十足目甲壳动物精子发生过程碱性蛋白的初步研究

论文摘要

精子发生可分为：精原细胞、精母细胞、精细胞、精子四个阶段。精子形成过程是精子发生的最后阶段。精子形成过程中,精细胞形成精子,形态结构发生了显著的变化,染色质高度浓缩,这个过程中核碱性蛋白对浓缩精子核和保护DNA遗传物质起了重要的作用。十足目甲壳动物的精子普遍存在着非浓缩核的现象,有别于其它物种,因此吸引了众多学者对这类动物精子发生、精子形成过程核碱性蛋白的特征进行研究。本文通过对精子发生过程中赖氨酸,精氨酸等碱性氨基酸变化的研究,探究精子发生过程中碱性蛋白的变化,通过组织切片技术结合苯胺蓝染色和坂口反应,研究了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)、日本沼虾(Macrobrachium nipponense)、细角滨对虾(Penaeus stylirostris)、日本对虾(Penaeus japonicus)、中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)这5种十足目甲壳动物精子发生过程中赖氨酸、精氨酸的变化情况。结果表明：十足目甲壳动物精子发生过程中,赖氨酸含量由多到少；始终没有发现精氨酸。由碱性氨基酸的变化特征推测十足目甲壳动物精子发生过程中碱性蛋白的变化：从其精原细胞到成熟精子未发现鱼精蛋白,核碱性蛋白发生了转移。通过半薄切片结合苯胺蓝染色定性定位研究中华绒螯蟹、中国明对虾、日本沼虾3种十足目甲壳动物精子发生过程中赖氨酸的变化情况。进一步验证：赖氨酸含量由多到少。但辨明了尽管在精子形成阶段发生了细胞核碱性蛋白的转移,但最终是成熟精子细胞核由于保留或新合成仍然存在少量碱性蛋白。对中华绒螯蟹的精子发生过程中核碱性蛋白的提取和电泳分析验证了中华绒螯蟹精巢中碱性蛋白与肌肉组蛋白接近,分子量差异比肌肉组蛋白小。精子核内应仍有碱性蛋白存留,含精子特异的碱性蛋白,分子量更小,认为精子发生过程发生了核碱性蛋白的替代。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 组蛋白研究进展
• 1.1.1 染色质的概念
• 1.1.2 组蛋白的替代
• 1.1.3 精子形成过程染色质的变化
• 1.1.4 精子形成过程中核碱性蛋白的变化
• 1.1.5 十足目甲壳动物核碱性蛋白的研究进展
• 1.1.6 精子核碱性蛋白特征
• 1.2 中华绒螯蟹生殖生物学
• 1.2.1 中华绒螯螯的雄性生殖系统
• 1.2.2 中华绒螯蟹的精子发生过程
• 1.2.3 中华绒螯蟹的精子结构
• 1.3 对虾生殖生物学
• 1.3.1 对虾雄性生殖系统
• 1.3.2 对虾精子发生过程
• 1.3.3 中国明对虾精子特征
• 1.4 日本沼虾生殖生物学
• 1.4.1 日本沼虾雄性生殖系统
• 1.4.2 日本沼虾精子发生过程
• 1.5 研究目的及意义
• 第2章 石蜡切片观察十足目甲壳动物精子发生过程碱性氨基酸的变化
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 材料
• 2.2.2 仪器
• 2.2.3 溶液配制
• 2.2.4 方法
• 2.3 结果
• 2.3.1 精子发生过程赖氨酸的变化
• 2.3.2 精子发生过程精氨酸的变化
• 2.4 讨论
• 第3章 半薄切片法观察十足目甲壳动物精子发生过程中赖氨酸的变化
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 材料
• 3.2.2 方法
• 3.3 结果
• 3.4 讨论
• 第4章 中华绒螯蟹精子发生过程碱性蛋白的提取和电泳分析
• 4.1 引言
• 4.1.1 组蛋白的提取
• 4.1.2 组蛋白的电泳分析方法
• 4.2 材料和方法
• 4.2.1 材料
• 4.2.2 仪器
• 4.2.3 方法
• 4.3 结果
• 4.3.1 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳系统
• 4.3.2 酸性-尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳系统
• 4.4 讨论
• 4.4.1 核碱性蛋白制备
• 4.4.2 碱性蛋白的电泳分析
• 第5章 结论
• 参考文献
• 图版说明
• 图版
• 致谢