论文摘要
自1973年Steinman和Cohn首次从小鼠淋巴结中分离出一类与粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞形态和功能不同的细胞,具有抗原呈递功能,命名为树突状细胞（dendritic cells , DC）。DC是迄今为止发现的功能最强大的专职抗原递呈细胞（antigen presenting cells , APC） ,其刺激T淋巴细胞尤其是细胞毒性T淋巴细胞（CTL）产生免疫应答的能力,较其他抗原递呈细胞强100～1,000倍,它虽在组织中含量极低,约为所在器官全部细胞的1 %以下,但其在体内分布广泛,除角膜、心、脑外,各组织中均可测到典型的DC ,在机体细胞免疫和体液免疫中均可发挥重要作用[1]。1996年人们克服了分离及增殖的困难以来,以DC为基础的肿瘤免疫治疗倍受关注,是当今肿瘤生物治疗研究热点课题之一。本研究应用基因重组人白介素-4 （rhIL-4）、基因重组人粒/单细胞集落刺激因（rhGM-CSF）联合培养体系自正常外周血单个核细胞诱导产生DC ,使其分别负载HCT-8、BGC-823及SMMC-7721冻融抗原,致敏T淋巴细胞产生CTL。观察负载HCT-8、BGC-823及SMMC-7721冻融抗原的DC对所激发的T淋巴细胞功能的影响及CTL对HCT-8、BGC-823及SMMC-7721细胞的特异性杀伤活性。结果表明:负载冻融抗原后DC的CD1a及CD83表达率较培养前明显增高（P <0.05）,且CD1a增高幅度明显大于CD83的增高幅度。HCT-8冻融抗原负载DC诱导CTL对HCT-8细胞、BGC-823和SMMC-7721细胞在效靶比为50:1时的杀伤率分别为（70.25±1.99） %、（20.48±0.97）%和（21.08±1.68） %,差别有显著性（ P <0.05）。BGC-823冻融抗原负载DC诱导CTL对BGC-823、HCT-8和SMMC-7721细胞在效靶比为50:1时杀伤率为（67.88±1.51） %、（14.85±0.47）%和（15.27±1.45）%,差别有显著性（ P <0.05）。SMMC-7721冻融抗原负载DC诱导CTL对SMMC-7721、HCT-8和BGC-823细胞在效靶比为50:1时杀伤率为（69.05±1.61） %、（19.48±2.55）%和（20.37±2.13）%,差别有显著性（P <0.05）。实验证明,负载冻融抗原DC诱导CTL能对相应的靶细胞产生明显的特异性杀伤作用,且未引起交叉反应。为临床开展肿瘤免疫治疗提供了理论依据。