肝癌细胞（HepG2细胞）慢性间歇缺氧和慢性持续缺氧干预,研究慢性间歇缺氧与转录因子HIF-1α炎症因子TNF-αIL-6的关系,初步探讨慢性间歇缺氧对炎症反应的影响,为临床治疗提供实验数据和理论依据。方法1.采用HepG2细胞建立细胞模型,根据低氧程度及模式不同分为5组：21%氧浓度组；10%间歇缺氧组；5%间歇缺氧组；10%持续缺氧组；5%间歇缺氧组。2.实验室检测：采用酶联免疫吸附法测定细胞培养基上清液IL-6, TNF-a浓度以及细胞核内HIF-1α浓度。结果1.HIF-1α检测结果：持续缺氧5%组与持续缺氧10%组比较无统计学差异（p>0.05）,间歇缺氧5%组与间歇缺氧10%比较无统计学差异（p>0.05）,间歇缺氧5%组与持续缺氧5%组比较明显升高（p<0.05）,间歇缺氧10%与持续10%组比较明显升高（p<0.05）；各组与21%氧浓度组比较明显升高（p<0.05）；2.IL-6检测结果：持续缺氧5%组与持续缺氧10%组比较明显升高（p<0.05）,间歇缺氧5%组与间歇缺氧10%比较明显升高（p<0.05）,间歇缺氧5%组与持续缺氧5%组比较明显升高（p<0.05）,间歇缺氧10%与持续10%组比较明显升高（p<0.05）,各组与21%氧浓度组比较明显升高（p<0.05）；3.TNF-α检测结果：持续缺氧5%组与持续缺氧10%组比较明显升高（p<0.05）,间歇缺氧5%组与间歇缺氧10%比较明显升高（p<0.05）,间歇缺氧5%组与持续缺氧5%组比较明显升高（p<0.05）,间歇缺氧10%与持续10%组比较明显升高（p<0.05）,各组与21%氧浓度组比较明显升高（p<0.05）；4.本实验中HIF-1a,IL-6,TNF-a两两之间相关性分析：HIF-1a与IL-6比较呈正相关（r=0.287,p<0.05）；HIF-1a与TNF-a比较呈正相关（r=0.273,p<0.05）；TNF-a与IL-6比较呈正相关（r=0.713,p<0.05）。结论1.慢性间歇性缺氧与慢性持续性缺氧可致人肝癌细胞HIF-1α激活及IL-6、TNF-a表达增高；2.慢性间歇性缺氧对人肝癌细胞TNF-a, IL-6表达的影响比在慢性持续缺氧环境更明显,慢性持续缺氧环境对HIF-1α表达的影响比慢性间歇性缺氧明显。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 前言
• 第二章 实验材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验对象
• 2.1.2 细胞培养及分组
• 2.1.3 主要药品及试剂
• 2.1.4主要仪器设备及型号
• 2.1.5 实验气体
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 间歇缺氧的方法
• 2.2.2 持续缺氧方法
• 2.2.3 21%氧浓度组暴露方法
• 2.2.4 样品的准备和保存
• 2.2.5 人HIF-1α的检测
• 2.2.6 人IL-6的检测
• 2.2.7 人TNF-α的检测
• 2.3 统计学处理
• 第三章 结果
• 3.1 检测结果
• 3.1.1 各组HIF-1α浓度比较
• 3.1.2 各组IL-6浓度比较
• 3.1.3 各组TNF-α浓度比较
• 3.2 相关性分析
• 3.2.1 HIF-1α与IL-6的关系
• 3.2.2 HIF-1α与TNF-α的关系
• 3.2.3 IL-6与TNF-α的关系
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢