NF-κB信号通路对心肺复苏后大鼠脑AQP-4 mRNA表达的调控作用

论文摘要

目的:观察心肺复苏后大鼠脑NF-κB活性变化对水通道蛋白-4（aquaporin-4,AQP-4）mRNA表达的影响,探讨心肺复苏后大鼠脑AQP-4mRNA表达调控的可能机制。方法:健康雄性Sprague-Dawley大鼠54只,随机分为假手术组（A组,6只）、复苏加生理盐水组（B组,24只）和复苏加吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC）组（C组,24只）,B组和C组又分为自主循环恢复（restoration of spontaneous circulation, ROSC）3h、6h、12h、24h四个亚组,每个亚组各6只。A组仅进行气管插管、动静脉置管等操作,不予窒息及心肺复苏,B组于窒息时腹腔注射与C组PDTC等量的生理盐水,窒息8min达心脏骤停（cardiac arrest,CA）指标后,动物予以胸外按压、机械通气和肾上腺素等措施进行心肺复苏,C组于窒息时给予腹腔注射PDTC,其余操作同B组。各组均进行连续呼吸频率、心率、动脉血压等生命体征监测,应用免疫组织化学染色检测大鼠脑NF-κB p65的活性改变,逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription polymerase chain reaction ,RT-PCR）测定大鼠脑AQP-4 mRNA的表达变化。结果:B组和C组各亚组的NF-κB p65活性和AQP-4mRNA表达与A组相比均明显增加（P<0.01）,B、C两组NF-κB活性从ROSC后3h开始便持续升高,至ROSC 24h达高峰,AQP-4 mRNA的表达表现为先升高,于ROSC后12h达顶峰,24h出现下降。C组各时间点NF-κB活性和AQP-4mRNA表达与B组同时间点相比明显下降（P<0.05）,且ROSC后的前12h内的NF-κB活性变化与AQP-4mRNA表达变化呈正相关（r=0.775,p<0.01）。结论:心肺复苏后早期大鼠脑NF-κB活性增加,AQP-4 mRNA表达增强,NF-κB活化抑制剂PDTC能明显降低AQP-4mRNA的表达,推断NF-κB信号通路的激活在心肺复苏后早期大鼠脑AQP-4 mRNA表达中可能起了重要的调控作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章. 前言
• 第2章. 材料与方法――实验材料
• 2.1 实验动物
• 2.2 主要实验仪器
• 2.3 主要实验试剂
• 2.4 主要试剂和药物配制
• 第3章. 材料与方法――实验方法及程序
• 3.1 实验动物分组
• 3.2 心肺复苏动物实验模型制备
• 3.3 指标测定和方法
• 3.3.1 脑组织取材
• 3.3.2 RT-PCR 检测 AQP-4mRNA 的表达
• 3.3.2.1 实验器具的处理与准备
• 3.3.2.2 步骤流程
• 3.3.3 NF-κB 活性变化的测定
• 3.4 统计学处理
• 第4章. 结果
• 4.1 各组大鼠基础生理参数及复苏相关参数比较
• 4.2 心肺复苏后大鼠脑 NF-κB 活性的变化
• 4.3 AQP-4 RT-PCR 结果
• 4.4 相关性分析
• 第5章. 讨论
• 第6章. 结论
• 第7章. 展望
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 文献综述
• 攻读学位期间的研究成果