芹菜黄酮提取及分离纯化工艺研究

论文摘要

芹菜是一种药食同源的植物,含有很多生物活性物质如芹菜黄酮、不饱和脂肪酸、挥发油、香豆素衍生物等,其中芹菜素、水蓼素、3′,4′,5′,7-四羟基黄酮等黄酮类化合物具有抗氧化、降低脂质过氧化反应、预防心血管疾病、抗衰老等作用,但还未得到有效利用。本文以价廉、高产的芹菜（YS-Q2004）为研究对象,就其中总黄酮的提取分离和纯化工艺进行了探讨。本实验考察了提取溶剂对黄酮提取效果的影响,并在此基础上利用正交试验确定了芹菜中总黄酮提取的最佳工艺条件:以80%（v/v）乙醇溶液为提取溶剂,物料比1:30,提取温度70℃,回流提取时间120min。芹菜总黄酮的分离纯化,通过比较采用AB-8树脂进行吸附,经过筛选优化确定上样pH值、上样流速、洗脱剂浓度、洗脱速度、洗脱时间等最佳工艺条件,此时粗提物中黄酮纯度为5.83%。本次实验探讨出芹菜总黄酮的最佳提取及分离纯化工艺,并首次在纯化环节使用糖化酶,正交试验结果表明:产物纯度大大提高,达34.68%,经抗氧化试验,其抗氧化活性未受到破坏,初步认为糖化酶用于纯化芹菜黄酮是可行的。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 前言
• 1.1 芹菜的食用药用价值
• 1.1.1 芹菜中主要营养成分与营养价值
• 1.1.2 芹菜的药用价值
• 1.2 芹菜的主要化学成分
• 1.2.1 挥发油
• 1.2.2 脂肪酸
• 1.2.3 黄酮类化合物
• 1.2.4 其他成分
• 1.3 芹菜黄酮的功效
• 1.4 黄酮类化合物在食品中的应用
• 1.4.1 功能性食品添加剂
• 1.4.2 黄酮类化合物功能食品
• 1.5 芹菜黄酮类化合物的提取分离
• 1.5.1 黄酮类化合物的结构与分类
• 1.5.2 黄酮类化合物的提取分离方法
• 1.5.3 黄酮类化合物分离纯化方法
• 1.6 国内外研究现状
• 1.7 本研究的目的和意义
• 1.8 主要研究内容
• 第2章 芹菜总黄酮提取工艺的研究
• 2.1 主要实验材料及仪器
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 主要试剂与仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 芹菜总黄酮提取工艺流程
• 2.2.2 芹菜总黄酮定量分析
• 2.2.3 芹菜总黄酮最佳提取工艺条件的确定
• 2.3 实验结果与讨论
• 2.3.1 标准曲线的绘制
• 2.3.2 筛选提取溶剂
• 2.3.3 物料比对提取效果的影响
• 2.3.4 乙醇浓度对提取效果的影响
• 2.3.5 提取温度对提取效果的影响
• 2.3.6 提取时间对提取效果的影响
• 2.3.7 乙醇提取芹菜总黄酮正交试验的结果与分析
• 2.3.8 验证试验
• 第3章 芹菜黄酮纯化工艺的研究
• 3.1 材料、试剂与仪器
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 主要试剂与仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 芹菜黄酮粗品纯化的工艺流程
• 3.2.2 芹菜黄酮纯化工艺的研究
• 3.3 实验结果与讨论
• 3.3.1 静态吸附与解吸筛选吸附剂
• 3.3.2 上样pH值的确定
• 3.3.3 上样流速的确定
• 3.3.4 洗脱剂浓度的确定
• 3.3.5 洗脱剂流速的确定
• 3.3.6 最佳吸附时间的确定
• 3.3.7 洗脱终点的确定
• 3.3.8 芹菜黄酮纯度检测
• 第4章 使用糖化酶促进纯化效果工艺条件的研究
• 4.1 糖化酶
• 4.1.1 糖化酶概述
• 4.1.2 糖化酶作用方式
• 4.2 材料、试剂与仪器
• 4.2.1 材料
• 4.2.2 试剂与仪器
• 4.3 使用糖化酶促进纯化效果工艺条件的研究
• 4.3.1 纯化过程中使用糖化酶的工艺流程
• 4.3.2 pH值对糖化酶处理芹菜黄酮浓缩液影响的研究
• 4.3.3 糖化酶用量的研究
• 4.3.4 温度对糖化酶促进纯化芹菜黄酮效果的研究
• 4.3.5 酶作用时间的研究
• 4.3.6 使用糖化酶促进芹菜黄酮纯化效果的正交试验
• 4.4 实验结果与讨论
• 4.4.1 用糖化酶纯化芹菜黄酮时pH值的影响
• 4.4.2 糖化酶用量对纯化效果的影响
• 4.4.3 糖化酶作用温度对纯化效果的影响
• 4.4.4 糖化酶作用时间对纯化效果的影响
• 4.4.5 糖化酶影响芹菜黄酮纯化效果的正交试验结果
• 4.4.6 验证试验
• 第5章 黄酮抗氧化实验
• 5.1 黄酮的抗氧化作用的机制
• 5.2 超氧阴离子自由基的测定方法
• 5.2.1 实验原理
• 5.2.2 样品的制备
• 5.2.3 实验方法
• 5.3 清除羟基自由基实验
• 5.3.1 实验原理
• 5.3.2 样品制备
• 5.3.3 实验方法
• 5.4 超氧阴离子自由基及羟基自由基清除实验结果
• 5.4.1 超氧阴离子自由基清除实验结果
• 5.4.2 羟基自由基清除实验结果
• 结论
• 参考文献
• 致谢