论文摘要
缺血预处理（ischemic preconditioning, IPC）对缺血/再灌注心肌的保护作用已在多种属动物在体、离体心脏和心肌细胞上得到证实,该现象可以被缺氧预处理（hypoxic preconditioning, HPC）模拟。预处理的保护作用具有时相性,包括预处理后即刻出现并持续1-3小时的早期保护和12-24小时再度出现并持续24-72小时的延迟保护,其中延迟保护作用具有更重要的临床意义。从预处理心肌保护机制的研究入手,探讨缺血性心脏病防治的新策略,受到基础和临床医学界的高度重视。 现有研究结果表明,预处理的延迟保护机理涉及腺苷、内皮源性舒张因子（EDRF）、一氧化氮（NO）等内源性保护介质释放,蛋白激酶C（protein kinase C, PKC）和丝裂素活化蛋白激酶家系（mitogen-activated protein kinases, MAPKs）等细胞信号转导途径激活,以及内源性保护蛋白转录、合成、翻译后修饰改变等多种因素,其中内源性保护蛋白合成上调是延迟保护的关键环节,但目前预处理延迟保护过程中心肌蛋白质组学变化及其细胞信号转导机制尚未完全阐明。 本工作证实HPC对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）损伤具有延迟保护作用的基础上,进一步研究HPC延迟心肌保护的细胞信号转导机制及其诱导的心肌细胞蛋白质组学变化。具体方法如下: 1、在乳鼠心肌细胞H/R模型上,采用台盼蓝排斥实验检测心肌细胞存活率,以TUNEL法、DNA特异性荧光素染料Hoechst33258染色等方法测定心肌细胞凋亡率,证实缺氧预处理明显减轻24小时后H/R诱导的心肌细胞损伤。 2、Western bolt检测证实,HPC后24h心肌细胞内PKC亚型nPKCε和MAPKs家系成员细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated
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