论文摘要
月腺大戟、瑞香狼毒和狼毒大戟是狼毒类药材的主要源植物,具有抗肿瘤、抗病毒和抑菌杀虫等多种生物活性,而研究主要集中在瑞香狼毒上,对月腺大戟化学成分及作用的研究较少。番茄枯萎病是由番茄枯萎病菌（Fusarium oxysporum Schl.）引起的一种严重危害蔬菜品质和产量的病害,生产上主要依靠化学防治控制其危害,而寻找无污染无残留的植物源农药来替代化学农药的大量施用是解决农药残留问题的有效途径。针对上述问题,本试验以月腺大戟为原料,提取纯化其根中总黄酮类化合物,研究其对离体番茄枯萎病菌的抑制作用和活体条件下对感染番茄枯萎病的番茄幼苗的控制及预防效果;并在此基础上研究月腺大戟根总黄酮处理番茄幼苗后,植株体内一系列与抗病性相关酶的活性变化,以期为月腺大戟的资源开发利用及植物病害的生物防治提供理论依据。主要研究结果如下:1.月腺大戟根总黄酮提取的优化条件为:提取时间2h,提取温度70℃,料液比1:40,乙醇浓度50%;影响提取的主次顺序为:料液比＞提取时间＞乙醇浓度＞提取温度;其中料液比和提取时间是影响月腺大戟根总黄酮提取效果的显著因素。2.月腺大戟根总黄酮纯化的优化条件为:上样液浓度20mg/L,上样液pH4.0,乙醇浓度50%,上样量1ml/g;影响纯化的主次顺序为:上样液浓度＞上样液pH＞乙醇浓度＞上样量,其中上样液浓度和上样液pH为影响纯化的显著因素。3.月腺大戟根总黄酮纯化物对番茄枯萎病菌菌丝生长和分生孢子萌发均有显著的抑制作用,抑制率随总黄酮浓度增高而增加,20mg/L时抑制率均达100%。总黄酮处理后的番茄枯萎病菌菌丝较细,分支减少,透明度差,并观察到菌丝体上有许多颜色很深的物质聚集,液泡数量增多且形成较大的液泡;菌丝体细胞膜透性增加,SOD、CAT活性呈先上升后下降的趋势。4.月腺大戟根总黄酮粗提物和纯化物对感染番茄枯萎病的番茄幼苗病情有控制作用,7d和14d后的病情指数均随处理浓度的增大而降低,粗提物浓度为40mg/L时,7d时的病情指数为24.85%,14d时的病情指数为50.17%;纯化物浓度为30mg/L时,7d时的病情指数为20.98%,14d时的病情指数为46.87%。可见,纯化后的月腺大戟根总黄酮对番茄枯萎病控制效果更好。5.月腺大戟根总黄酮粗提物和纯化物对番茄幼苗的预防效果表明:粗提物浓度为15mg/L时,预防效果最好,7d时预防效果达48.39%;14d时预防效果为25.18%。纯化物浓度为15mg/L时,预防效果最好,7d时预防效果为23.36%;14d时预防效果为12.72%。月腺大戟根总黄酮粗提物对番茄枯萎病的预防效果比纯化物好。6.月腺大戟根总黄酮粗提物和纯化物处理番茄幼苗后,均诱导提高了植株体内SOD、POD、PAL、PPO、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的活性和木质素的含量;其中,SOD和PAL是月腺大戟根总黄酮诱导番茄幼苗产生抗病性、预防番茄幼苗感染枯萎病过程中的关键酶。