背根节神经元中囊泡转运释放相关基因的差异表达及其在外周神经损伤后可塑性的研究

论文摘要

传递伤害性信息的无髓鞘C类传入纤维由背根节小细胞发出,投射到脊髓背角II层。外周神经损伤后,在C类传入纤维终末突触前区域突触囊泡数目降低,且不能在释放区正常聚集,而在脊髓背角III-IV层大神经元的传入纤维终末中却无此现象,提示在传导伤害性感受的背根节小细胞及其传入纤维中经典神经递质的转运和释放发生了紊乱,我们推测背根节小细胞中与突触囊泡转运释放相关分子的表达改变是造成这一现象的原因。前期cDNA微阵列分析明确了外周神经损伤后背根神经节中有11个与囊泡转运释放相关的基因表达发生了明显改变,包括Rab家族的5个成员（Rab3a、Rab4b、Rab7、Rab12和Rab15）、囊泡蛋白（synaptoporin、VAMP-1、VAP-A和CGA）和突触前膜蛋白（SNAP25和syanptojanin）。我们利用原位杂交、半定量PCR及免疫组化的方法,研究了外周神经损伤后这些基因在不同时间的表达变化特征,并对其在不同背根节神经元亚群中的分布进行了细胞类型定位。在这些基因中,synaptoporin特异地分布于背根节小细胞,其传入纤维终止于背角浅层,并且在神经损伤后,在背根节和脊髓背角的表达都增高,提示synaptoporin表达上调是C传入纤维中突触囊泡异常分布的原因。免疫组化的结果揭示了synaptoporin和synaptophysin在背根节神经元中的差异分布。在伤害性感受器背根节小细胞及其传入纤维中synaptoporin广泛分布,而synaptophysin集中分布于背根节大细胞及Aβ纤维,在背根节小细胞和C纤维中分布有限。在IB4阳性的背根节小细胞亚群中这两种蛋白均

论文目录

• 论文摘要
• ABSTRACT
• 英文缩写词表
• 1. 前言
• 2. 材料与方法
• 3. 实验结果
• 3.1 外周神经损伤后背根节神经元中囊泡转运释放相关基因的表达可塑性
• 3.1.1 在两类背根节神经元中普遍表达的囊泡转运释放相关基因
• 3.1.2 特异性分布于背根节大神经元中的囊泡转运释放相关基因
• 3.1.3 仅在背根节小神经元中特异表达的囊泡转运释放相关基因
• 3.2 synaptoporin 和synaptophysin 在外周神经系统中的差异表达及外周神经损伤后synaptoporin 的表达上调
• 3.2.1 synaptoporin 和synaptophysin 在背根神经节及脊髓背角的差异分布
• 3.2.2 synaptoporin 和synaptophysin 在背根节小神经元不同亚群及其传入纤维上的差异分布
• 3.2.3 外周神经损伤后,synaptoporin 在背根节小神经元中特异性上调
• 3.3 SNAP23 和SNAP25 在背根节神经元中的差异表达及其功能意义
• 3.3.1 SNAP23 和SNAP25 在背根节神经元及脊髓背角的差异分布
• 3.3.2 SNAP23 参与SNARE 核心复合物的形成
• 3.3.3 发育过程中SNAP23 和SNAP25 的差异表达
• 4. 讨论
• 4.1 研究神经损伤后背根节小细胞特异表达基因的意义
• 4.2 囊泡分泌必需蛋白在不同背根节神经元亚群中差异分布可能是一个普遍现象
• 4.3 synaptoporin 和synaptophysin 在背根节神经元中的差异分布以及外周神经损伤后synaptoporin 表达特异性上调的生物学意义
• 4.4 synaptoporin 和synaptophysin 对SNARE 复合物形成的影响
• 4.5 在无SNAP25 表达的神经元中,SNAP23 介导突触囊泡的释放的可能性
• 4.6 SNAP23 是否介导自发囊泡释放?
• 2+浓度对SNAP23 功能的影响'>4.7 Ca²⁺浓度对SNAP23 功能的影响
• 5. 结论
• 6. 参考文献
• 7. 博士期间发表文献
• 8. 文献综述
• 9. 综述参考文献
• 致谢