青春期前大鼠睾丸缺血损伤后血清抑制素B及其βB亚基mRNA在睾丸细胞内表达的变化

青春期前大鼠睾丸缺血损伤后血清抑制素B及其βB亚基mRNA在睾丸细胞内表达的变化

论文摘要

青春期前各种睾丸损伤疾病,如隐睾、睾丸扭转、精索静脉曲张行精索血管结扎术、腹股沟嵌顿疝、肿瘤压迫精索血管及手术切除时睾丸血管的损伤等临床较为常见。对于隐睾症,其中30%左右为高位隐睾,常因精索血管太短而需行Fowler-Stephen术(精索血管高位结扎切断,长襻输精管睾丸固定术),但术后睾丸萎缩率可达30%左右。在成人行各种睾丸手术后,可通过精液分析、FSH和睾酮的测定、睾丸穿刺活检等多种方法来判断睾丸的功能状态。而在儿童,目前临床上仅能应用的方法是绒毛膜促性腺激素(HCG)激发试验,但该方法只能部分反映睾丸间质细胞的功能,不能了解青春期前最具有活力的曲精细管部分功能。因此有必要寻找一种能较为客观评估青春期前睾丸功能的方法,来跟踪观察和评估术后睾丸功能改变。 抑制素(Inhibin)是一种异二聚体糖蛋白激素,属于转化生长因子β(TGF-β)蛋白质及其受体超家族成员,由α和两个β亚基(βA和βB)之一通过二硫键连接而成,即抑制素A(α-βA)和抑制素B(α-βB)。在男性体内,抑制素的主要生理形式是抑制素B,男性一生中均能测到血清抑制素B。抑制素B是下丘脑—垂体—性腺轴的重要组成成员。FSH刺激睾丸产生抑制素B,而抑制素B则通过负反馈抑制垂体分泌FSH。在成人,虽然目前抑制素B的两2005年浙江大学医学院硕士论文个亚单位的产生的细胞定位还未确定,但抑制素B与FSH成负反馈关系己明确,且血清抑制素B已应用于男性不育的诊断和翠丸功能的判断中,而在儿童,其应用目前尚未定论。 本研究的目的是建立青春发育期前大鼠翠丸缺血损伤模型,通过观察血清抑制素B水平及其pB亚基mRNA在翠丸细胞内表达水平的变化,结合翠丸缺血损伤后的组织形态学改变和血清FSH、LH的变化,来评价血清抑制素B能否反映青春发育期前翠丸缺血损伤后翠丸功能状态的变化。材料与方该 雄性25天龄Wista:大鼠共72只被随机分为对照组和精索血管结扎组(简称缺血组)。动物麻醉后,对照组为手术进腹腔后轻提肇丸后即关腹:结扎组则予高位结扎右侧精索血管。在术后第1、3、5、7、9、20天(每小组各6只)麻醉后去眼球后取静脉血2一3ml,离心后测定血清抑制素B(双抗体酶联免疫吸附法)、FSH及LH水平(化学发光法);剖腹切取双侧肇丸,按常规组织学检查方法进行组织固定切片H&E染色,并通过原位杂交技术观察抑制素B日B亚基mRNA在翠丸内各类细胞内的表达情况。所获各类数据用SPSSIO.O统计软件包进行统计分析。结果HSLV 术后死亡3只。翠丸出现萎缩。 术后血清FSH、对照组(10.56士1.17结扎组中,术后7、9、20天分别有1、2、6共9个结扎侧、抑制素B水平:术后1一9天,9 .02士0.53mIU/ml,P(0.001),结扎组FSH水平高于而LH却无明显改变(0.48士。,27 vs 0.45士0.29 mIU/ml,p>0.05);结扎组抑制素B水平明显低于对照

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