LXRα激活剂（T-0901317）对鹅肝细胞中TG蓄积及脂肪生成相关基因表达的影响

论文摘要

肝脏X受体（LXR）是重要的脂质传感器,通过调节脂肪酸的合成来调控脂质的动态平衡,这种调控是通过对其关键靶基因（SREBP-I、LPL、FAS和LXRα等）的转录调节来实现的。本试验以鹅原代肝细胞为材料,研究LXRα激活剂对四川白鹅和朗德鹅肝细胞TG含量、FAS活性及相关靶基因表达的影响。研究结果如下:1.随LXRα激活剂浓度的增加,四川白鹅和朗德鹅肝细胞TG含量也增加。在LXRα激活剂浓度为10μmol/L时,四川白鹅为和朗德鹅肝细胞TG含量均达到最大（分别为1.22 mmol/L和1.67 mmol/L）。在相同的浓度处理下,朗德鹅肝细胞TG含量均高于四川白鹅。2.随培养时间的延长,四川白鹅和朗德鹅肝细胞TG含量呈先增后降的趋势,其最大值出现在培养48 h。在相同时间段内,朗德鹅肝细胞TG含量均高于四川白鹅。3.随LXRα激活剂浓度的增加,两种鹅肝细胞FAS活性均升高。在相同的浓度处理下,朗德鹅肝细胞FAS活性均高于四川白鹅。4.随培养时间的延长,四川白鹅和朗德鹅肝细胞FAS活性呈先增后降的趋势,其最大值出现在培养48 h（分别为231.97 U/ml和297.56 U/ml）。在同一时间段内,朗德鹅肝细胞FAS活性均高于四川白鹅。5.随LXRα激活剂浓度的增加,四川白鹅和朗德鹅肝细胞LXRα、SREBP-l、FAS及LPL mRNA的表达量均呈升高的趋势,其中10μmol/L的LXRα激活剂的表达量最大。在相同的浓度处理下,朗德鹅肝细胞LXRα、SREBP-l、FAS及LPL mRNA相对表达量均高于四川白鹅。6.随培养时间的延长,四川白鹅和朗德鹅肝细胞LXRα、SREBP-l及FAS mRNA的表达量均呈先升后降的趋势,且48 h均达到最大值。在同一时间段内,朗德鹅肝细胞LXRα、SREBP-l及FAS mRNA的表达量均高于四川白鹅。7.相关分析表明,不同浓度的LXRα激活剂与四川白鹅肝细胞FAS mRNA表达量呈显著正相关,而与其他指标及朗德鹅的各项指标相关性不显著。LXRα激活剂四川白鹅和朗德鹅肝细胞TG含量、FAS活性调空与对LXRα、SREBP-l、FAS mRNA表达量呈显著正相关。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 1 文献综述
• 1.1 LXRα概述
• 1.1.1 LXRs的发现与分布
• 1.1.2 LXRs的转录活化过程
• 1.1.3 LXRα激活剂的研究概况
• 1.2 LXRα的生理功能
• 1.2.1 LXRα对肝脏脂肪酸生成的影响
• 1.2.2 LXRs在肝脏调控胆固醇分解中的作用
• 1.2.3 LXR和糖代谢的关系
• 1.3 影响LXRα表达的因素
• 1.3.1 PPARs调控LXRα
• 1.3.2 脂肪酸和胰岛素对LXRα的影响
• 1.3.3 LXRα的自动调节
• 1.4 本研究的目的与意义
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 材料来源
• 2.1.2 主要仪器设备
• 2.1.3 试验试剂及配置
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 细胞培养
• 2.2.2 MTT比色法测细胞活性
• 2.2.3 鹅肝细胞中TG含量的检测
• 2.2.4 FAS活性检测
• 2.2.5 实时荧光定量PCR
• 2.3 数据统计分析
• 3 结果与分析
• 3.1 LXRα激活剂对鹅肝细胞活性的影响
• 3.2 LXRα激活剂对鹅肝细胞TG蓄积作用的影响
• 3.2.1 不同浓度的影响
• 3.2.2 不同培养时间的影响
• 3.3 LXRα激活剂对鹅肝细胞内FAS活性的影响
• 3.3.1 不同浓度的影响
• 3.3.2 不同培养时间的影响
• 3.4 荧光定量PCR
• 3.4.1 细胞总RNA的提取
• 3.4.2 常规PCR反应结果
• 3.4.3 荧光定量PCR标准曲线
• 3.4.4 扩增产物的特异性
• 3.5 LXRα激活剂对LXRα、SREBP-1、FAS及LPL基因表达的影响
• 3.5.1 LXRα激活剂对LXRα mRNA表达的影响
• 3.5.2 LXRα激活剂对SREBP-1 mRNA表达的影响
• 3.5.3 LXRα激活剂对FAS mRNA表达的影响
• 3.5.4 LXRα激活剂对LPL mRNA表达的影响
• 3.6 不同培养时间对LXRα、SREBP-1和FASmRNA表达的影响
• 3.7 LXRα激活剂与TG含量、FAS活性及相关基因表达间的关系
• 3.8 TG含量、FAS活性与LXR α、SREBP-1、FAS基因表达间的关系
• 4 讨论
• 4.1 LXRα在鹅肝细胞脂肪酸生成中的作用
• 4.2 LXR激活剂诱导肝脂肪酸生成的分子机制
• 4.2.1 SREBP-1在LXR激活剂诱导肝脂肪酸生成中的作用
• 4.2.2 FAS基因在LXR激活剂诱导肝脂肪酸生成中的作用
• 4.2.3 LXRα激活剂对LPL的调控作用
• 4.2.4 LXR激活剂在诱导肝脂肪变性中的作用
• 4.3 各种实时荧光定量PCR方法比较
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间发表的论文