丹参提取物指纹图谱研究

论文摘要

丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。味苦,性微寒,归心、肝二经,具有活血化瘀,清心除烦之功效,是常用中药。但是目前不同产地的丹参药材的质量差异很大,同时习用混用品种遍布各地。收集全国不同丹参主产区的43批样品,通过HPLC法对其有效成分的含量进行测定。从结果来看,不同产区含量参差不齐,说明丹参种植过程中,药材种植管理规范(Good Agricultural Practices,GAP)并未普及;豫西产区丹参中有效成分的含量较高于其他产区,经过分析发现含量与地域性具有一定的相关性。提取物既是一种新的药物剂型,也可以作为丹参药品生产质量管理规范(Good Manufacturing Practice,GMP)生产的标准化投料,然而中药生产过程中中间体(提取物)的规范化生产直接影响丹参成药的质量,因此对丹参提取物规范化生产工艺的甄选显得尤为必要。丹参是热敏性物质,提取工艺首选常温提取法。以脂溶性有效成分丹参酮IIA、丹参酮I、隐丹参酮、二氢丹参酮和水溶性有效成分丹参酚酸B作为评价提取工艺的指标,分别比较了渗漉法,超声提取法,闪式提取法和常温动态逆流提取法等几种常温提取法的优劣。结合原药材图谱发现,渗漉法所得提取物有效成分含量和提取物收率较高,并且提取物与原药材图谱中成分一致,说明较优方法为渗漉法。现有的针对中药材中单一成分进行定性、定量分析的质量控制模式不能有效控制中采用中药色谱指纹图谱技术,依照丹参药材指纹图谱的模式,并结合数个化学对照品,通过对样品采集、方法学研究和考察、特征信息的提取,建立丹参提取物TLC和HPLC指纹图谱。此方法体现了以丹参酮IIA、二氢丹参酮、丹参酮I、隐丹参酮,原儿茶醛、丹参素、丹参酚酸B为指标的整体特征,并用其对丹参质量进行表征。获得的指纹图谱分离度、分辨率、重现性与稳定性均较理想,提供了较常规质量标准更深层次质量评价依据,为生产工艺的优化检测起到良好的作用,同时也对丹参提取物作为中药材标准物质研究提供参考,达到成分明确、含量清楚、比例稳定、质量可控药的内在质量,无法满足当前对于客观有效地评价和控制中药质量的迫切要求。而指纹图谱分析是对中药进行综合宏观分析的可行手段,采用中药色谱指纹图谱技术,依照丹参药材指纹图谱的模式,并结合数个化学对照品,通过对样品采集、方法学研究和考察、特征信息的提取,建立丹参提取物TLC和HPLC指纹图谱。此方法体现了以丹参酮IIA、二氢丹参酮、丹参酮I、隐丹参酮,原儿茶醛、丹参素、丹参酚酸B为指标的整体特征,并用其对丹参质量进行表征。获得的指纹图谱分离度、分辨率、重现性与稳定性均较理想,提供了较常规质量标准更深层次质量评价依据,为生产工艺的优化检测起到良好的作用,同时也对丹参提取物作为中药材标准物质研究提供参考,达到成分明确、含量清楚、比例稳定、质量可控。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 引言
• 1.2 中药提取物的发展
• 1.2.1 中药提取物的概念及特点
• 1.2.2 中药提取物研究国内外现状
• 1.3 中药指纹图谱的研究概况
• 1.3.1 中药指纹图谱的概念、属性
• 1.3.2 国外指纹图谱的研究
• 1.3.3 国内指纹图谱研究
• 1.4 丹参研究概况
• 1.4.1 丹参化学成分的研究概况
• 1.4.2 丹参及其提取物研究概况
• 1.5 本课题的研究意义及内容
• 第2章 丹参有效成分含量测定
• 2.1 引言
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 仪器
• 2.2.2 试剂
• 2.2.3 色谱条件
• 2.2.4 供试品溶液制备
• 2.2.5 对照品溶液制备
• 2.2.6 水分测定
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 线性范围
• 2.3.2 检测限
• 2.3.3 精密度试验
• 2.3.4 重复性试验
• 2.3.5 稳定性试验
• 2.3.6 加样回收率试验
• 2.3.7 样品测定
• 2.4 小结
• 第3章 丹参提取物制备工艺研究
• 3.1 引言
• 3.2 水溶性丹参提取物制备
• 3.2.1 仪器
• 3.2.2 试剂
• 3.2.3 试验方法
• 3.2.4 试验结果
• 3.3 脂溶性丹参提取物的制备
• 3.3.1 仪器
• 3.3.2 试剂
• 3.3.3 试验方法
• 3.3.4 试验结果
• 3.4 小结
• 第4章 丹参提取物TLC 指纹图谱研究
• 4.1 引言
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 仪器
• 4.2.2 试药
• 4.2.3 供试品溶液的制备
• 4.2.4 对照品溶液的制备
• 4.2.5 色谱条件
• 4.2.6 显色及观察
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 系统适应性实验
• 4.3.2 方法学验证
• 4.3.3 试验结果
• 4.4 指纹图谱的建立和识别
• 4.4.1 脂溶性成分
• 4.4.2 水溶性成分
• 4.5 小结
• 第5章 丹参提取物HPLC 指纹图谱研究
• 5.1 引言
• 5.2 试验方法
• 5.2.1 仪器
• 5.2.2 试剂
• 5.2.3 供试品溶液的制备
• 5.2.4 对照品溶液的制备
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 色谱条件优化
• 5.3.2 方法学验证
• 5.3.3 样品指纹图谱的测定
• 5.3.4 指纹图谱共有模式的建立
• 5.3.5 指纹图谱的分析与评价
• 5.4 小结
• 致谢
• 参考文献
• 附录I：附图
• 附录II：作者在攻读硕士学位期间发表的论文