论文摘要
组织工程和再生医学是人类治疗组织、器官功能衰退和缺失的研究方向。近十几年来,泌尿系统组织工程有了迅速的进展。国外学者已经开始研究组织工程化膀胱、输尿管与尿道并在实验动物体内进行相应器官的替代。由于正常人体尿路细胞体内生长微环境复杂不容易在体外复制,使得种子细胞的大量扩增成为困扰国内众多组织工程实验室的一大难题。本研究的目的就是建立泌尿系统种子细胞体外培养体系,培养出可供构建组织工程化尿路支架的种子细胞,并初步制备尿路组织工程化细胞—支架复合体。 本研究由三部分构成,第一部分探讨了人尿路移行上皮（UEC）细胞的体外培养。手术获取病人肾盂、输尿管与膀胱粘膜标本,病理证实未有移行上皮癌与其他上皮病变。比较角朊细胞培养基（K-SFM）体系与RPMI1640添加FBS培养体系对UEC培养的影响。结果K-SFM添加BPE与rEGF较RPMI1640体系适合UEC生长,组织块接种后5～7天可见上皮细胞生长,至12～14天可传代。RPMI1640培养体系下成纤维细胞优势生长,UEC不能成层。经免疫细胞化学与透射电镜检查证实为人UEC细胞。细胞生长曲线与细胞贴壁率曲线均显示细胞的良好生长活性。细胞冻存三个月后复苏细胞形态与生命力维持正常。本部分实验推知K-SFM能促进UEC体外增殖,可获得大量UEC种子细胞。 第二部分讨论了人尿路平滑肌细胞（USMC）的体外原代培养。在无菌条件下获取人膀胱与输尿管标本20例,将每个标本分成3份。1份用复合酶消化法,消化液含有0.2%Ⅰ型胶原酶、2.5mg/ml Dispase、3%胎牛血清（FBS）;
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