猪脂联素基因遗传多态性及其与肉质性状的相关性研究

论文摘要

运用PCR扩增和基因序列测定技术对脂联素(adiponectin)基因序列进行检测,在此基础上进行序列分析、变异位点与猪肉质性状相关性分析,其结果如下:1.检测到脂联素基因序列有两个变异位点,180位点处发生了A→G的碱基突变,产生了三种基因型:AA、aa、Aa;1171位点处G→A的点突变,产生了dd、DD、Dd基因型。这两个位点分别位于第二外显子和第二内含子内。2.剑白香猪只有基因型AA、dd,杂交猪则表现了多态性,AA、aa、Aa、dd、DD、Dd类型都有。杂交猪中等位基因频率分别为:A:0.3400、a:0.6600、D:0.7600、d:0.2400。总体样本基因型分布频率:AA:0.6364、aa:0.2364、Aa:0.1273、dd:0.6364、DD:0.3273、Dd:0.0364。3.本试验扩增的脂联素基因序列的两个变异位点共出现了7种不同的基因型:AADD、aaDD、AAdd、aaDD、AaDD、AADd、AaDd。几个等位基因的频率分别是:A:0.6182、a:0.0182、D:0.0727、d:0.2909。剑白香猪只有AAdd型。杂交猪中基因型频率分布特征为:aaDD＞AaDD＞AAdd=Aadd＞AADD=AADd=AaDd,基因频率为:d＞A=D＞a;总体的基因型分布频率为:AAdd＞aaDD＞AaDD＞Aadd＞AADD=AADd=AaDd,基因频率为:A＞d＞D＞a。4.脂联素基因序列变异位点与肉质的关系分析表明:AA基因型和Aa基因型的嫩度值、熟肉率差异显著(P＜0.05)。基因型DD、Dd的熟肉率均极显著高于dd基因型的熟肉率(P＜0.01)。基因型AAdd的熟肉率均显著低于基因型aaDD、AaDD、Aadd(P＜0.05)。但几种基因型的熟肉率均在正常范围内。基因型AAdd的嫩度值极显著低于基因型Aadd。由此推测含有基因型AA、dd和AAdd个体的嫩度这一肉质性状最好。

论文目录

• 致谢
• 英文缩略词
• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 文献综述
• 1.引言
• 1.1 肉品的特征
• 1.2 肉质的影响因素
• 1.2.1 遗传因素
• 1.2.2 环境因素
• 1.2.3 营养因素
• 2.肉质常规评定指标
• 2.1 肉色
• 2.2 大理石纹
• 2.3 pH值
• 2.4 系水力
• 2.5 嫩度
• 2.6 风味
• 3.脂肪组织及脂联素
• 3.1 脂肪组织
• 3.2 脂联素研究进展
• 3.2.1 脂联素的发现
• 3.2.2 脂联素基因的结构
• 3.2.3 脂联素对糖代谢、脂代谢的调控作用
• 3.2.4 脂联素基因表达
• 3.2.5 脂联素基因的功能
• 4.本研究的意义
• 第二部分 试验部分
• 一、脂联素基因序列分析
• 1.材料与方法
• 1.1 试验样品来源
• 1.2 主要仪器设备
• 1.3 主要试剂
• 1.3.1 试剂来源
• 1.3.2 常规溶液配制
• 1.4 主要试验方法
• 1.4.1 基因组DNA的提取
• 1.4.2 DNA浓度和纯度的检测
• 1.4.3 PCR引物的设计与合成
• 1.4.4 PCR反应体系及其条件
• 1.4.5 PCR产物检测
• 1.4.6 目的片段DNA的纯化回收
• 1.4.7 纯化回收产物的检测及测序
• 1.4.8 统计分析
• 1.5 结果
• 1.5.1 组织基因组DNA提取结果
• 1.5.2 PCR产物扩增结果
• 1.5.3 纯化回收结果
• 1.5.4 测序结果
• 1.5.5 两变异位点基因频率和基因型频率
• 1.5.6 脂联素基因两变异位点所产生基因型频率及基因频率
• 1.5.7 两变异位点等位基因在两个猪群中的分布
• 1.6 讨论
• 二、猪肉质常规指标测定
• 2.材料与方法
• 2.1 试验样本来源
• 2.2 主要试验仪器设备
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 肌肉颜色的测定
• 2.3.2 肌肉pH值的测定
• 2.3.3 猪肉大理石纹
• 2.3.4 滴水损失
• 2.3.5 失水率
• 2.3.6 肌肉嫩度
• 2.4 统计分析
• 2.5 剑白香猪与杂交猪肉质测定结果
• 2.6 猪脂联素基因不同位点和猪肉质性状的关系
• 2.6.1 猪脂联素基因180位点不同基因型与肉质性状的最小二乘分析
• 2.6.2 猪脂联素基因1171位点不同基因型与肉质性状的最小二乘分析
• 2.6.3 猪脂联素纯合基因型与杂合基因型的肉质性状
• 2.6.4 脂联素基因不同基因型对肉质性状的影响
• 3.讨论
• 3.1 PCR条件的优化
• 3.2 基因型频率和基因频率
• 3.3 脂联素基因序列分析
• 3.4 剑白香猪、杂交猪间肉质性状的比较
• 3.5 脂联素基因与肉质性状的关系
• 第三部分 结论
• 试验结论
• 参考文献
• 附录