论文摘要
目的:研究自噬性死亡在槲皮素（quercetin,Que）诱导的人乳腺癌MCF-7细胞死亡中的作用,初步探讨自噬的作用机制。方法:用不同浓度的Que处理人乳腺癌MCF-7细胞,采用MTT法测定Que对MCF-7细胞增殖的抑制作用;用光镜观察Que给药后MCF-7细胞形态的变化;应用Hochest33258染色及吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）双染色、MDC荧光染色观察给药后MCF-7细胞的凋亡和自噬征象:检测LDH漏出率以观察用自噬特异性抑制剂3-MA阻断自噬后Que抑瘤作用的变化;采用MTT法测定用溶酶体膜碱化剂氯喹阻断自噬后Que抑瘤作用的变化;免疫荧光法和测量线粒体膜电位研究自噬与凋亡在Que诱导的MCF-7细胞死亡中的分子机制。结果:Que对MCF-7细胞生长有显著的抑制作用,且此作用呈明显的时间、剂量依赖性;光镜显示Que给药后MCF-7细胞形态发生显著变化;Hochest33258染色及吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色显示Que给药后后期可诱导MCF-7细胞发生凋亡;MDC荧光染色显示Que给药后早期可诱导MCF-7细胞发生自噬;LDH漏出率实验结果表明,在Que给药前和给药后阻断自噬,Que对MCF-7细胞的细胞毒性作用均增强;MTT法实验结果表明,在Que给药后碱化溶酶体膜可增强Que对MCF-7细胞的抑制作用;免疫荧光结果显示,Que诱导MCF-7细胞发生自噬时,自噬特异性蛋白LC3被激活;线粒体膜电位测量结果显示Que给药后线粒体膜电位下降。结论:Que能明显抑制MCF-7细胞的生长,并诱导其发生自噬和凋亡。在Que诱导的MCF-7细胞的死亡中,自噬作为一种细胞的死亡程序,可通过激活溶酶体酶线粒体,促进MCF-7细胞走向凋亡或另一种死亡方式。