本文主要研究内容
作者刘洋,吕洋,王浩宇,李娇,任君旭,王海萍（2019）在《1,25-维生素-D3体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的最适浓度》一文中研究指出：目的探讨1,25-维生素D3（1,25-vitamin-D3）体外诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）向心肌样细胞分化的最适浓度。方法采用全骨髓贴壁法结合密度梯度离心法分离培养SD大鼠BMSCs,应用3、6、12、24 nmol/L 1,25-vitamin-D3对第2代BMSCs进行定向诱导,倒置相差显微镜下动态观察细胞生长状况。运用流式细胞仪对BMSCs进行鉴定。应用免疫细胞化学、免疫荧光及Western blotting法检测诱导后4周的BMSCs原肌球蛋白（TPM）、间隙连接蛋白43（Cx43）、心肌肌钙蛋白T（cTnT）的表达情况。运用透射电子显微镜观察分化细胞与心肌细胞类似的超微结构。在诱导后1、2和4周这3个时间点,以Real-time PCR法检测细胞心肌早期转录因子GATA结合蛋白4（GATA4）、Nkx2.5的表达。结果 1.倒置相差显微镜下观察,原代细胞培养72 h后,大部分细胞呈短梭形;培养1周后,细胞呈现出多样化的形态;诱导4周的BMSCs,相邻细胞间联系紧密,排列具有明显的方向性。不同浓度1,25-vitamin-D3诱导后的BMSCs,其数量及形态存在差异。2.流式细胞术的鉴定结果显示,CD29、CD45、CD90的阳性表达率分别为97.4%、3.3%和91.4%。3.免疫细胞化学、免疫荧光及Western blotting法检测不同浓度1,25-vitamin-D3诱导4周后的BMSCs均可见TPM、Cx43及cTnT的阳性表达,其中6 nmol/L组的表达均最高,而未诱导组细胞呈弱阳性或阴性表达,差异具有统计学意义（P<0.05）。4.透射电子显微镜观察,细胞诱导培养至4周,胞质内可见较多平行排列的肌丝及线粒体、核糖体、粗面内质网等细胞器。5.Real-time PCR检测结果显示,GATA4及Nkx2.5基因于诱导后1周表达增强,2周表达减弱,4周表达增强;4个诱导组相比较,6 nmol/L组明显优于其他3组（P<0.05）。结论 1,25-vitamin-D3可以诱导BMSCs获得心肌分化表型,其诱导分化最适浓度为6 nmol/L。
Abstract
mu de tan tao 1,25-wei sheng su D3（1,25-vitamin-D3）ti wai you dao gu sui jian chong zhi gan xi bao （BMSCs）xiang xin ji yang xi bao fen hua de zui kuo nong du 。fang fa cai yong quan gu sui tie bi fa jie ge mi du ti du li xin fa fen li pei yang SDda shu BMSCs,ying yong 3、6、12、24 nmol/L 1,25-vitamin-D3dui di 2dai BMSCsjin hang ding xiang you dao ,dao zhi xiang cha xian wei jing xia dong tai guan cha xi bao sheng chang zhuang kuang 。yun yong liu shi xi bao yi dui BMSCsjin hang jian ding 。ying yong mian yi xi bao hua xue 、mian yi ying guang ji Western blottingfa jian ce you dao hou 4zhou de BMSCsyuan ji qiu dan bai （TPM）、jian xi lian jie dan bai 43（Cx43）、xin ji ji gai dan bai T（cTnT）de biao da qing kuang 。yun yong tou she dian zi xian wei jing guan cha fen hua xi bao yu xin ji xi bao lei shi de chao wei jie gou 。zai you dao hou 1、2he 4zhou zhe 3ge shi jian dian ,yi Real-time PCRfa jian ce xi bao xin ji zao ji zhuai lu yin zi GATAjie ge dan bai 4（GATA4）、Nkx2.5de biao da 。jie guo 1.dao zhi xiang cha xian wei jing xia guan cha ,yuan dai xi bao pei yang 72 hhou ,da bu fen xi bao cheng duan suo xing ;pei yang 1zhou hou ,xi bao cheng xian chu duo yang hua de xing tai ;you dao 4zhou de BMSCs,xiang lin xi bao jian lian ji jin mi ,pai lie ju you ming xian de fang xiang xing 。bu tong nong du 1,25-vitamin-D3you dao hou de BMSCs,ji shu liang ji xing tai cun zai cha yi 。2.liu shi xi bao shu de jian ding jie guo xian shi ,CD29、CD45、CD90de yang xing biao da lv fen bie wei 97.4%、3.3%he 91.4%。3.mian yi xi bao hua xue 、mian yi ying guang ji Western blottingfa jian ce bu tong nong du 1,25-vitamin-D3you dao 4zhou hou de BMSCsjun ke jian TPM、Cx43ji cTnTde yang xing biao da ,ji zhong 6 nmol/Lzu de biao da jun zui gao ,er wei you dao zu xi bao cheng ruo yang xing huo yin xing biao da ,cha yi ju you tong ji xue yi yi （P<0.05）。4.tou she dian zi xian wei jing guan cha ,xi bao you dao pei yang zhi 4zhou ,bao zhi nei ke jian jiao duo ping hang pai lie de ji si ji xian li ti 、he tang ti 、cu mian nei zhi wang deng xi bao qi 。5.Real-time PCRjian ce jie guo xian shi ,GATA4ji Nkx2.5ji yin yu you dao hou 1zhou biao da zeng jiang ,2zhou biao da jian ruo ,4zhou biao da zeng jiang ;4ge you dao zu xiang bi jiao ,6 nmol/Lzu ming xian you yu ji ta 3zu （P<0.05）。jie lun 1,25-vitamin-D3ke yi you dao BMSCshuo de xin ji fen hua biao xing ,ji you dao fen hua zui kuo nong du wei 6 nmol/L。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自解剖学报的刘洋,吕洋,王浩宇,李娇,任君旭,王海萍，发表于刊物解剖学报2019年05期论文，是一篇关于骨髓间充质干细胞论文,维生素论文,心肌样细胞论文,细胞分化论文,免疫印迹法论文,大鼠论文,解剖学报2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自解剖学报2019年05期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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