滑菇杂交新品种选育、菌种质量评价及亲缘关系研究

滑菇杂交新品种选育、菌种质量评价及亲缘关系研究

论文摘要

滑菇是美味珍稀的食用菌之一,同时又具有很高的药用价值,在我国许多地区都有栽培。河北省平泉县是我省滑菇主产区,其生产的滑菇畅销国内外,滑菇产业的发展对促进平泉的经济和社会发展起了重要的推动作用。但近几年,在滑菇生产上出现一些问题,这些问题可归结为两个方面:一是所用滑菇菌种普遍退化、老化,造成菇农栽培风险加大,经济效益下滑;二是滑菇菌种市场极为混乱。由于目前尚没有关于食用菌菌种质量评价的科学体系,菌种质量和产销管理薄弱,一定程度上造成了食用菌菌种杂、多、乱现象的发生,严重损害了菇农利益。为了解决以上问题,本研究首先利用当地两个滑菇主栽品种C3-1和早丰112作为亲本,采用传统的单孢杂交育种方法进行了滑菇杂交新品种的选育,以期获得同时具有双亲优良性状的新品种。同时,为了科学评价菌种质量,解决同种异名等现象,对平泉县提供的13个滑菇菌株的菌种质量进行了评价。此外,本论文还对从全国不同地区搜集到的16个滑菇主栽品种的分子标记和亲缘关系进行了研究。主要结果如下:1.通过单孢配对、杂交育种实验,共得到43个杂交组合;经过菌丝长势观察、生长速度测定及出菇试验筛选,最终筛选出1个菌丝长速快、污染率低、产量高的优良菌株,可以用于生产推广。2.采用生物化学技术对平泉县提供的13个滑菇菌株进行了质量评价,包括菌丝生长速度的比较,胞外酶(纤维素酶、木聚糖酶和漆酶)活力的比较,拮抗实验及酯酶同工酶实验。结果表明:在PDA加富培养基上生长较快的菌株是4号(SB2林盛)、5号(107林盛)和7号(C3-1林盛)菌株;在模拟出菇培养基上生长较快的是7号(C3-1林盛)、9号(C3-3林盛)和11号(470林盛)菌株。在胞外酶活力的测定中,纤维素酶活力较高的是1号(早生1号林盛)、4号、5号、和7号菌株,木聚糖酶活力较高的是1号、4号和7号菌株,漆酶活力较高的是7号、8号(C3-2林盛)和13号(112土肥站)菌株。综合考虑,7号菌株为优良菌株。3.通过拮抗实验和酯酶同工酶技术对平泉县提供的13个滑菇菌株的亲缘关系进行鉴定,初步表明,4号和11号(470林盛),6号(CTE林盛)和7号,12号(早生112)和13号菌株分别为相同的菌株,即为“同种异名”菌株。其它如1号、2号(早生2号林盛)和5号菌株,11号和13号菌株,6号和10号(C3-1森源)菌株的亲缘关系也很近;9号(C3-3林盛)菌株与其它各个菌株的亲缘关系较远。在相似系数0.80水平上13个滑菇菌株被聚为5类,第1类包括9号菌株,第2类包括6号、7号和10号菌株,第3类包括8号菌株,第4类包括3号(早生4号林盛)菌株,第5类包括1号、2号、4号、5号、11号、12号和13号菌株。4.通过酯酶同工酶技术和RAPD(randomly amplified polymorphic DNA)分子标记技术明确了全国16个滑菇品种间的亲缘关系,并且酯酶同工酶实验和RAPD分子标记所得到的16个滑菇菌种的亲缘关系基本一致,结果表明:5号(滑菇早壮)和7号(东北1号)菌株,10号(滑菇518)和14号(滑菇5188)菌株,12号(澳羽32)和15号(工羽3)菌株的相似系数都很高,即它们的亲缘关系很近;而16号(滑菇一号)菌株与其它各个菌株的亲缘关系都较远。通过2种方法的结果比较,表明酯酶同工酶技术和RAPD分子技术均为鉴定滑菇菌株亲缘关系可靠手段。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 引言
  • 文献综述
  • 1 滑菇概述
  • 1.1 滑菇的生物学特性
  • 1.2 滑菇的营养与药用价值
  • 1.3 滑菇生长发育所需的营养条件
  • 1.4 滑菇生长发育所需的环境条件
  • 2 食用菌菌种选育方法研究进展
  • 2.1 野生食用菌驯化育种
  • 2.2 食用菌杂交育种
  • 2.3 原生质体融合育种
  • 2.4 诱变育种
  • 3 食用菌菌种质量评价研究概况
  • 3.1 食用菌菌种在生产上的重要性
  • 3.2 食用菌菌种退化、老化的原因及防止措施
  • 3.3 食用菌菌种质量评价的方法
  • 4 食用菌亲缘关系鉴定方法研究进展
  • 4.1 拮抗试验
  • 4.2 同工酶检测方法
  • 4.3 DNA 分子标记方法
  • 第一章 滑菇杂交新品种选育研究
  • 1 材料
  • 1.1 实验菌株
  • 1.2 主要试剂
  • 1.3 主要仪器
  • 1.4 培养基
  • 1.5 溶液
  • 2 方法
  • 2.1 滑菇孢子的收集
  • 2.2 滑菇孢子的稀释培养
  • 2.3 滑菇菌落的挑取、配对杂交及核相检验
  • 2.4 杂交品种的比较筛选
  • 3 结果
  • 3.1 滑菇杂交实验结果
  • 3.2 杂交种实验室初步筛选结果
  • 3.3 杂交种出菇实验筛选结果
  • 4 小结
  • 5 讨论
  • 第二章 平泉县13 个主要滑菇菌种质量评价研究
  • 1 材料
  • 1.1 实验菌株
  • 1.2 主要试剂
  • 1.3 溶液
  • 1.4 培养基
  • 1.5 主要仪器
  • 2 方法
  • 2.1 菌丝生长势的测定
  • 2.2 酶活力的测定
  • 2.3 拮抗性实验
  • 2.4 酯酶同工酶实验方法
  • 3 结果
  • 3.1 平泉县13 个滑菇菌种菌丝生长势评价
  • 3.2 平泉县13 个滑菇菌种胞外酶活力测定结果
  • 3.3 平泉县13 个滑菇菌种酯酶同工酶图谱比较
  • 4 小结
  • 5 讨论
  • 第三章 全国不同地区16 个滑菇菌株亲缘关系分析
  • 1 材料
  • 1.1 实验菌株
  • 1.2 主要试剂
  • 1.3 主要仪器
  • 1.4 主要溶液
  • 1.5 培养基
  • 2 方法
  • 2.1 滑菇菌株酯酶同工酶的比较
  • 2.2 滑菇菌株的RAPD 分析
  • 3 结果
  • 3.1 全国不同地区16 个滑菇菌株的酯酶同工酶分析
  • 3.2 全国不同地区16 个滑菇菌株的RAPD 分析
  • 4 小结
  • 5 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 相关论文文献

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