美托洛尔降压疗效差异相关机制的临床与基础研究

论文摘要

目的：1．探讨根据疗效调整剂量后的高血压病患者CYP2D6基因、β1肾上腺素能受体（β1-AR）基因多态性及获得性因素对不同剂量美托洛尔降压疗效的影响。2．探讨基因型一致的自发性高血压大鼠基线血压、血浆肾素活性、血管紧张素Ⅱ水平、心肌β1-AR基因表达量及β1-AR基因DNA甲基化状态等分子机制对美托洛尔降压疗效的影响。方法：临床试验部分，对136例高血压病患者进行美托洛尔干预，首先统一给予25mg/d，根据患者疗效及耐受情况调整药物剂量至100mg/d、200mg/d，达到200mg/d的患者不再进行剂量调整。获取相关获得性因素指标并应用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）和聚合酶链式反应（PCR）方法检测CYP2D6基因和β1-AR基因多态性。动物实验部分，将45只自发性高血压大鼠（SHR）随机分为美托洛尔（50mg／kg／d）干预组及生理盐水对照组。每周监测血压水平并根据体重调整药物剂量。四周后根据血压下降水平将美托洛尔组分为有效组及无效组。实验完成后取SHR心肌组织及颈总动脉血。用基因测序方法验证美托洛尔组SHRβ1-AR基因型是否一致；用放免法检测血浆肾素活性及血管紧张素Ⅱ水平；提取心肌组织RNA，采用荧光适时定量RT-PCR检测β1-AR基因mRNA的表达；用MSP方法及亚硫酸盐测序法检测β1-AR基因DNA甲基化状态。结果：1．临床试验共有128例患者完成试验，根据疗效调整剂量后美托洛尔单药治疗总有效率为53．1％。单因素分析表明，不同CYP2D6*10基因型（P<0．05）、β1-AR基因389位基因型（P<0．05）、BMI（P<0．05）、基线舒张压水平（P<0．01）的患者口服美托洛尔降压总有效率存在差异。亚组分析显示，不同CYP2D6*10基因型（P<0．01）、CYP2D6*2基因型（P<0．05）、β1-AR基因389位基因型（P<0．05）、基线舒张压水平（P<0．05）的患者口服25mg/d美托洛尔降压有效率存在差异。不同CYP2D6*10基因型（P<0．01）、基线舒张压水平（P<0．01）的患者口服100mg/d美托洛尔降压有效率存在差异。不同CYP2D6*10基因型（P<0．05）、β1-AR基因389位基因型（P<0．01）、年龄（P<0．05）、BMI（P<0．01）的患者口服200mg／d美托洛尔降压有效率不同。2．多因素分析显示：进入Logistic回归方程的影响因素包括BMI、β1-AR389位基因型、基线舒张压水平及剂量，预测根据疗效调整剂量后的美托洛尔降压疗效正确率为89．8％。3．动物实验共有36只SHR完成实验，4周后美托洛尔组血压为163．0±7．0mmHg，显著低于生理盐水组的190．8±8．5mmHg（P<0．01）。美托洛尔组SHRβ1-AR基因型一致，单药治疗存在个体差异，有效率为57．7％。4．有效组及无效组SHR基线血压分别为1 87．2±6．3mmHg、177．5±9．4mmHg，两者具有统计学差异（P<0．05）。两组血浆肾素活性及血管紧张素Ⅱ水平无差异（P>0．05）。有效组心肌β1-AR基因mRNA表达量为21．2±50．5，高于无效组的8．2±13．2，且具有统计学意义（P<0．05）。生物信息学分析显示人类及大鼠β1-AR基因均存在CpG岛，但MSP及亚硫酸盐测序结果表明美托洛尔组SHRβ1-AR基因DNA均无甲基化修饰。结论：1．不同高血压病个体美托洛尔有效降压剂量不同。影响疗效的因素包括：CYP2D6*10基因型、β1-AR 389位基因型、BMI及基线舒张压水平。联合遗传因素、获得性因素及剂量并不能完全解释美托洛尔存在疗效差异的原因。2．25mg／d及100mg／d美托洛尔降压疗效的主要影响因素为CYP2D6、β1-AR基因型及基线舒张压水平。年龄、BMI仅影响200mg／d美托洛尔疗效。100mg/d美托洛尔治疗无效的CYP2D6*1*1基因型，β1-ARArg389Arg基因型、BMI正常的老年患者可加量至200mg/d。3．美托洛尔干预基因型一致的SHR降压疗效存在差异。基线血压水平、心肌β1-AR基因表达量是影响SHR美托洛尔降压疗效的主要因素。未发现SHR心肌组织β1-AR基因DNA存在甲基化。

论文目录

• 一 中文摘要
• 二 英文摘要
• 三 英文缩略词表
• 四 论文正文
• 前言
• 第一章 高血压病患者中不同剂量美托洛尔降压疗效差异的相关因素分析
• 材料与方法
• 结果
• 第二章 自发性高血压大鼠中美托洛尔降压疗效差异的相关因素研究
• 材料与方法
• 结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 五 参考文献
• 六 论文综述
• 七 致谢
• 八 攻读硕士学位期间的研究成果