新型β环糊精—壳聚糖两亲聚合物CCP1221的设计制备及逆转细胞MDR的初步研究

论文摘要

为逆转抗肿瘤药物多药耐药,提高临床治疗效果,本文设计制备了p环糊精-壳聚糖聚合物纳米粒胶束。此类聚合物可以通过自组装形成两亲性纳米粒胶束,实现增溶药物和一定的缓控释作用。作为一种新型给药系统,聚合物胶束具有窄粒径分布与稳定的核壳结构,易于包封疏水性药物,增加药物在肿瘤组织中的通透性和渗透性,最终实现药物靶向传递。聚合物胶束独特的优势,p环糊精与壳聚糖自身的生物相容性,使该聚合物胶束给药系统的研究具有重要的意义。本文主要进行了以下的工作：（1）以壳聚糖（CS）结构为主链,p环糊精（β-CD）、油酸结构作为疏水链,马来酸酐作为亲水链,通过对壳聚糖油酰化、马来酰化与对环糊精巯基化,最终以加成反应合成目标产物CCP1221。该产物采用FT-IR、1H-NMR进行结构表征。对主要结构单元的取代度进行计算,油酰基取代度为5.4%-8.9%；马来酰基取代度为17.4%,β环糊精结构的取代度为6.8%。（2）采用荧光探针法、动态光散射技术（DLS）对聚合物的临界胶束浓度（CMC）和纳米粒径进行了分析,以透析法制备阿霉素/CCP1221胶束给药系统,并对其载药量、包封率以及体外释放进行测定。结果显示CMC值为0.015～0.046mg/mL；空白胶束粒径为193.6～242.5nm,载药胶束粒径为237.6～289.8nm。载药量与包封率分别为5.35%-7.72%、61.71%-78.05%,体外药物释放率为63.19%。（3）以四甲基氮唑蓝比色法（MTT）分析空白聚合物对（MCF-7）与耐阿霉素细胞（MCF-7/ADR）的细胞毒性,确定了CCP1221聚合物适用的浓度范围为0.25mg/mL～1mg/mL；测定了不同浓度CCP1221聚合物/阿霉素混合物和游离阿霉素对MCF-7/ADR细胞的半数致死率,并计算CCP1221聚合物对细胞耐药性的逆转程度。结果表明CCP1221聚合物对细胞耐药性逆转倍数为3到15.82倍,初步实现了对肿瘤细胞耐药性的逆转。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 多药耐药性
• 1.1.1 多药耐药性现状
• 1.1.2 多药耐药性逆转的研究进展
• 1.2 高分子聚合物给药系统逆转肿瘤多药耐药的研究进展
• 1.3 壳聚糖及其衍生物
• 1.4 环糊精
• 1.5 本课题的研究内容及其意义
• 第2章 技术方案和技术路线
• 2.1 设计思路
• 2.2 合成路线设计
• 2.3 技术路线
• 第3章 高分子聚合物β环糊精-壳聚糖的合成及表征
• 3.1 引言
• 3.2 实验材料与仪器
• 3.3 实验部分
• 3.4 实验结果
• 3.5 分析与讨论
• 第4章 β环糊精-壳聚糖两亲性聚合物载药胶束制备及评价
• 4.1 引言
• 4.2 实验材料与仪器
• 4.2.1 实验材料
• 4.2.2 实验仪器
• 4.3 实验部分
• 4.3.1 载药纳米粒中ADR含量分析方法确立
• 4.3.2 β环糊精-壳聚糖两亲性聚合物载药胶束制备
• 4.3.3 β环糊精-壳聚糖两亲性聚合物载药胶束粒径及ζ电位测定
• 4.3.4 β环糊精-壳聚糖两亲性聚合物载药胶束载药量与封包率测定
• 4.3.5 β环糊精-壳聚糖两亲性聚合物载药胶束药物体外释放研究
• 4.4 实验结果
• 4.4.1 阿霉素标准曲线的制定
• 4.4.2 精密度试验及重复性试验
• 4.4.3 载药胶束ζ电位、粒径及其分布测定
• 4.4.4 载药胶束载药量与封包率测定
• 4.4.5 载药胶束药物体外释放测定
• 4.5 分析与讨论
• 第5章 β环糊精-壳聚糖聚合物体外细胞毒性及其逆转多药耐药性研究
• 5.1 引言
• 5.2 实验材料与仪器
• 5.2.1 实验仪器
• 5.2.2 实验材料
• 5.3 实验部分
• 5.3.1 试剂配制
• 5.3.2 细胞培养
• 5.3.3 空白CCP1221聚合物的细胞毒性测定
• 5.3.4 CCP1221聚合物对多药耐药性影响
• 5.4 实验结果
• 5.4.1 CCP1221聚合物的细胞毒性测定
• 5.4.2 CCP1221聚合物逆转多药耐药性测定
• 5.5 分析与讨论
• 第6章 结论
• 参考文献
• 在读期间发表的学术论文及研究成果
• 致谢