RASSF1A、P16和DAPK基因甲基化检测对肺癌的诊断价值

RASSF1A、P16和DAPK基因甲基化检测对肺癌的诊断价值

论文摘要

目的本研究通过检测肺癌患者痰液及支气管镜活检组织标本中RASSF1A、P16和DAPK三基因启动子区甲基化状态,探讨此三基因启动子区异常甲基化在肺癌中的诊断价值及其临床意义,为肺癌临床诊断探索有效的分子指标。方法收集35例肺癌患者及15例肺部良性病变患者的诱导痰液及其经支气管镜活检组织标本,应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测所有标本中RASSF1A、P16和DAPK三基因启动子区甲基化状态,分析其异常甲基化与肺癌临床病理特征的关系及三者联合检测对肺癌的临床诊断价值。结果1肺癌患者活检组织中RASSF1A、P16和DAPK基因启动子区甲基化率分别为60.0%(21/35)、42.9%(15/35)和60.0%(21/35),与肺部良性病变者有显著性差异(P<0.05)。对应的痰标本中三基因甲基化率分别为44.1%(16/35)、28.6%(10/35)、45.5%(17/35),与病理组织比较差异无统计学意义,具有较好的一致性。2 RASSF1A基因启动子甲基化率在有淋巴结转移者高于未转移者,组织分化较差者高于分化较好者,组间比较均有显著性差异(P<0.05),与患者年龄、性别、吸烟指数、临床分期、病理类型等因素无关。P16和DAPK基因甲基化率与上述因素均无明显相关性。3单独检测痰液中RASSF1A、P16或DAPK基因异常甲基化用于诊断肺癌的敏感性分别为45.7%、28.6%、48.6%;此三指标联合检测诊断肺癌的敏感性提高到62.9%。结论1 RASSF1A,P16和DAPK基因启动子甲基化是肺癌中一种常见频发的表观遗传修饰,可能在肺癌发生发展中有重要的作用。2 RASSF1A基因甲基化率与肺癌淋巴结转移、病理分化程度相关,有可能作为估计预后的指标;而P16,DAPK基因甲基化与肺癌患者临床病理特征无明显关系。3痰液RASSF1A、P16和DAPK三基因甲基化率与肺癌组织中甲基化率基本一致,此三基因联合检测有可能作为肺癌诊断的有效指标。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 英文缩写注释
  • 第一章 前言
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 研究对象
  • 2.2 设备和试剂
  • 2.2.1 主要仪器设备
  • 2.2.2 主要试剂
  • 2.2.3 主要试剂的配制及保存
  • 2.3 实验方法
  • 2.3.1 标本收集及处理
  • 2.3.2 基因组DNA提取
  • 2.3.3 DNA甲基化修饰
  • 2.3.4 DNA甲基化检测
  • 2.4 统计学处理
  • 第三章 结果
  • 3.1 实验组与对照组临床病理资料及甲基化检测结果
  • 3.2 肺癌患者临床资料与DNA甲基化的关系
  • 3.3 肺癌患者病理特征与DNA甲基化的关系
  • 3.4 肺癌患者活检组织及痰中DNA启动子甲基化相关性分析
  • 3.5 痰液DAN甲基化检测在肺癌诊断中的价值
  • 第四章 讨论
  • 4.1 痰液及肺癌组织DNA甲基化检测与肺癌相关性分析
  • 4.2 DNA甲基化与肺癌临床特征的关系
  • 4.3 DNA甲基化与肺癌病理特征的关系
  • 4.4 痰液三基因启动子区甲基化联合检测对肺癌诊断的意义
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 综述
  • 致谢
  • 攻读硕士学位期间发表的论文及获奖情况
  • 相关论文文献

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