压力作用下纯化大鼠视网膜神经节细胞DNA单链断裂修复与凋亡的实验观察

论文摘要

目的:观察原代培养的纯化视网膜神经节细胞（Retinal Ganglion Cells , RGCs）在不同压力和时间下,是否出现DNA单链断裂修复以及其变化趋势,探讨该损伤与凋亡之间的联系,为进一步了解青光眼发病机制和有效实施视神经保护提供初步理论参考。方法:取生后1-3dSD大鼠乳鼠视网膜,运用两步免疫盘化法（two-step immune panning）获得纯化RGCs,选择适当培养条件培养纯化RGCs用于制备体外加压培养模型,分别通过单细胞凝胶电泳和流式细胞仪检测在不同压力（0mmHg、40mmHg、60mmHg和80mmHg）作用下不同时点（12h、24h和48h）RGCs的DNA单链断裂损伤、修复和细胞凋亡,并探讨它们之间的关系。结果:①各组压力作用下的RGCs均可观察到彗星细胞,其数量和Olive尾距（OTM）随压力和时间的增长明显增加（P<0.05）,其中60mmHg下24h-48h为增长快速期;②该DNA单链断裂损伤存在修复;③凋亡率（AP%）随压力和时间的增长而增加（P<0.05）,其变化趋势与OTM呈现密切相关关系。结论:压力可致体外培养的RGCs出现DNA单链断裂损伤,60mmHg下24h-48h为损伤加速期,此期前可观察到明显的DNA修复作用;各组压力下RGCs的DNA损伤程度与凋亡率呈密切相关关系。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 实验材料
• 实验方法
• 实验结果
• 附图
• 讨论
• 参考文献
• 综述 DNA 损伤修复与细胞凋亡
• 参考文献
• 致谢