肝靶向性载顺铂长循环纳米粒的制备及体外抗肿瘤研究

论文摘要

目的本研究选用聚氰基丙烯酸正丁酯（polybutylcyanoacrylat,PBCA）为载体材料,采用复乳法制备不同粒径的mPEG分子修饰的载顺铂长循环PBCA-mPEG纳米粒。研究比较了不同长循环纳米粒的物理特征。选择中等粒径的长循环纳米粒,研究其体外对人肝癌细胞hepG2的抗癌活性及在小鼠体内的靶向性。方法在单因素试验的基础上,采用复乳法制备了载顺铂的不同粒径大小的PBCA-mPEG长循环纳米粒。均匀设计试验优化了隐形纳米粒的包封率。观察长循环纳米粒的形态,测定长循环纳米粒的粒径,Zeta电位,包封率,载药量。选择载药量及包封率相对较高,中等粒径（170nm左右）的载顺铂长循环纳米粒研究其对人肝癌细胞hepG2的体外抗癌活性。昆明种小鼠60只随机分为载顺铂长循环纳米粒组和游离顺铂对照组,经小鼠尾静脉按5mg/kg的剂量分别注射载顺铂长循环纳米粒或顺铂生理盐水,于给药后15,30min,1,2,6和12h处死小鼠,分别提取心脏、肝、脾、肺、肾、血浆样品,以高效液相色谱法测定顺铂的浓度。结果长循环纳米粒形态呈圆形,粒径分别为80,170和240nm左右。随着粒径的减小,纳米粒Zeta电位减小。空白PBCA-mPEG纳米粒表现了较低的毒性,载顺铂长循环纳米粒在体外抗癌活性与顺铂注射液相比无显著差异。载顺铂长循环纳米粒将细胞阻滞于G2/M,并诱导了细胞调亡过程中重要酶caspase-3的激活。12h以内纳米粒组惺蟾卧嘧橹械乃巢ǘ认灾哂谟卫胨巢?P＜0.01),肾脏组织中高浓度顺铂维持时间不长并显著低于游离顺铂组（P＜0.01）。结论载顺铂长循环纳米粒细胞毒性低,具有良好的肝靶向性,降低了肾脏等脏器的药物分布,并具有缓慢释药的特点,是治疗肝癌较理想的给药系统。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 正文
• 前言
• 第一章 载顺铂PBCA-mPEG长循环纳米粒的制备及表征分析
• 1.材料与方法
• 1.1 材料与仪器
• 1.2 空白PBCA-mPEG纳米粒的制备
• 1.3 顺铂长循环纳米粒的制备
• 1.4 单因素试验初选长循环纳米粒的制备长件
• 1.5 均匀设计试验优化长循环纳米粒的处方和制备工艺条件
• 1.6 不同长循环纳米粒各理化性质的表征
• 2.结果与讨论
• 2.1 单因素试验初选长循环纳米粒的制备条件
• 2.2 均匀设计试验优化长循环纳米粒的处方和制备工艺条件
• 2.3 长循环纳米粒的形态观察
• 2.4 长循环纳米粒的粒径和Zeta电位测定
• 2.5 长循环纳米粒包封率和载药量的测定
• 3.小结
• 第二章 载顺铂PBCA-mPEG长循环纳米粒的体外实验研究
• 1.材料和方法
• 1.1 村料和仪器
• 1.2 细胞毒性试验
• 1.3 流式细胞分析
• 1.4 统计学分析
• 2.结果与讨论
• 2.1 空白PBCA-mPEG长循环纳米粒的对肝癌细胞的毒性
• 2.2 载顺铂PBCA-mPEG长循环纳米粒在体外对肝癌细胞的抗癌活性
• 2.3 流式细胞分析
• 2.4 caspase-3活性测定
• 3.小结
• 第三章 载顺铂PBCA-mPEG长循环纳米粒在小鼠体内靶向性分布研究
• 1.材料与方法
• 1.1 仪器与试剂
• 1.2 血浆及各组织中顺铂的HPLC测定
• 1.3 小鼠尾静脉注射液和载顺铂长循环纳米粒后的体内分布研究
• 1.4 统计学方法
• 2.结果与讨论
• 2.1 小鼠尾静脉注射顺铂注射和载顺铂长循环纳米粒后的体内分布研究
• 2.2 载顺铂长循环纳米粒给药系数的缓释性
• 3.小结
• 全文总结
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间主要的研究成果