论文摘要
本研究的目的是对热带醋杆菌(Acetobacter tropicalis)的生理生化特性、液体培养条件进行探讨,并在罗非鱼养殖中添加热带醋杆菌对水质COD、NH4+-N、指标,鱼的生长性能,鱼体胃肠道的消化酶以及免疫性能等的影响进行研究,为今后水产养殖业的应用提供科学依据。主要研究以下四个部分:试验一热带醋杆菌的生理特性和优化培养条件的研究通过对热带醋杆菌的形态学特征、培养性状和生理生化特征的分析,结果显示:热带醋杆菌镜检为革兰氏阴性杆状,单个、成对、或成链状,大小为0.5~0.7×1.8~2.0μm,菌落为圆形,凸起,有光泽,半透明:该菌能够在pH 3.7、4.5及5%乙醇中生长,接种葡萄糖、甘露糖、硝酸盐(还原)、氧化发酵试验培养基、果糖、醋酸盐、接触酶呈阳性,阿拉伯糖、卫茅醇、淀粉、肌醇、麦芽糖、甘露醇、木糖、甘油生成酮呈阴性;该菌31h为生长高峰期;发酵过程一直产酸,pH基本保持在3.17左右;热带醋杆菌有一定的耐盐性。对热带醋杆菌进行单因素多因子和正交优化培养,初步确定其最适的培养条件为:葡萄糖0.25%、KH2PO40.1%、(NH4)2SO4 1.0%,酵母膏0.5%,pH 4.5、温度37℃、转速100 rpm,接种量为6%,装瓶量为70/150 mL。温度、氮源的变化对热带醋杆菌生长的影响较大。试验二热带醋杆菌对水质的影响在罗非鱼的基础日粮添加不同浓度0、1%、2%、3%和4%组的热带醋杆菌菌液(109cfu/mL),定期检测养殖水体中NH4+-N,COD的变化。试验期13 d。结果表明:经过13 d试验后,对照组、1%、2%、3%、4%试验组的COD值分别为23.46 mg/L、22.60 mg/L、19.83 mg/L、16.65 mg/L、15.22 mg/L;氨氮值分别为205.31μg/L、195.26μg/L、161.44μg/L、131.71μg/L、107.85μg/L。说明热带醋酸杆菌能明显改善养殖水体水质条件,随着菌液添加量的增多,净化作用越强。试验三热带醋杆菌对罗非鱼消化酶的影响在罗非鱼基础日粮中分别添加0、1%、2%、3%和4%热带醋杆菌菌液(109cfu/mL),观察其对鱼的生长效果和胃肠道消化酶变化的影响。试验期30天。结果是:添加4%的热带醋杆菌组的增重率比对照组相比提高了15.89%,差异显著(p<0.05)。热带醋杆菌可提高罗非鱼肠道蛋白酶活性,4%组添加量蛋白酶活性提高33.1%(p<0.05),效果最佳;对罗非鱼肠道淀粉酶活性无影响;对罗非鱼肠道脂肪酶活性是随着添加量的增加而升高,3%添加组脂肪酶活性提高29.71%,效果最佳;4%组脂肪酶活性骤然下降。可见在罗非鱼日粮中添加热带醋杆菌能显著改善鱼的生长速度,提高胃肠道的蛋白酶、脂肪酶活性,达到改善生长性能的目的。试验四热带醋杆菌对罗非鱼免疫性能的影响在罗非鱼基础日粮中分别添加0、1%、2%、3%和4%热带醋杆菌菌液(109cfu/mL),观察其对鱼的血清溶菌酶、血清超氧化物歧化酶(SOD)、血清碱性磷酸酶(AKP)、血清酸性磷酸酶(ACP)活性变化的影响。试验期30d。结果是:随着热带醋杆菌添加量的增加,3%组血清溶菌酶活性、血清碱性磷酸酶(AKP)活性、血清酸性磷酸酶(ACP)活性比对照组分别增加了40.57%,11.98%,20.4%和55.1%,差异均显著(p<0.05);4%组溶菌酶活性、血清碱性磷酸酶(AKP)活性、血清酸性磷酸酶(ACP)活性有下降趋势。综上所得说明在罗非鱼日粮添加热带醋杆菌可改善鱼体的非特异免疫功能,添加量3%较理想。综上可知,热带醋杆菌是一种可以明显改善养殖水体水质条件,促进罗非鱼的生长,提高罗非鱼肠道消化酶活性和血清非特异性免疫活性的微生态制剂。