论文题目: 文冠果体细胞胚胎发生及形态建军成机理的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 植物学
作者: 顾玉红
导师: 李凤兰,高述民
关键词: 文冠果,体细胞胚胎发生,形态建成,特异蛋白质,同工酶酶谱
文献来源: 北京林业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本研究以药用植物文冠果的种胚为外植体,通过固体和液体悬浮培养技术,对影响文冠果体细胞胚胎发生的多种培养因子进行筛选,建立了稳定的文冠果体细胞胚胎发生的培养体系。并以文冠果体细胞胚胎发生的第一条途径为研究对象,从组织细胞学、钙离子的超微细胞化学定位、同工酶酶谱以及特异蛋白质等4个方面,对文冠果体细胞胚胎形态建成的机理进行研究,结果表明: 1、文冠果种胚可以通过以下两种途径形成体细胞胚胎: （1）、文冠果种胚在B5+2,4-D 1mg·L-1+蔗糖20g·L-1+琼脂6g·L-1的培养基上诱导产生非胚性愈伤组织,在B5+2,4-D 0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1+琼脂6g·L-1的培养基上继续培养获得A类胚性愈伤组织,在B5+6-BA 1mg·L-1+NAA 0.25mg·L-1+蔗糖20g·L-1的培养基中,产生球形胚→心形胚→有明显胚根的A类鱼雷胚,鱼雷胚在B5+6-BA 0.5mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1的培养基中发育成A类子叶胚,最终形成再生植株。 （2）、文冠果种胚在B5+2,4-D 1mg·L-1+蔗糖20g·L-1+琼脂6g·L-1的培养基上诱导产生非胚性愈伤组织,在B5+6-BA 0.5mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1+2,4-D 0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1+琼脂6g·L-1的培养基上形成B类胚性愈伤组织,在B5+6-BA 0.5mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1的培养基中发育成球形胚→心形胚→无明显胚根的B类鱼雷胚→无明显胚根、有两片子叶的B类子叶胚,在B5+6-BA 0.5mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1+蔗糖10g·L-1的培养基中长出胚根和多片幼叶,发育成再生植株。 2、文冠果体细胞胚胎形态建成过程中Ca2+的时空分布动态研究表明,非胚性细胞中Ca2+沉淀少,集中分布在细胞壁和细胞间隙中;胚性细胞中Ca2+沉淀明显增加,集中分布在质膜、液泡膜、细胞质、细胞壁和细胞间隙中;鱼雷胚的胚根根尖最外层细胞的外细胞壁加厚的位置Ca2+沉淀明显增多,表明Ca2+作为一种信号分子参与细胞壁的加厚和建成,这是一个创新。 3、文冠果体细胞胚胎形态建成过程中POD、SOD、淀粉酶、酯酶、ATP酶等五种同工酶酶谱的研究表明,这五种同工酶的谱带都随体细胞胚胎的发育而增多,并找出了几个时期的特异谱带,可以作为文冠果体细胞胚胎发生发育的生化标记。其中对体胚形态建成过程中SOD同工酶酶谱的动态变化的研究是一个创新之处。 4、文冠果体细胞胚胎形态建成过程中蛋白质组分的双向电泳图谱表明:非胚性愈伤组织的蛋白质组分最少,表达量较小;胚性愈伤组织、球形胚、鱼雷胚、子叶胚、再生植株等时期均有新的蛋白质产生,23.0、27.1、23.15kD的蛋白质分别是胚性愈伤组织、鱼雷胚、再生植株时期所特有的蛋白质,25.1、26.2kD的蛋白质是子叶胚所特有的蛋白质,这是本论文的新发现。
论文目录:
摘要
Abstract
目录
1 引言
1．1 植物体细胞胚胎的研究现状
1．2 影响体细胞胚胎发生的因素
1．2．1 植物本身的因素
1．2．2 培养基成分
1．2．3 培养方式
1．2．4 培养条件
1．3 植物体细胞胚胎形态建成机理的研究进展
1．3．1 体细胞胚胎形态建成过程中组织细胞学的研究
1．3．2 体细胞胚胎形态建成过程中Ca~(2+)的研究进展
1．3．3 体细胞胚胎形态建成过程中同工酶酶谱的研究
1．3．4 体细胞胚胎形态建成过程中蛋白质的研究
1．3．5 体细胞胚胎发生相关基因及其功能的研究
1．4 文冠果组织培养及其形态建成机理的研究现状
1．5 本论文的研究目的和意义
1．6 研究思路和论文的组成
2 文冠果体细胞胚胎发生的培养体系的建立
2．1 材料与方法
2．1．1 试验材料
2．1．2 试验方法
2．2 结果与分析
2．2．1 文冠果非胚性愈伤组织的诱导
2．2．2 文冠果胚性愈伤组织的诱导
2．2．3 文冠果体细胞胚胎的发生
2．2．4 文冠果体细胞胚胎的萌发成苗
2．3 讨论
2．4 结论
3 文冠果体细胞胚胎形态建成机理的研究
3．1 文冠果体细胞胚胎形态建成过程中组织细胞学的研究
3．1．1 材料与方法
3．1．2 结果与分析
3．1．3 讨论
3．2 文冠果体细胞胚胎形态建成过程中钙的时空分布动态的研究
3．2．1 材料与方法
3．2．2 结果与分析
3．2．3 讨论
3．3 文冠果体细胞胚胎形态建成过程中几种同工酶酶谱的研究
3．3．1 材料与方法
3．3．2 结果与分析
3．3．3 讨论
3．4 文冠果体细胞胚胎形态建成过程中特异蛋白质的研究
3．4．1 材料与方法
3．4．2 结果与分析
3．4．3 讨论
3．5 结论
4 结论
5 参考文献
图版Ⅰ
图版Ⅱ
图版Ⅲ
图版Ⅳ
图版Ⅴ
图版Ⅵ
个人简介
导师简介
个人成果清单
致谢
发布时间: 2005-07-12
参考文献
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