热应激对雄鼠生殖机能损伤的研究

论文摘要

以昆明雄性小白鼠为受试动物,分别用近似阴囊温度（33℃）、腹温（37℃）和超高温（42℃）三个温度组,实施1h/d的应激处理,以建立持续的全身热应激动物模型。以小鼠精子发生过程各阶段所需时间确定热应激持续的时间,每个温度组又分别设四个不同热应激持续时间（8d、13d、21d和35d）。在热应激处理的过程中记录小鼠应激前后体重和肛温的变化。分别在热应激持续到8d、13d、21d和35d时,应用形态学观察法,研究受试鼠睾丸和附睾重量及指数、组织结构、细胞凋亡和附睾精子形态学的变化;应用免疫荧光细胞化学和蛋白质印迹分析的方法,研究睾丸和附睾组织中热休克蛋白70（HSP70）的表达;应用比色法检测睾丸和附睾组织内活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）、抗氧化物酶（SOD、GSH-Px、CAT）的活力或浓度的变化;应用交配试验,检测雄鼠受精能力及其致孕雌鼠的产仔数的变化,用以揭示热应激对雄鼠生殖机能的影响。试验结果如下:1.热应激前后的鼠体重和肛温变化体重的变化:受热应激前和后,鼠体重减轻,并且是热应激后的体重低于热应激前的体重。而受热应激前和后的鼠体重的差值变化是热应激温度越高其越大,热应激次数越多其越小。肛温的变化:受热应激后,鼠肛温上升,并且是热应激温度越高,上升的幅度越明显,但随热应激次数的增加变化不显著;而每次受热应激前,鼠肛温恢复到对照组的水平。2.热应激鼠体重、睾丸和附睾重量及其重量指数的变化受热应激后,与对照组相比,鼠的体重、睾丸和附睾重下降,并且热应激温度越高越明显。除37℃组和33℃组分别应激8d和13d外的各组,应激后的鼠体重均显著（P<0.05）低于对照组;除33℃组分别应激13d和21d、37℃组应激13d外的各组,应激后的鼠睾丸重量均显著（P<0.05）低于对照组;除33℃组和37℃组应激8d外的各组,应激后的鼠附睾重量均显著（P<0.05）低于对照组。除42℃应激后的鼠睾丸重量指数显著（P<0.05）小于对照组外,其它各组的鼠睾丸重量指数与对照组间均无显著差异（P>0.05）。而受热应激后,各应激组的鼠附睾重量指数与对照组间均无显著差异（P>0.05）。3.热应激鼠附睾尾精子的形态学变化受热应激后,鼠附睾尾精子密度和精子顶体完整率呈下降趋势,并低于对照组。除33℃组分别应激8d、13d后的精子密度与对照组间无显著差异（P>0.05）外,其它各组均显著（P<0.05）低于对照组。除33℃应激后的精子顶体完整率与对照组间无显著差异（P>0.05）外,其它各组均显著（P<0.05）低于对照组。受热应激后,鼠附睾尾精子畸形率呈现升高趋势,并高于对照组。除37℃组应激8d、33℃组分别应激8d、13d、21d后的精子畸形率与对照组无显著差异（P>0.05）外,其它各组均显著（P<0.05）高于对照组。4.热应激鼠睾丸和附睾组织病理学变化及细胞凋亡

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 引言
• 1.1 热应激与热休克蛋白70
• 1.2 精子的发生和成熟
• 1.3 热休克蛋白70 与雄性生殖
• 1.4 活性氧与雄性生殖
• 1.5 抗氧化物酶与雄性生殖
• 1.6 研究的目的和意义
• 2 材料和方法
• 2.1 主要仪器和试剂
• 2.2 试验方法
• 2.3 数据统计分析方法
• 3 结果与分析
• 3.1 热应激前后鼠体重和肛温的变化
• 3.2 热应激鼠体重、睾丸和附睾重量及其指数的变化
• 3.3 热应激鼠附睾内精子的形态学变化
• 3.4 热应激鼠睾丸和附睾组织形态学的变化
• 3.5 热应激鼠睾丸和附睾组织HSP70 表达的变化
• 3.6 热应激鼠睾丸和附睾组织ROS 活力和MDA 浓度的变化
• 3.7 热应激鼠睾丸和附睾组织SOD、GSH-PX和CAT 活力的变化
• 3.8 热应激雄鼠生育性能的变化
• 4 讨论
• 4.1 热应激对鼠应激前后体重及肛温的影响
• 4.2 热应激对鼠体重、睾丸和附睾重量及指数的影响
• 4.3 热应激对鼠附睾精子形态学的影响
• 4.4 热应激对鼠睾丸和附睾组织形态学的影响
• 4.5 热应激对鼠睾丸和附睾组织HSP70 表达的影响
• 4.6 热应激对鼠睾丸和附睾组织ROS 活力和MDA 浓度的影响
• 4.7 热应激对鼠睾丸和附睾组织SOD、GSH-PX和CAT 活力的影响
• 4.8 热应激对雄鼠生育性能的影响
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读博士学位期间发表的论文