武冈市人民医院湖南武冈422400
【摘要】目的：研究PTEN、C-erbB-2蛋白在子宫内膜癌中的表达及病理分析。方法：收集2015年6月到2017年7月我院收治的40例正常子宫内膜组织患者、40例子宫内膜不典型增生患者和40例子宫内膜癌患者，采用免疫组化S-P法检测这三组患者的组织标本中PTEN和C-erbB-2蛋白的表达情况。结果：子宫内膜癌组织中PTEN蛋白表达缺失率明显低于子宫内膜不典型增生和正常子宫内膜组织，差异显著（P<0.001），PTEN蛋白表达与不典型增生的严重程度、病理分级、临床分期有关（P<0.05），但和肌层浸润深度和淋巴结有无转移无关（P>0.05），子宫内膜癌组织中的C-erbB-2蛋白阳性表达率显著高于子宫内膜不典型增生和正常子宫内膜组织（P<0.05），C-erbB-2阳性表达与子宫内膜癌的临床分期、病理分级、肌层浸润的程度和淋巴有无转移有关（P<0.05），但和不典型增生的程度无关（P>0.05）。结论：PTEN的表达缺失和子宫内膜癌的发生有关，C-erbB-2蛋白的表达可判断子宫内膜癌的预后，两者相结合可有助于早期诊断子宫内膜癌，为临床诊断提供依据。
【关键词】PTEN；C-erbB-2蛋白；子宫内膜癌
ExpressionandpathologicalanalysisofPTENandC-erbB-2proteininendometrialcarcinoma
ChengBing-rong
Wugangpeople'sHospital，Wugang，Hunan422400，China
[Abstract]Objective：TostudytheexpressionandpathologicalanalysisofPTENandC-erbB-2proteininendometrialcarcinoma.Methods：TheexpressionofPTENandC-erbB-2proteinin40normalendometrialtissues，40atypicalhyperplasiaand40endometrialcarcinomapatientsfromJune2015toJuly2017weredetectedbyimmunohistochemicalS-Pmethod.Results：TheexpressionofPTENproteininendometrialcarcinomawassignificantlylowerthanthatinatypicalhyperplasiaandnormalendometrium（P<0.001）.TheexpressionofPTENproteinwasrelatedtotheseverity，pathologicalgradeandclinicalstageofatypicalhyperplasia（P<0.05），butwasrelatedtothedepthofmyometrialinvasionandlymphnodemetastasis.ThepositiverateofC-erbB-2proteininendometrialcarcinomawassignificantlyhigherthanthatinatypicalhyperplasiaandnormalendometrialtissues（P<0.05）.ThepositiveexpressionofC-erbB-2wasrelatedtoclinicalstage，pathologicalgrade，degreeofmyometrialinvasionandlymphnodemetastasisofendometrialcarcinoma（P<0.05）.Itwasnotrelatedtothedegreeofatypicalhyperplasia（P>0.05）.Conclusion：TheabsenceofPTENexpressionisassociatedwiththeoccurrenceofendometrialcarcinoma.TheexpressionofC-erbB-2proteincanbeusedtopredicttheprognosisofendometrialcarcinoma.Thecombinationofthetwoproteinscanbehelpfultotheearlydiagnosisofendometrialcarcinomaandprovideabasisforclinicaldiagnosis.
[Keywords]PTEN；C-erbB-2protein；endometrialcarcinoma
子宫内膜癌是发生于子宫内膜的恶性肿瘤，是女性生殖器最常见的恶性肿瘤之一，在国外其发病率居于女性恶性肿瘤的首位[1]，近年来随着我国人民生活方式的不断改变，其发病率也呈逐年增长趋势。子宫内膜癌发病原因目前尚未清楚，可能与长期持续的雌激素刺激、高血压、糖尿病、肥胖、多产等有关，临床表现为阴道不规则流血、下腹疼痛、骨盆疼痛等，晚期患者可出现贫血、消瘦、发热等全身衰竭表现[2]，严重威胁女性的生命安全。近年来发现基因检测法是诊断子宫内膜癌、筛查高危患者的重要手段，本研究采用免疫组化法检测PTEN、C-erbB-2蛋白在子宫内膜癌中的表达及病理分析，从而为临床的诊断和治疗提供依据，现报道如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
选取2015年6月到2017年7月我院收治的40例子宫内膜癌患者，患者年龄30~79岁，平均（50.1±6.2）岁，所有患者术前均未进行化疗、放疗或内分泌治疗，手术病理分期以2000年FIGO推荐使用的为标准，Ⅰ期16例，Ⅱ期10例，Ⅲ期14例，G116例，G214例，G310例，肌层浸润深度<1/2者22例，≥1/2者18例，淋巴转移者19例，卵巢转移者21例，同时随机选择同期由于子宫肌瘤切除子宫的40例正常子宫内膜标本和40例子宫内膜不典型增生标本作为对照组。
1.2方法
采用免疫组化S-P法检测PTEN、C-erbB-2蛋白的表达，PTEN和C-erbB-2蛋白抗体均采用福州迈新生物技术开发有限公司[3]，SP试剂盒由上海太阳生物技术有限公司提供，采用鳞酸盐缓冲液PBS代替一抗做阴性对照，用已知的阳性切片作为阳性对照。采用厚度为4um的石蜡块连续切片，在65℃下烘烤、脱蜡，内源性过氧化物酶经3%双氧水灭活，用微波修复抗原，正常血清封闭，PTEN羊多克隆蛋白抗体在4%下过夜孵育[4]，PBS冲洗，链霉素白素标记兔抗羊血清在室温下冲洗30min，辣根过氧化物酶标记抗体在室温下冲洗30min，并行苏木素染色，封片。
1.3结果判定
黄色或棕黄色染色为阳性，PTEN基因的蛋白产物主要在细胞质，C-erbB-2蛋白产物主要在细胞膜和胞质内[5]，用已知的阳性子宫内膜作为阳性对照，用PBS液取代第一抗体标记作为阴性对照，便于更好的反映检测结果。
1.4统计学处理
所有数据均采用SPSS20.0软件进行统计分析，计量资料应用（）表示，t检验，计数资料以百分率（%）表示，x2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1子宫内膜癌组织中PTEN蛋白表达缺失率明显低于子宫内膜不典型增生和正常子宫内膜组织，差异显著（P<0.001），C-erbB-2蛋白阳性表达率显著高于子宫内膜不典型增生和正常子宫内膜组织（P<0.05），见表1。
表11PTEN、C-erbB-2蛋白在不同子宫内膜中的表达[n（%）]
2.2PTEN和C-erbB-2蛋白表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系
PTEN蛋白表达与不典型增生的严重程度、病理分级、临床分期有关（P<0.05），但和肌层浸润深度和淋巴结有无转移无关（P>0.05），C-erbB-2阳性表达与子宫内膜癌的临床分期、病理分级、肌层浸润的程度和淋巴有无转移有关（P<0.05），但和不典型增生的程度无关（P>0.05），见表2。
表2PTEN和C-erbB-2蛋白表达与子宫内膜癌临床病例分析的关系[n（%）]
3.结论
子宫内膜癌为女性生殖道恶性肿瘤之一，近年来随着人们生活压力的增加，其发病率越来越高，严重威胁着女性的身体健康，研究发现子宫内膜癌如果早期发现治疗生存率为90%，如果确诊为晚期则生存率至多可为15%[6]，因此早期确诊对挽救患者生命至关重要。PTEN蛋白是近几年发现的一种新型抑制肿瘤的基因，也是至今为止唯一一个具有双磷酸酯酶活性的抑癌基因，PTEN蛋白能够使IP3的第三位磷酸去磷酸化进而阻止胰岛素诱导的磷酸肌醇-3激酶的活性，使得细胞无法生长，从而死亡。本研究结果显示，子宫内膜癌组织中PTEN蛋白表达缺失率率明显低于子宫内膜不典型增生和正常子宫内膜组织，差异显著（P<0.001），PTEN蛋白表达与不典型增生的严重程度、病理分级、临床分期有关（P<0.05），但和肌层浸润深度和淋巴结有无转移无关（P>0.05），且表达缺失率随着组织学分级的增高而明显升高，这表明在子宫内膜癌早期PTEN蛋白存在缺失，对早期诊断子宫内膜癌有重要意义。
C-erbB-2蛋白为原癌基因，属于长因子受体类癌基因，可以显著降低肿瘤细胞的生长和致瘤性，在健康的子宫内膜中，C-erbB-2蛋白几乎没有表达，但约20%的子宫内膜不典型增生发展为子宫内膜癌时[7]，C-erbB-2蛋白的表达率会逐渐升高，本研究结果发现，子宫内膜癌组织中的C-erbB-2蛋白阳性表达率显著高于子宫内膜不典型增生和正常子宫内膜组织（P<0.05），说明子宫内膜癌组织中表达过度是相对比较晚发的事件，而且与肿瘤的恶性程度有关，研究还发现C-erbB-2阳性表达与子宫内膜癌的临床分期、病理分级、肌层浸润的程度和淋巴有无转移有关（P<0.05），但和不典型增生的程度无关（P>0.05），这表明C-erbB-2蛋白表达高的肿瘤恶性程度越高，病程发展越快，生存期越短，由此可得知，C-erbB-2蛋白可以判断子宫内膜癌预后程度。综上所述，PTEN的表达缺失和子宫内膜癌的发生有关，C-erbB-2蛋白的表达可判断子宫内膜癌的预后，两者相结合可有助于早期诊断子宫内膜癌，为临床诊断提供依据。
参考文献：
[1]李太升，PTEN和C-erbB-2蛋白在子宫内膜癌的表达及临床意义[J].微量元素与健康研究，2017，34（1）：26-27.
[2]李品莹，李小毛，PTEN基因在子宫内膜癌细胞上皮间质转换中的作用[J].实用医学杂志，2018，34（7）：1101-1106.
[3]田志华，郝刚华，于艳丽，等，雌激素受体、孕激素受体、表皮生长因子受体2及增殖细胞核细胞抗原在子宫内膜癌组织中的表达及意义[J].医学综述，2015，21（9）：1697-1699.
[4]王文祥，钟兰，杨开选，等，抑癌基因p53、PTEN与子宫内膜癌预后相关性分析[J].河南科技大学学报，2017（2）：88-91.
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[6]步翠霞，王言奎，子宫内膜癌与PTEN、NSRG的相关研究[J].中国现代药物应用，2016（7）：1-2.
[7]贾芃，张楠，廖秦平，等，Ki-67和PTEN在子宫内膜细胞学筛查子宫内膜癌中的应用[J].实用妇产科杂志，2015（3）：194-198.