论文题目: 防治苹果采后病害拮抗酵母菌的分离、筛选及其抑菌效果的研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 果树学
作者: 武峥
导师: 邓伯勋
关键词: 筛选,拮抗酵母菌,生物防治,苹果,采后病害
文献来源: 华中农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 青霉病和灰霉病是苹果贮藏期的主要侵染性病害,是造成腐烂损失的基本原因。长期以来,使用化学杀菌剂一直被认为是最有效的方法,但是存在着农药残留、环境污染和病原菌抗药性等诸多弊端,迫切需要新的安全的方法来取而代之。生物防治是选择对产品以及人体不造成危害的微生物,利用微生物之间的拮抗作用,抑制病原菌生长的一种有效防治采后病害的新途径。 本研究旨在分离、筛选能够抑制苹果采后青、灰霉的拮抗酵母菌株,并测定所筛选出的菌株AY-2和F-5不同处理分别对苹果青霉病和灰霉病的抑制效果,以及在果实伤口的定殖情况。主要结果如下: 1.拮抗菌的分离和筛选:用稀释平板法,从果实表面以及果园根际土壤中分离得到376个菌株。通过初筛和复筛,应用琼脂移块法,离体筛选出12个菌株对青霉菌（Penicillium expansum）有拮抗作用,11个菌株对灰霉菌（Botrytis cinerea）有拮抗作用。进一步通过混菌试验和果实接种法,活体筛选出分别能明显抑制青、灰霉病的拮抗酵母菌AY-2和F-5,常温下抑菌率分别为81.67%和83.33%。 2.拮抗菌的抑菌试验:当拮抗菌浓度为106～108CFU/mL时,生物防治的效果与拮抗菌的浓度成正相关;分别在接种3×108CFU/mL拮抗菌AY-2和F-5的前48h、24h、4h、0h、后4h、24h、48h接种病菌,同时和推后病菌接种时间,都可以维持抑菌效果,但是提前接种病菌拮抗菌的抑菌力会有所降低。拮抗菌的接种时间越早防治病害的效果越明显;AY-2与34-9等体积混合用于防治青霉病,果实发病率为8.33%,优于AY-2和34-9单独使用的效果,差异显著;AY-2与F-5混菌,灰霉发病率为15%,34-9与F-5混合,灰霉发病率为13.33%,两种组合均稍好于F-5和34-9单独使用的效果,但并不显著;CaCl2能够明显增强拮抗菌AY-2的抑菌效果,壳聚糖与拮抗菌结合使用,青、灰霉发病率分别约高于单独使用时的1和3倍,抑菌力降低。 3.拮抗菌的生长动态:拮抗菌AY-2和F-5在有无青、灰霉菌作用的情况下都能够在果实伤口迅速生长定殖。菌株AY-2接种48h后,数量增加至116.67倍;同时接种青霉病菌,96h后AY-2的数量可增加至132.67倍;拮抗菌F-5接种72h后,数量增加了近200倍,同时接种灰霉病菌,72h后繁殖数量是起始值的290.12倍。
论文目录:
摘要
ABSTRACT
第一章 采后病害生物防治的研究进展
1 采后病害生物防治的意义
2 拮抗酵母菌防治果蔬采后病害的研究进展
3 拮抗酵母菌的作用机理
3．1 营养、空间的竞争
3．2 寄生作用
3．3 诱导寄主抗性
3．4 其它物质对拮抗效果的影响
4 拮抗酵母菌的应用前景及问题
4．1 应用现状
4．2 发展前景
4．3 存在问题
第二章 拮抗菌的分离、纯化与保存
1 引言
2 材料与方法
2．1 材料
2．2 方法
2．2．1 采样
2．2．2 微生物的富集培养
2．2．3 微生物的分离与纯化
2．2．4 菌株的保存
3 结果与分析
4 讨论
第三章 拮抗菌的筛选
1 引言
2 材料与方法
2．1 材料
2．2 方法
2．2．1 离体(in vitro)筛选试验
2．2．2 混菌试验
2．2．3 活体(in vivo)筛选试验
2．2．4 统计分析
3 结果与分析
3．1 "in vitro"筛选
3．1．1 青霉拮抗菌的筛选
3．1．2 灰霉拮抗菌的筛选
3．2 混菌实验
3．2．1 酵母菌与青霉菌混合培养的生长情况
3．2．2 酵母菌与灰霉菌混合培养的生长情况
3．3 "in vivo"筛选
3．3．1 青霉拮抗菌的筛选
3．3．2 灰霉拮抗菌的筛选
4 讨论
第四章 拮抗菌对苹果采后病害的抑制效果
1 引言
2 材料与方法
2．1 材料
2．2 方法
2．2．1 不同浓度拮抗菌的抑菌试验
2．2．2 不同接种时间的抑菌试验
2．2．3 混合菌株的抑菌试验
2．2．4 拮抗菌的强化试验
2．2．5 统计分析
3 结果与分析
3．1 不同浓度拮抗菌对苹果青、灰霉病的抑制效果
3．2 拮抗菌不同接种时间对青、灰霉病的抑制效果
3．3 混合菌株对苹果青、灰霉病的抑制效果
3．4 拮抗菌加 CaCl_2、壳聚糖对苹果采后青、灰霉病的抑制效果
4 讨论
第五章 拮抗菌在果实上的生长动态
1 引言
2 材料与方法
2．1 材料
2．2 方法
2．2．1 拮抗菌在果实伤口繁殖数量的测定
2．2．2 同时接种病菌，拮抗菌繁殖数量的测定
3 结果与分析
3．1 拮抗菌在苹果果实伤口的生长动态
3．2 病原菌对伤口处拮抗菌生长动态的影响
4 讨论
下一步研究计划
参考文献
附图及说明
致谢
发布时间: 2005-12-05
参考文献
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