人组织激肽释放酶14在卵巢上皮性癌中的表达及其意义

论文摘要

卵巢上皮性癌（卵巢癌）是妇科三大恶性肿瘤之一，也是妇科肿瘤中死亡率最高的恶性肿瘤。近20年来卵巢癌的发病率有上升趋势，每年以0.1％的速度增长。卵巢癌具有缺乏早期症状及典型的临床表现，易转移，预后差等特点，多数患者就诊时已届晚期，而且卵巢癌发生发展的分子生物学机制仍不清楚，患者5年生存率仅为25％～30％。因此亟待寻找一些有效的生物学指标如肿瘤标记物等，服务于临床上卵巢癌的早期诊断、监测和预后判断。而且卵巢癌发病机制也亟待进一步研究，为临床了解卵巢癌的生物学行为提供理论依据，找出更好的诊断和治疗方法。人类组织激肽释放酶基因（kallikreins,klks）为一组高度保守的基因簇，在体内许多组织中都有表达，尤其在激素依赖性肿瘤组织中存在着表达差异。klks的生物学功能主要通过其表达产物人类组织激肽释放酶发挥作用，人类组织激肽释放酶和血浆激肽释放酶是人类激肽释放酶系统的两个不同类型，它们在分子量、作用底物、免疫学特性、基因结构等方面存在很大差别。klks属于丝氨酸蛋白酶类，目前其具体的生物学功能尚不十分清楚，已知的部分生物学功能有：参与血管生成，某些细胞因子的激活与失活，降解胰岛素原，抗血管紧张素活性等。自从klk1、klk2和klk3相继被定位以来，随着研究的深入，越来越多的新成员被确定。迄今为止，人类组织激肽释放酶基因家族中已经发现了15个成员。klk14是新近被发现的成员，和其它成员相比，在多种肿瘤组织中有高表达，尤其在激素依赖性组织，例如乳腺、卵巢、前列腺、睾丸等器官的肿瘤组织。并与肿瘤的发生、发展及疾病的预后有密切关系。目前国内外对卵巢上皮性癌已有的研究只检测了klk14蛋白的表达情况，很少见系统的检测klk14mRNA及其蛋白的表达现状，klk14蛋白的表达与卵巢上皮性癌患者预后的关系的报道也不多见。本研究利用免疫组织化学方法，检测了14例正常卵巢组织、28例卵巢良性上皮性肿瘤组织、15例卵巢交界性上皮性肿瘤组织及70例卵巢上皮性癌组织中的klk14蛋白的表达情况，并分析klk14蛋白表达与卵巢上皮性癌临床病理因素的关系及其与预后的关系。同时应用reverse-transcription PCR检测了10例正常卵巢组织和28例卵巢上皮性癌组织中klk14mRNA的表达情况，进一步探讨klk14在卵巢上皮性癌发生发展和预后判断中的作用，为卵巢上皮性癌临床诊断、预后判断和治疗提供理论依据。目的通过检测klk14mRNA和蛋白在不同卵巢组织中的表达情况，分析klk14蛋白表达与卵巢上皮性癌各临床病理因素之间的关系及其与卵巢上皮性癌预后的关系，探讨klk14在卵巢上皮性癌组织发生、发展中的作用，更多了解卵巢癌发生发展的分子生物学机制，为卵巢癌的诊断、监测、预后判断和防治提供理论依据。方法1．应用Reverse-transcription PCR检测10例正常卵巢组织和28例卵巢上皮性癌组织中klk14mRNA的表达情况，分析两种组织中klk14mRNA的表达差异。2．应用免疫组织化学技术检测14例正常卵巢组织、28例卵巢良性上皮性肿瘤组织、15例卵巢交界性上皮性肿瘤组织及70例卵巢上皮性癌组织中klk14蛋白的表达情况，分析klk14蛋白表达与卵巢上皮性癌临床病理因素之间的关系及其与卵巢上皮性癌预后的关系。3．统计学处理：采用统计学软件包spssl3.0进行统计分析，计量资料的比较应用t检验（经正态性检验和方差齐性检验），计数资料应用X2检验及X2分割，应用Kaplan-Meier法进行单因素生存分析，应用Cox比例风险模型进行生存多因素分析。采用Log-Rank检验，以双侧α=0.05为检验水准。结果1．正常卵巢组织中klk14mRNA的相对表达量为0.63±0.19，卵巢上皮性癌组织中klk14mRNA的相对表达量为1.36±0.24，较正常卵巢组织klk14mRNA的相对表达量明显增高，两组之间表达的差异具有统计学意义（t=-8.432，P＜0.01）。2．klk14蛋白在正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤组织、交界性卵巢肿瘤组织和卵巢上皮性癌组织之间的阳性表达率分别为14.3％（2／14）、17.9％（5／28）、53.3％（8／15）和61.4％（43／70）。klk14蛋白在不同卵巢组织总体之间表达的差异具有统计学意义（X2=21.648，P＜0.05）。行X2分割后显示，卵巢上皮性癌组织中klk14蛋白的阳性表达率高于良性组织及正常组织中的表达率，差异具有统计学意义（P＜0.001）。3．klk14蛋白的表达与临床病理因素之间的关系：klk14蛋白的表达与FIGO分期、组织学分级和淋巴结转移有关。klk14蛋白在Ⅰ／Ⅱ期和Ⅲ／Ⅳ期卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率分别为44.8％（13／29）和73.2％（30／41），两组间的表达差异具有统计学意义（P＜0.05）；高、中分化（G1+G2）组和低分化（G3）组klk14蛋白的阳性表达率分别为48.7％（19／39）和77.4％（24／31），两组间表达的差异具有统计学意义（P＜0.05）；klk14蛋白在无淋巴结转移组和有淋巴结转移组的阳性表达率分别为58.0％（29／50）和70.0％（14／20），两组间表达的差异具有统计学意义（P＜0.05）。klk14蛋白的表达与年龄、组织学类型和有无腹水无关（P＞0.05）。4．klk14蛋白的表达与卵巢上皮性癌患者预后的关系：经Kaplan-Meier法单因素分析发现，临床分期、病理分级、淋巴结转移、klk14蛋白表达与卵巢上皮性癌患者的预后有关（P＜0.05），经Cox比例风险模型生存多因素分析发现，klk14和临床分期是卵巢上皮性癌预后的独立危险因素（P＜0.05）。结论1．klk14 mRNA和其蛋白的表达程度与卵巢上皮性癌恶性程度相一致，提示其参与了卵巢上皮性癌的发生发展过程。2．klk14蛋白的阳性表达与FIGO分期、组织学分级和淋巴结转移有关，提示klk14蛋白有望成为卵巢上皮性癌临床诊断和监测的一个新的肿瘤标记物。3．klk14蛋白的表达强度与卵巢上皮性癌患者的预后有关，临床分期和klk14蛋白表达是卵巢上皮性癌预后的独立危险因素。检测卵巢上皮性癌组织中的klk14蛋白的表达，结合临床分期可能可以更好的评价卵巢上皮性癌患者生存及预后。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 论文部分 人组织激肽释放酶14在卵巢上皮性癌中的表达及意义的表达及其意义
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述部分 人组织激肽释放酶14与妇科肿瘤的关系
• 参考文献
• 缩略词表
• 在读期间出版的论著
• 致谢