论文摘要
前言宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，宫颈癌的发生是多步骤、多基因现象的结果。癌基因的激活及抑癌基因的失活是细胞癌变的分子基础，从分子水平研究其病因学越来越受到关注。P185蛋白是原癌基因C-erbB-2的编码产物，是一个分子量为185KD的跨膜磷酸蛋白。C-erbB-2属于生长因子受体类癌基因，激活后具有致癌作用。在致癌因素的作用下，C-erbB-2基因发生突变或过度表达，P185蛋白则由正常膜受体转变为癌蛋白，细胞外信号通过P185蛋白受体可激活多条信息传导通路，促使细胞癌变。抑癌基因P16编码P16蛋白，是一个细胞周期抑制因子。P16蛋白作用于细胞周期的G1→S期的转移过程，主要通过对Rb蛋白磷酸化过程的抑制而参与细胞周期的调控。P16基因失活则使细胞周期失控，向恶性发展。本试验采用免疫组化SP法检测P185、P16在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈鳞癌中的表达，探讨P185及P16在宫颈鳞癌组织中的表达及意义，为预防和早期诊断以及治疗宫颈癌提供理论依据和参考。材料与方法一、实验材料1、实验对象收集正常宫颈组织7例，宫颈上皮内瘤变（CIN）27例，其中CINⅠ7例，CINⅡ8例，CINⅢ12例，宫颈鳞癌31例。并收集宫颈鳞癌患者的临床病理资料进行统计分析，包括：年龄，临床分期，病理分级。2、主要仪器Olympus光学显微镜（日本）、AO切片机（美国）、高压锅（中国）、孵育盒（中国）3、主要试剂即用型鼠抗人P185单克隆抗体和即用型鼠抗人P16单克隆抗体均购于福州迈新生物技术开发有限公司。二、实验方法1、免疫组织化学方法（SP法）严格按照试剂盒操作规范进行。2、结果判断P185蛋白定位于细胞膜和（或）细胞浆，P16蛋白定位于细胞核和（或）细胞浆，阳性染色为棕黄色颗粒。阴性（—）：切片中无阳性细胞；弱阳性（+）：切片中阳性细胞数＜50％；中度阳性（++）：切片中阳性细胞数为50％～＜75％；强阳性（+++）：切片中阳性细胞数≥75％。（+）～（+++）均被判定为阳性。3、统计学处理所有数据资料采用SPSS11.5软件进行统计学处理，各组计数资料的结果采用x2检验、费歇尔精确概率检验或Spearman秩相关。P＜0.05有意义。实验结果1、P185、P16在不同宫颈组织中的表达情况P185蛋白是C-erbB-2的编码产物，正常宫颈组织中无表达，CIN、宫颈鳞癌中P185蛋白的阳性表达率分别为33.3％、71.0％。正常宫颈组织与宫颈鳞癌相比、CIN与宫颈鳞癌相比其差异均有极显著意义（P＜0.01）。正常宫颈组织、CIN、宫颈鳞癌中P16蛋白的阳性表达率分别为14.3％、70.4％、93.5％。正常宫颈组织与CIN、CIN与宫颈鳞癌相比其差异均有显著意义（P＜0.05），正常宫颈组织与宫颈鳞癌相比其差异有极显著意义（P＜0.01）。2、P185、P16与宫颈鳞癌临床病理特征的关系P185蛋白、P16蛋白在不同病理分级、临床分期及年龄组中的阳性表达率差异均无显著意义（P＞0.05）。3、P185与P16在宫颈鳞癌组织中表达的关系P185蛋白与P16蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达呈正相关（r=0.411，P＜0.05）。结论1、P185蛋白在正常宫颈组织中不表达，CIN、宫颈鳞癌中阳性表达率明显上升，且二者比较其差异有极显著意义。2、P16蛋白在正常宫颈组织中以阴性表达为主，CIN、宫颈鳞癌中阳性表达率显著升高，且三者比较其差异有显著意义。3、P185蛋白和P16蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达呈正相关。4、P185蛋白和P16蛋白与宫颈鳞癌的临床分期、病理分级、年龄无关。
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