论文摘要
多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma,MM）是浆细胞单克隆恶性增殖性疾病。MM的发病年龄多见于中年和老年,以50-60岁之间为多。本病的自然病程为0.5—1年,通常的治疗手段多为联合化疗。但由于年龄及本病的特点,患者往往不能耐受现有大剂量化疗。 姜黄素（Curcumin,Cur）系从姜科植物姜黄中提取的酚性有效单体化合物,有抗氧化、抗突变、抗促癌、抗炎等广泛的药理作用,且价格低廉,毒性很低。关于该药对骨髓瘤细胞作用的研究,国外仅限于对核转录因子NF-κB和IκBα激酶的影响以及对IL-6诱导的STAT3蛋白的影响等;而国内则未见相关报道。我们的前期研究发现:姜黄素对急、慢性白血病细胞株及淋巴瘤细胞株（HL-60细胞、K562细胞及CA46细胞）均有抑制作用。本课题研究姜黄素是否抑制骨髓瘤细胞株U266细胞的增殖,及其抑制增殖的机制,为姜黄素的临床应用奠定基础。 本文的研究内容主要包括: 1.观察姜黄素对U266细胞增殖的影响:应用台盼兰拒染法、MTT比色法、集落形成实验等检测姜黄素对U266细胞增殖能力的影响。 2.研究姜黄素对U266细胞诱导凋亡的作用:应用AO/EB复合染色、电镜、DNA片段化分析、DNA倍体分析、细胞线粒体膜电位检测、TUNEL法等检测姜黄素诱导U266细胞凋亡的作用。 3.探讨姜黄素抑制U266细胞增殖的分子机制。 ①用RT-PCR技术检测姜黄素对U266细胞凋亡相关基因c-myc、bc1-2、bc1-x1、bax、mc1-1、fas、hTERT、野生型p53、c-fos、c-Jun、VEGF、TGF-β1、IL-6、IL-6R mRNA表达的影响。 ②应用ELISA技术检测姜黄素对U266细胞培养上清中TGF-β1和IL-6含量的影响。 ③应用FCM技术及Western blot技术检测姜黄素对U266细胞Bc1-2、Fas、C-myc、Bax、Caspase-3、NF-κB和C-fos蛋白表达的影响。 ④应用PCR-ELISA技术检测姜黄素对U266细胞端粒酶活性的影响。
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