乳腺癌骨髓微转移检测及肿瘤特异性CTLs细胞的免疫治疗

论文摘要

目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,发病率逐年增高。影响预后的关键因素是远处转移,也是治疗失败的根本原因。虽然采取了以手术为主的综合治疗措施,但远期生存率没有明显提高。多项研究表明,乳腺癌骨髓微转移是临床远处转移灶的先兆,可作为独立因素判断预后,在指导治疗、评价疗效及术后复发、转移的监测上有重要意义。提高乳腺癌患者的生存率、延长生存期,应对骨髓微转移采取治疗。本实验通过对乳腺癌患者骨髓微转移的检测及应用肿瘤特异性CTLs细胞对微转移阳性患者进行治疗,探讨微转移发生规律以及免疫细胞过继治疗对微转移的治疗作用,为乳腺癌的预后判断及制定综合治疗方案提供帮助。方法:选取我院2007年3月至12月期间收治的可手术乳腺癌病例82例,并经病理学证实。研究对象均为女性,年龄27～80岁,中位年龄44.8岁。术前均未行放、化疗及内分泌治疗。按照国际抗癌联盟（UICC,乳腺癌,2002）肿瘤TNM临床分期标准:Ⅰ期8例、Ⅱ期51例、Ⅲ期23例。另设阴性对照10例。术前1-3天抽取骨髓,应用流式细胞术,联合检测骨髓有核细胞中CK18、CK19的阳性细胞表达率。将23例术前骨髓微转移阳性患者分为二组,治疗组17例,术后应用特异性CTL细胞免疫过继治疗。免疫治疗结束后再接受其余综合治疗。对照组6例,术后不接受特异性CTL细胞免疫过继治疗。其余治疗方式及应用时间与第一组相同。免疫治疗组术中取腋下淋巴结及外周血,术后体外诱导培养特异性CTL细胞,于术后10-14天回输,观察特异性CTL细胞对乳腺癌骨髓微转移的疗效。结果1. 82例乳腺癌患者骨髓标本中,23例经FCM检测到CK18+、CK19+/CD45-细胞,骨髓微转移的阳性检出率为28.05%。2.乳腺癌患者的骨髓微转移阳性率随着原发肿瘤的增大而增高,肿瘤直径≤2cm组、25cm组及>5cm组的骨髓微转移阳性率分别为7.69%（1/13）、14.58（7/48）%、71.43%（15/21）,三组间有统计学差异, P=0.0007。3.乳腺癌骨髓微转移阳性率随着临床病理分期增高而增加。临床Ⅰ期组骨髓微转移阳性率12.50%（1/8）,Ⅱ期组17.65%（9/51）,Ⅲ期56.52%（13/23）,三组间有统计学差异,P=0.004。4.乳腺癌骨髓微转移阳性率随着组织学分级增加而增高。组织学分化Ⅲ级组骨髓微转移阳性率为68.42%（13/19）,明显高于Ⅱ级组17.65%（9/51）及Ⅰ级组8.33%（1/12）,三组间比较,有统计学差异,P=0.003。5.乳腺癌患者的骨髓微转移阳性率与患者的年龄、月经状况无关,P>0.05。6.乳腺癌患者的骨髓微转移阳性率随肿瘤组织ER、PR蛋白表达的增强而降低,ER、PR阳性组骨髓微转移阳性率分别为13.33%（4/30）、10.34%（3/29）,明显低于ER、PR阴性组36.54%（19/54）、37.74%（20/53）,P<0.05。乳腺癌患者的骨髓微转移与肿瘤组织C-erbB-2的表达无关（P>0.05）。7.将23例骨髓微转移阳性患者分为二组,治疗组17例均顺利应用特异性肿瘤CTLs细胞过继免疫治疗,其中只有2例患者出现轻度发热、乏力或嗜睡,其他患者未有不适症状。对照组6例未接受治疗。治疗组、对照组于术后20天左右再次抽取骨髓,做微转移检测,并与术前对照,判断疗效。治疗组17例患者中有14例,在治疗后的微转移检测中呈阴性,过继免疫治疗后转阴率为82.4%。对照组6例中,只有1例术后微转移检测为阴性,术后转阴率只有16.7%。差别有统计学意义（P =0.00028）。结论1.应用流式细胞术联合CK18、CK19检测乳腺癌骨髓微转移的阳性率为28.05%。2.本组研究显示,乳腺癌骨髓微转移的阳性率随着临床分期的增加而增高,临床分期与原发肿瘤体积、腋下淋巴结转移等因素直接相关,提示随着肿瘤的侵袭转移能力的增高,肿瘤细胞发生远处播散的机会增加。当处于临床Ⅲ期时,远处转移的机率明显增高。3.乳腺癌骨髓微转移阳性率随组织学分级增加而升高,说明分化程度低的肿瘤细胞具有更强的增殖、侵袭、转移能力,对这部分病人应加强化疗等综合性治疗,密切关注全身转移情况。4.乳腺癌骨髓微转移阳性率随ER、PR蛋白表达增强而降低,说明分化愈差的肿瘤细胞,ER、PR丢失愈多,可能具有更强的增殖、侵袭、转移能力。5.本研究未发现乳腺癌骨髓微转移与患者的年龄、月经状况、病理类型及肿瘤组织中C-erbB-2的表达有关。6.实验数据还中发现,有近12.50%的临床Ⅰ期患者,骨髓微转移阳性。提示乳腺癌属全身系统性疾病,疾病早期即可发生播散和微转移。必须对骨髓微转移采取相应治疗。7.本实验数据显示,23例骨髓微转移阳性患者中,治疗组转阴率为82.4%。对照组转阴率为16.7%。差异具有统计学意义（P=0.00028）。特异性CTL细胞免疫过继治疗对乳腺癌骨髓微转移的清除有效。副反应小,易于接受。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 乳腺癌骨髓微转移检测及肿瘤特异性CTLs细胞的免疫治疗
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 参考文献
• 综述 乳腺癌骨髓微转移检测及相关免疫治疗现状
• 致谢
• 个人简历