论文题目: 芯片电泳系统研制与应用研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 分析化学
作者: 周小棉
导师: 林炳承
关键词: 电泳芯片分析仪,塑料芯片,临床应用,相互作用
文献来源: 中国科学院研究生院（大连化学物理研究所）
发表年度: 2005
论文摘要: 设计并研制出了由一台激光诱导荧光芯片电泳仪、一种注塑型聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)多通道电泳芯片和相关分析试剂组成的准商品化芯片电泳系统。芯片电泳仪的特点为:采用电荷耦合器件实现聚集和芯片通道监测;发射波滤光片可更换;灵敏度高,检测限低,线性范围宽。在国内首次建立了一套优良的可规模化生产塑料电泳芯片的工艺,并批量生产出了PMMA 芯片。发明了一种在常温、低压条件下利用混合有机溶剂封接PMMA 芯片的新方法。发明了一种在塑料芯片原料中加入改性剂的新改性方法,改性效果明显,方法简单、省时。利用芯片电泳与DNA 甲基化特异性聚合酶链反应联用方法分析了肿瘤病人甲基化p16 基因,方法具有快速、高灵敏特点,为肿瘤的更早期诊断提供了一项新的检测技术。建立并首次报道了芯片PCR-芯片电泳系统检测SARS 病毒的新方法。该方法具有分析快速、检出率高等特点,突显出在病原菌早期检测方面的优势,将成为早期诊断病原菌疾病的一项新技术。在自行研制的芯片电泳平台上完成了四种抗肿瘤药物与寡聚核苷酸分子相互作用的研究。首次利用无胶筛分芯片电泳完成了放线菌素D 与单、双链DNA结合常数、化学计量结合比的测定,并利用质谱验证了其结果。芯片电泳是一种可用于药物与DNA 分子弱相互作用或强相互作用研究的新分析平台。
论文目录:
第一章 芯片电泳系统及其发展
1.1 引言
1.2 芯片电泳系统及其特点
1.3 电泳芯片
1.3.1 电泳芯片的材料
1.3.1.1 硅
1.3.1.2 石英和玻璃
1.3.1.3 有机高分子聚合物
1.3.2 电泳芯片设计
1.3.3 硅、玻璃和石英电泳芯片制造方法
1.3.4 高分子聚合物电泳芯片制作方法
1.3.4.1 热压法
1.3.4.2 注塑法
1.3.4.3 模塑法
1.3.4.4 LIGA技术
1.3.4.5 激光烧蚀法
1.3.5 芯片打孔
1.3.6 芯片封接
1.3.6.1 玻璃和石英芯片的封接
1.3.6.2 高分子聚合物芯片的封接
1.4 芯片电泳分析仪
1.4.1 光学检测器
1.4.1.1 激光诱导荧光检测器
1.4.1.2 吸收光度检测器
1.4.1.3 化学发光检测器
1.4.1.4 激光热透镜检测器
1.4.1.5 折光率检测器
1.4.2 其它检测器
1.5 芯片电泳分析试剂
1.6 芯片电泳系统的应用
1.6.1 肽与蛋白质分析
1.6.1.1 肽分析
1.6.1.2 酶分析
1.6.1.3 免疫球蛋白分析
1.6.1.4 其它蛋白分析
1.6.2 细胞分析
1.6.2.1 细胞计数与分选
1.6.2.2 单细胞分析
1.6.2.3 细胞内涵物分析
1.6.3 小分子分析
1.6.3.1 有机小分子分析
1.6.3.2 氨基酸分析
1.6.3.3 药物分析
1.6.4 DNA与基因分析
1.6.4.1 DNA分析与测序
1.6.4.2 基因检测
1.6.5 药物相互作用研究
1.7 芯片电泳系统发展趋势与展望
1.8 本论文所涉及的芯片电泳系统及应用研究概述
参考文献
第二章 激光诱导荧光芯片电泳分析仪研制
摘要
2.1 引言
2.2 实验部分
2.2.1 零配件与试剂
2.2.2 芯片电泳分析仪的研制
2.2.2.1 光学系统
2.2.2.2 电路
2.2.2.3 信号采集
2.2.2.4 软件部分
2.2.3 实验方法
2.3 结果与讨论
2.3.1 共聚焦检测与光路特点
2.3.2 激光聚焦与实时监测
2.3.3 性能考察
2.3.4 样品分析
2.4 结论
参考文献
第三章 聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)电泳芯片研制
摘要
3.1 引言
3.2 实验部分
3.2.1 仪器与试剂
3.2.2 芯片制造过程
3.2.3 芯片理化特性测定
3.2.4 实验方法
3.2.5 样品准备
3.3 结果与讨论
3.3.1 芯片设计与制造
3.3.2 芯片的物理特性
3.3.3 芯片的重现性
3.3.4 芯片对罗丹明6G的检测
3.3.5 芯片的分离效果
3.3.6 芯片的改性效果考察
3.3.7 芯片的应用
3.4 结论
参考文献
第四章 芯片电泳系统的应用之一:肿瘤甲基化p16基因分析
摘要
4.1 引言
4.2 实验部分
4.2.1 仪器与试剂
4.2.2 临床样品
4.2.3 DNA准备
4.2.4 改良半巢式MSP
4.2.5 芯片电泳分析方法
4.2.6 改良MSP产物电泳分析
4.3 结果与讨论
4.3.1 芯片电泳与凝胶电泳检测限比较
4.3.2 芯片电泳的性能考察
4.3.3 阳性和阴性样品分析
4.3.4 方法特异性比较
4.3.5 样品分析结果
4.4 结论
参考文献
第五章 芯片电泳系统应用之二:SARS病毒检测
摘要
5.1 引言
5.2 实验部分
5.2.1 仪器与试剂
5.2.2 SARS样品
5.2.3 逆转录PCR
5.2.4 PCR玻璃芯片研制
5.2.5 芯片热循环仪与芯片PCR
5.2.6 芯片电泳分析
5.3 结果与讨论
5.3.1 激光诱导荧光芯片电泳仪的检测灵敏度
5.3.2 单引物PCR反应
5.3.3 双重PCR条件的优化
5.3.4 芯片PCR与芯片电泳在线检测
5.3.5 临床样品检测
5.4 结论
参考文献
第六章 芯片电泳系统应用之三:抗肿瘤药物与DNA相互作用研究
摘要
6.1 引言
6.2 实验部分
6.2.1 仪器与试剂
6.2.2 双链DNA准备
6.2.3 DNA与抗肿瘤药物的相互作用样品准备
6.2.4 试验条件
6.3 结果与讨论
6.3.1 卡铂、顺铂与双链DNA的相互作用
6.3.2 博来霉素与双链DNA相互作用
6.3.3 放线菌素D与单、双链DNA相互作用
6.4 结论
参考文献
作者简历及发表文章目录
致谢
后记
发布时间: 2005-10-15
参考文献
- [1].提高单细胞分析选择性和芯片电泳进样性能的研究[D]. 朱兰兰.浙江大学2008
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