论文摘要
第一部分:SDF-1、MMP-7、Alpha-SMA在人乳腺癌中表达目的:研究乳腺癌组织中基质细胞衍生因子-1（SDF-1）、a-平滑肌肌动蛋白（alpha-SMA）和MMP-7的表达情况。方法:从有腋窝淋巴结转移的33例乳腺癌患者取癌组织和癌旁组织的标本,另取乳腺正常组织33例,每一蜡块连续切片3张,免疫组化方法检测SDF-1、MMP-7和alpha-SMA分别在乳腺良性病变的正常组织、乳腺癌及癌旁组织中的表达情况。结果:在乳腺癌及癌旁组织中SDF-1、MMP-7均高表达,与正常乳腺组织相比,差异有显著性意义,SDF-1与alpha-SMA在乳腺癌中的表达部位相似。SDF-1和MMP-7的表达具有相关性。结论:1、SDF-1、MMP-7、alpha-SMA在乳腺癌及癌旁组织中高表达,与肿瘤关系密切。2、SDF-1和MMP-7在乳腺癌中的表达具有相关性。第二部分DECM对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖和侵袭的影响目的:观察Ⅳ型胶原酶降解基质后产物（DECM）对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖和侵袭的影响,对MMP-7蛋白和SDF-1蛋白表达的影响。探讨胶原酶Ⅳ及DECM在肿瘤降解中的作用,及MMP-7与SDF-1间相互关系。方法:采用胰酶消化法,分别分离来自人正常乳腺组织、乳腺癌旁组织及乳腺癌组织切取物中细胞和基质,提取基质成分,再以Ⅳ型胶原酶降解,分成7组分别是1.空白对照组,2.正常乳腺（无胶原酶组）3.正常乳腺组（胶原酶组）,4.癌旁（无胶原酶组）,5.癌旁（胶原酶组）,6.乳腺癌（无胶原酶组）,7.乳腺癌（胶原酶组）,得到DECM;分别作用于人乳腺癌细胞株MCF-7,通过软琼脂克隆形成实验观察瘤细胞增殖的变化,用Transwell实验观察瘤细胞侵袭能力的变化,通过Western Blot检测人乳腺癌细胞株MCF-7细胞中MMP-7和SDF-1蛋白的表达变化。结果:Ⅳ型胶原酶作用人乳腺癌基质后产物DECM可以使MCF-7人乳腺癌细胞株增殖和转移能力的增加,同一组织来源的胶原酶组与无胶原酶组比较差异有显著性意义;Ⅳ型胶原酶作用人乳腺癌基质后产物DECM可同时上调MMP-7和SDF-1蛋白的表达。结论:1、Ⅳ型胶原酶作用人乳腺癌基质后产物DECM具有促进肿瘤增殖及其侵袭活性的生物学活性。2、肿瘤降解基质的生物行为可能与MMP-7和SDF-1蛋白表达的增加有关。第三部分人乳腺癌细胞株MCF-7中MMP-7与SDF-1的相互作用影响的研究目的:研究SDF-1对人乳腺癌细胞株MCF-7生物学行为的影响,并研究SDF-1和MMP-7之间的相互作用关系。方法:不同浓度的SDF-1作用于人乳腺癌细胞株MCF-7后,观察MCF-7细胞增殖和侵袭能力变化,Western Blot法检测SDF-1在不同浓度和时间引起MMP-7蛋白表达的变化;Western Blot法检测MMP-7在不同浓度和和不同时间下作用于MCF-7后,SDF-1蛋白表达的变化。使用CXCR4抑制剂T140抑制了SDF-1功能后,Westernblot检测MMP-7蛋白表达变化;siRNA抑制MMP-7表达后,Westernblot检测SDF-1蛋白表达变化。结果:SDF-1呈浓度梯度促进MCF-7细胞的增殖和侵袭。SDF-1能促进MCF-7细胞中MMP-7蛋白表达的增加;MMP-7也可促进MCF-7细胞中SDF-1蛋白的表达增加。T140抑制SDF-1表达后,MMP-7蛋白表达下调;siRNA抑制MMP-7蛋白表达后,SDF-1蛋白表达下调。结论:1、SDF-1可促进乳腺癌细胞株MCF-7细胞的增殖和侵袭,其侵袭能力增加可能与上调MMP-7表达有关。2、在人乳腺癌细胞株MCF-7中MMP-7与SDF-1呈相互促进和相互抑制的关系,他们之间可能存在一种正反馈影响。