论文摘要
目的：了解c-myc和c-myb原癌基因在白血病细胞和白血病骨髓基质细胞（BMSCs）中的表达情况及其相关性,为研究骨髓微环境基质细胞调控造血的分子机制提供坚实的基础。方法：运用流式细胞技术、染色体显带技术、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）综合分析18例正常标本的单个核细胞和46例白血病患者（27例急性白血病（AL）、19例慢性白血病（CL））的白血病细胞及BMSCs.根据细胞免疫表型分析白血病细胞和骨髓基质细胞的膜表面抗原,采用RT-PCR技术半定量分析白血病细胞和BMSCs中原癌基因c-myc、c-myb的表达水平,同时结合染色体显带技术探索c-myc、c-myb基因在不同核型、急慢性白血病以及不同预后组骨髓基质细胞中的表达水平及其相关性。结果：c-myc和c-myb基因在病例组白血病细胞及其BMSCs中均有一定的表达,尤其是在染色体异常的白血病细胞中c-myc、c-myb基因高表达,其均值分别为1.154±0.38和1.03±0.48,与对照组比较均具有统计学差异（P<0.05）,在异常染色体骨髓基质细胞中其均值分别为2.08±0.82（P<0.05）和1.46±0.29（P<0.05）。c-myb mRNA表达水平与外周血红细胞计数密切相关（P<0.05）,原癌基因c-myc mRNA和c-myb mRNA在白血病细胞和白血病骨髓基质细胞的表达水平无统计学差异,但均与血小板计数具有相关性。在不同预后组中,c-myc mRNA与c-myb mRNA呈线性相关。在白血病细胞及急性组骨髓基质细胞中原癌基因c-myc、c-myb的表达存在正相关。我们率先发现白血病细胞中c-myc的表达量分别与BMSCs中c-myc、c-myb的表达量有相关性。原癌基因表达升高可能促进巨核细胞的生成和红系祖细胞的定向分化,并参与白血病的发生、发展。结论：实验数据证实,c-myc或c-myb原癌基因在白血病中的表达水平与部分临床指标有相关性。降低原癌基因表达水平将可能成为一种治疗方案,它可以减缓白血病细胞的生成。
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中文摘要Abstract英文缩略词表第一章 前言1.BMSCs的功能1.1 白血病BMSCs对白血病细胞具有支持和保护作用1.2 BMSCs支持白血病细胞进行肿瘤增殖、分化和迁移1.3 BMSCs有减少白血病细胞凋亡和增强白血病细胞耐药性的能力2.BMSCs与白血病的关系3.原癌基因与白血病的关系4.原癌基因与BMSCs的关系5.BMSCs的治疗作用5.1 促进造血功能恢复5.2 抗原提呈免疫功能5.3 基因转染与修饰6.发展前景第二章 材料与方法1.仪器与试剂1.1 主要仪器设备1.2 主要试剂2.试剂的配制2.1 LG-DMEM培养液2.2 0.075mol/L KCl低渗液2.3 固定液2.4 100μM引物贮存液2.5 0.1%DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水2.6 0.5mmol/L EDTA（PH 8.0）2.7 5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液2.8 0.5×TBE工作液3.实验用品的准备3.1 瓶状玻璃制品的包装3.2 吸管的包装3.3 玻璃制品的消毒3.4 胎牛血清（FBS）的灭活3.5 2%琼脂糖凝胶的制备4.BMSCs的培养4.1 骨髓标本的来源4.2 骨髓的采集4.3 单个核细胞的制备及BMSCs的原代培养4.4 BMSCs传代扩增4.6 BMSCs的形态学鉴定5.流式细胞仪检测BMSCs免疫表型6.BMSCs染色体标本制备与核型分析7.基因的检测分析7.1 引物设计7.2 RNA提取（Trizol总RNA提取法）7.3 cDNA第一链合成7.4 RT-PCR7.5 Quantity One软件的使用8.统计学处理方法第三章 结果1.BMSCs体外扩增的形态2.免疫分型结果的统计分析3.BMSCs染色体G显带分析4.原癌基因c-myc、c-myb在白血病细胞中的表达情况5.原癌基因c-myc、c-myb在骨髓基质细胞中的表达情况5.1 c-myc、c-myb基因在急、慢性骨髓基质细胞中的表达5.2 c-myc、c-myb基因在不同核型组骨髓基质细胞中的表达5.3 c-myc、c-myb基因在不同预后组白血病骨髓基质细胞中的表达5.4 c-myc、c-myb基因与各项临床指标的关系5.5 c-myc、c-myb的相关性第四章 讨论第五章 结论参考文献文献综述参考文献在学期间的研究成果致谢
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标签：白血病论文; 骨髓基质细胞论文;
c-myc、c-myb基因在白血病骨髓基质细胞中的表达及相关性研究
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