骨化三醇对实验性大鼠骨性关节炎关节软骨和软骨下骨的影响

论文摘要

目的1.通过建立大鼠前交叉韧带切断骨性关节炎（OA）动物模型,观察软骨下骨组织形态学变化,探讨软骨下骨在OA发病中的作用。2.观察骨化三醇对大鼠OA动物模型关节软骨下骨及软骨的影响。方法实验一模型的建立:取SD大鼠30只随机分成3组（术后2周、6周和10周组）。每只大鼠右膝行前交叉韧带切断（ACLT）,造成膝关节不稳定动物模型,对侧为假手术侧。分别将每组动物于术后2周、6周和10周处死,取胫骨近段,行HE染色、AB-PAS染色,比较各组骨关节大体形态及病理组织形态学变化。观察指标为改良的Mankin评分、骨组织形态计量学参数,并用免疫组织化学方法观察MMP-13在软骨细胞中的表达。实验二骨化三醇干预实验:取SD大鼠64只分成4组,假手术+安慰剂组（Sham+V组）、前交叉韧带切断+安慰剂组（ACLT+V组）、前交叉韧带切断+骨化三醇低剂量给药组（ACLT+L组）、前交叉韧带切断+骨化三醇高剂量给药组（ACLT+H组）,ACLT+L组和ACLT+H组分别于造模术前三天开始给骨化三醇0.025μg/kg-1/d-1及0.1μg/kg-1/d-1灌胃,ACLT+V组和sham组给予安慰剂灌胃,术后持续2周。每组分别于术后2周和10周取材,胫骨近端切片,行HE染色、AB-PAS染色,比较各组骨关节大体形态及病理组织形态学变化。采用改良的Mankin评分及骨形态计量学分析,并用免疫组织化学方法观察MMP-13在软骨细胞中的表达。结果实验一:在造模术后2周、6周和10周软骨退变呈进行性发展。Mankin评分逐渐增高、MMP-13表达逐渐增强,与假手术侧相比具有统计学意义（P<0.01）。软骨下骨形态计量学分析显示,造模后2周软骨下骨骨量减低（P<0.05）,6周、10周时骨量逐渐增加（P<0.01）。实验二:HE染色、AB-PAS染色、MMP-13免疫组织化学染色及骨形态计量学参数统计显示,造模术后2周ACLT+V组较Sham+V组有软骨下骨量减少,ACLT+L组和ACLT+H组软骨下骨量均较ACLT+V组增加,差异有统计学意义（P<0.05）。造模术后10周时ACLT+L组和ACLT+H组软骨Mankin评分均低于ACLT+V组（P<0.01）,两组软骨细胞MMP-13表达强度均较ACLT+V组低（P<0.05）,ACLT+L组和ACLT+H组软骨下骨骨量均较ACLT+V组减少（P<0.01）。ACLT+L组和ACLT+H组间各指标比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论1.大鼠前交叉韧带切断能够造成动物膝关节软骨OA样改变,表现出软骨下骨骨吸收、骨重建的变化特点。2.骨代谢调节剂骨化三醇通过抑制OA早期软骨下骨骨吸收,可减缓OA后期发生的软骨下骨增生硬化,从而对关节软骨发挥一定保护作用。3.软骨下骨在OA关节软骨退变早期即可发生形态学改变,干预OA病变早期软骨下骨异常改变可减缓OA病理进展。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 实验一
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 实验二
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 综述参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文