大鼠舌下神经压榨伤后p38MAPK的活化及外源性NGF促神经再生作用的研究

论文摘要

目的:本实验通过建立大鼠舌下神经压榨损伤模型,检测损伤后及NGF干预后,舌下神经核内p38MAPK的活化情况,并观察舌下神经核和神经纤维损伤后的修复再生情况。探讨p38MAPK在大鼠舌下神经损伤及干预后的作用和NGF对大鼠舌下神经损伤后神经修复再生的作用。方法:健康成年SD大鼠60只（雌雄各半,体重200-250 g）,随机取20只作为正常对照组（NC组,n=20）,40只建立左侧舌下神经压榨损伤模型,并随机分为两组:实验组（NGF组,n=20）和实验对照组（NS组,n=20）。NC组和NS组给予腹腔注射灭菌生理盐水,NGF组给予腹腔注射NGF。动物分别存活1d,3d,5d,7d,14d后灌注固定并取脑切片进行下列研究:采用免疫组织化学方法观察舌下神经核内神经元胞体p-p38MAPK的表达变化;采用Nissl染色方法观察舌下神经核内神经元形态及数量变化、计算损伤侧神经元的存活率;采用电镜方法观察舌下神经损伤后的再生情况。结果:免疫组化结果显示NC组大鼠两侧舌下神经核内几乎不表达p-p38MAPK免疫反应阳性物,NS组和NGF组损伤侧舌下神经核内神经元胞体p-p38MAPK免疫反应阳性物明显增加。NS组术后1天损伤侧（右侧）舌下神经核内神经元胞体表达p-p38MAPK免疫反应阳性物即明显增多,3天时表达量达高峰,5天p-p38MAPK表达量开始降低,但仍维持较高水平,此后逐渐下降。5天、7天和14天p-p38MAPK免疫反应阳性细胞数和灰度值与上一时间段差异均有统计学意义（P＜0.05）。同时,NS组与同一时间NC组相比p-p38MAPK表达均高,两者差异有统计学意义（P＜0.05）。NGF组与NS组相比损伤后3d、5d、7d和14d损伤侧舌下神经核内p-p38MAPK免疫阳性细胞平均灰度值显著降低,阳性细胞数减少,差异有统计学意义（P＜0.05）。Nissl染色显示术后7、14天NGF组损伤侧舌下神经核内运动神经元存活率明显高于NS组,两者差异有统计学意义（P＜0.05）。超薄切片观察可见术后7天、14天NGF组损伤远端有髓神经纤维髓鞘形态、板层结构致密度、清晰度,轴突内细胞器结构,施万细胞形态均优于NS组。结论:1.大鼠舌下神经压榨损伤后受损神经元内p38MAPK的活性增强。2.外源性NGF能抑制大鼠舌下神经压榨损伤引起的舌下神经核运动神经元胞体内p38MAPK的激活。3.大鼠舌下神经压榨损伤后外源性NGF具有保护受损的舌下神经元及促进神经再生的作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 主要英文缩略词简表
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验动物
• 2.2 主要试剂和设备
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 实验分组
• 2.3.2 动物模型制备
• 2.3.3 免疫组织化学
• 2.3.4 Nissl染色
• 2.3.5 超薄切片观察
• 2.4 数据收集及处理
• 第三章 结果
• 3.1 SP法免疫组化结果
• 3.2 Nissl染色结果
• 3.3 超薄切片结果
• 第四章 讨论
• 4.1 舌下神经损伤后受损神经元内p38-MAPK的活性增强
• 4.2 NGF能抑制舌下神经损伤引起的p38MAPK的激活
• 4.3 NGF具有保护受损的舌下神经元及促进神经再生的作用
• 第五章 结论
• 第六章 图片及说明
• 第七章 参考文献
• 综述
• 致谢
• 在读期间发表文章