杭天宇:羊种布鲁氏菌Rev.1株VjbR基因的克隆、原核表达及生物信息学分析论文

杭天宇:羊种布鲁氏菌Rev.1株VjbR基因的克隆、原核表达及生物信息学分析论文

本文主要研究内容

作者杭天宇,宋前进,金铭,关平原,温永俊(2019)在《羊种布鲁氏菌Rev.1株VjbR基因的克隆、原核表达及生物信息学分析》一文中研究指出:本研究旨在构建表达载体pET-30a-VjbR,进而表达布鲁氏菌VjbR蛋白;利用生物软件分析该蛋白生物信息学信息,为进一步研究该蛋白奠定基础。以布鲁氏菌Rev.1株基因组为模板,扩增VjbR基因序列,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒pET-30a-VjbR,并进行原核表达、Western-blot检测及该基因的生物信息学分析。结果显示:本试验成功克隆并表达了VjbR基因;经对表达产物进行SDS-PAGE分析纯化,发现本试验得到较纯蛋白;经Western-blot检测,发现该基因表达蛋白可与布鲁氏菌羊阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性;通过生物信息学系列软件统计分析,发现VjbR蛋白无跨膜区,无信号肽,且该蛋白共有15个抗原决定簇,在二级结构中,α-螺旋的氨基酸有131个,占比为49.81%。布鲁氏菌VjbR基因的成功表达与纯化,为进一步制备该蛋白的单克隆抗体及iELISA诊断试剂盒的研制奠定了基础。

Abstract

ben yan jiu zhi zai gou jian biao da zai ti pET-30a-VjbR,jin er biao da bu lu shi jun VjbRdan bai ;li yong sheng wu ruan jian fen xi gai dan bai sheng wu xin xi xue xin xi ,wei jin yi bu yan jiu gai dan bai dian ding ji chu 。yi bu lu shi jun Rev.1zhu ji yin zu wei mo ban ,kuo zeng VjbRji yin xu lie ,jiang ji ke long zhi yuan he biao da zai ti pET-30a(+)zhong ,huo de chong zu zhi li pET-30a-VjbR,bing jin hang yuan he biao da 、Western-blotjian ce ji gai ji yin de sheng wu xin xi xue fen xi 。jie guo xian shi :ben shi yan cheng gong ke long bing biao da le VjbRji yin ;jing dui biao da chan wu jin hang SDS-PAGEfen xi chun hua ,fa xian ben shi yan de dao jiao chun dan bai ;jing Western-blotjian ce ,fa xian gai ji yin biao da dan bai ke yu bu lu shi jun yang yang xing xie qing fa sheng te yi xing fan ying ,ju you liang hao de fan ying yuan xing ;tong guo sheng wu xin xi xue ji lie ruan jian tong ji fen xi ,fa xian VjbRdan bai mo kua mo ou ,mo xin hao tai ,ju gai dan bai gong you 15ge kang yuan jue ding cu ,zai er ji jie gou zhong ,α-luo xuan de an ji suan you 131ge ,zhan bi wei 49.81%。bu lu shi jun VjbRji yin de cheng gong biao da yu chun hua ,wei jin yi bu zhi bei gai dan bai de chan ke long kang ti ji iELISAzhen duan shi ji he de yan zhi dian ding le ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国动物检疫的杭天宇,宋前进,金铭,关平原,温永俊,发表于刊物中国动物检疫2019年12期论文,是一篇关于布鲁氏菌论文,基因论文,原核表达论文,免疫原性论文,中国动物检疫2019年12期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国动物检疫2019年12期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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