大鼠对膳食诱导肥胖和胰岛素抵抗的易感性、大豆异黄酮的影响及其机制研究

论文摘要

1 膳食诱导肥胖和胰岛素抵抗大鼠模型的建立 目的：复制肥胖与胰岛素抵抗模型大鼠，为后续试验作准备。 方法：82只SD雄性大鼠按体重随机分为基础饲料组（n=10）和高脂高蔗糖饲料组（n=72），分别喂饲基础和高脂高蔗糖饲料，8周后，筛选模型大鼠：①高脂高蔗糖饲料组大鼠空腹体重大于基础饲料组均数加1.4个标准差者入选为肥胖（Ob）模型大鼠；②高脂高蔗糖饲料组大鼠胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）大于基础饲料组均数加1.96个标准差者入选为胰岛素抵抗（IR）模型大鼠。 结果：Ob与IR大鼠模型成功率分别为58.3％、66.7％。 2 大鼠对膳食诱导肥胖和IR易感性的比较 目的：了解对高脂高蔗糖膳食诱导肥胖、IR易感性不同大鼠间的差异，并探讨其可能机制。 方法：动物造模方法、Ob、IR模型成立的判定方法及基础饲料对照组（Bas-C）处理方法同“1”。第一部分高脂高蔗糖饲料喂养大鼠（大豆异黄酮干预大鼠除外）分为以下4组：非肥胖+非IR组（nOb+nIR，肥胖及IR大鼠筛选后剩余的）、Ob+IR组（Ob+IR，既符合Ob标准又存在IR）、Ob+非IR组（Ob+nIR，符合Ob而不符合IR判定标准）、非Ob+IR组（nOb+IR，符合JR、但不符合Ob判定标准）。Bas-C继续喂养基础饲料，其余4组在分组后继续喂饲高脂高蔗糖饲料。4 周后，空腹采集标本。检测静脉全血血糖、血清胰岛素、C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子（TNF）-a、白介细胞介素（IL）-6脂联素（adiponectin，APN）、抵抗素（resistin）、瘦素（leptin）含量，肾周脂肪脂联素、抵抗素、瘦素、葡萄糖转运蛋白-4（GLUT-4）、过氧化物酶体增生物激活受体-γ（PPAR-γ）、核因子-κB（NF-κB）p65亚基、Bax及Bcl-2等基因

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 缩略词表
• 1 前言
• 2 膳食诱导肥胖和胰岛素抵抗大鼠模型的建立
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 主要仪器
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 实验动物
• 2.1.4 大鼠饲料
• 2.1.5 模型复制
• 2.1.6 检测指标及方法
• 2.1.7 数据处理
• 2.2 结果
• 2.2.1 大鼠的一般状况
• 2.2.2 造模期间大鼠体重的变化
• 2.2.3 造模结束时大鼠的胰岛素敏感性
• 2.2.4 Ob大鼠模型成功率
• 2.2.5 IR大鼠模型成功率
• 2.2.6 Ob和IR模型大鼠的体重及胰岛素敏感性
• 2.3 讨论
• 2.3.1 试验动物及饲养环境的选择
• 2.3.2 大鼠饲料配方的选择
• 2.3.3 Ob及IR模型大鼠模型复制成功标准的确定及依据
• 2.3.4 Ob与IR模型大鼠体重与胰岛素敏感性的比较
• 2.4 小结
• 3 大鼠对膳食诱导肥胖和IR的易感性比较
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 主要仪器
• 3.1.2 主要试剂
• 3.1.3 实验用溶液的配制
• 3.1.4 实验动物、饲料及造模方法
• 3.1.5 动物分组
• 3.1.6 检测标本的采集
• 3.1.7 检测指标及方法
• 3.1.8 数据处理
• 3.2 结果
• 3.2.1 不同状态大鼠体重比较
• 3.2.2 不同状态大鼠体内脂肪含量的比较
• 3.2.3 不同状态大鼠HOMA-IR的比较
• 3.2.4 不同状态大鼠炎症标志物水平的比较
• 3.2.5 不同状态大鼠脂联素mRNA表达和血清水平的比较
• 3.2.6 不同状态大鼠抵抗素基因mRNA和血清水平的比较
• 3.2.7 不同状态大鼠瘦素mRNA和血清水平的比较
• 3.2.8 不同状态大鼠脂肪GLUT-4、PPAR-γ mRNA及NF-KB活化的比较
• 3.2.9 不同状态大鼠脂肪细胞Bax及Bcl-2基因mRNA比值的比较
• 3.3 讨论
• 3.3.1 低度炎症的概念
• 3.3.2 Ob、IR与低度炎症的关系
• 3.3.3 对Ob与胰岛素抵抗不同易感性大鼠间的比较
• 3.4 小结
• 4 脂联素、抵抗素基因单核苷酸多态性与膳食诱导OB和IR易感性的关系
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 主要试剂与仪器
• 4.1.2 动物、模型判定及标本采集
• 4.1.3 SNPs的检测
• 4.1.4 统计学方法
• 4.2 结果
• 4.2.1 均匀设计各方案PCR扩增结果
• 4.2.2 ASA法PCR各方案结果的回归分析
• 4.2.3 各对引物扩增条件的优化结果
• 4.2.4 优化条件下ASA法PCR扩增结果
• 4.2.5 脂联素基因C114T多态性的酶切结果
• 4.2.6 脂联素基因SNPs各基因型
• 4.2.7 抵抗素基因SNPs各基因型
• 4.2.8 脂联素SNPs各类型的测序验证结果
• 4.2.9 抵抗素SNPs各类型的测序验证结果
• 4.2.10 对IR、Ob不同易感状态大鼠脂联素基因SNPs的检测结果
• 4.2.11 对IR、Ob不同易感性大鼠抵抗素基因SNPs的检测结果
• 4.3 讨论
• 4.3.1 SNPs检测方法的选择
• 4.3.2 均匀设计的引入使SNPs的检测得以顺利进行
• 4.3.3 脂联素、抵抗素基因SNPs与大鼠Ob和IR易感性的关系
• 4.4 小结
• 5 大豆异黄酮对肥胖和胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的影响及机制研究
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 主要试剂与仪器
• 5.1.2 动物及模型判定
• 5.1.3 Ob模型大鼠分组
• 5.1.4 IR模型大鼠分组
• 5.1.5 SIF干预方法及标本采集
• 5.1.6 检测指标及方法
• 5.1.7 数据处理
• 5.2 结果
• 5.2.1 大鼠的一般状况
• 5.2.2 SIF干预期间各组大鼠的摄食量
• 5.2.3 SIF干预期间各组大鼠体重的变化
• 5.2.4 SIF对大鼠内脏脂肪含量的影响
• 5.2.5 SIF对大鼠IS的影响
• 5.2.6 SIF对大鼠血清炎症标志物CRP、TNF-α及IL-6水平的影响
• 5.2.7 SIF对大鼠脂联素mRNA的表达和血清蛋白水平的影响
• 5.2.8 SIF对大鼠抵抗素mRNA表达和血清抵抗素水平的影响
• 5.2.9 SIF对大鼠脂肪瘦素mRNA表达和血清瘦素水平的影响
• 5.2.10 SIF对脂肪GLUT-4、PPAR-γ基因mRNA表达的影响
• 5.2.11 SIF对肾周脂肪NF-κB p65mRNA表达和活化的影响
• 5.2.12 SIF对脂肪细胞Bax、Bcl-2基因mRNA的影响
• 5.2.13 各检测指标与IS（以HOMA-IR表示）的相关分析
• 5.3 讨论
• 5.3.1 分别观察SIF对Ob及IR模型大鼠影响的意义
• 5.3.2 关于大豆异黄酮及其剂量选择
• 5.3.3 SIF对Ob、IR大鼠体重、内脏脂肪含量及IS的影响及其作用机制
• 5.4 小结
• 6 总结
• 参考文献
• 综述
• 肥胖、胰岛素抵抗与脂肪细胞多肽关联的发生机制的研究概况
• 参考文献
• 肥胖发生的机制研究
• 参考文献
• 致谢
• 附：博士期间以第一作者身份撰写论文一览表