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小叶杜鹃的组织培养技术研究

2020-12-14阅读(860)

小叶杜鹃的组织培养技术研究

论文摘要

小叶杜鹃（Rhododendron Parvifolium Adoms）为杜鹃花科杜鹃花属植物,是多年生常绿小灌木。小叶杜鹃为长白山优良野生花卉,由于数量较稀少,是国家三类重点保护植物。为保护及开发小叶杜鹃资源,本研究通过对外植体的灭菌及植入、启动培养、继代增殖、愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、愈伤组织分化、壮苗、生根培养及炼苗移栽等的研究,以工厂化育苗为目的,寻找合适的培养基及培养条件,希望通过组织培养的方法为快速繁殖小叶杜鹃提供合适的途径,并且可以为以后的转基因、细胞融合等深入研究提供技术支持。通过研究,获得以下研究结果：1.小叶杜鹃组织培养的适宜环境为：温度25±2℃,光照24h/D,光照强度2000Ix,pH值为5.0-5.5。当PH为5.0时,组培苗的增高生长较快,利于增殖培养；当PH为5.5时,组培苗生长较为健壮,利于壮苗培养。2.小叶杜鹃外植体的采集时间：以7月份采集的当年生嫩梢为外植体最好；茎段要优于茎尖,茎段启动快,启动率最高,污染率底。3.外植体灭菌方法：以0.1%升汞进行灭菌,时间设置为2.5min,加入1-2滴吐温可以增强灭菌效果。4.启动培养：以Read+ZT 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L为培养基,PH为5.0,加入蔗糖30g/L,琼脂条12g/L,此时诱导率最高,长势最佳,培养40天,外植体的启动率达62.96%。5.增殖培养：以Read+ZT 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L培养基增殖效果较好,小叶杜鹃的平均增殖倍数为5,从茎段基部分化出丛生芽,增殖苗生长健壮,整体长势较佳。增强光照强度,设定昼夜温差以及适当增大培养基营养元素的浓度,利于培育健壮的增殖苗。6.壮苗培养：以Read +NAA 0.2mg/L+AC2g/L培养基的壮苗效果较好,叶大色绿,长势健壮,并且该培养基具有促使生根的作用。7.生根培养：Read +NAA 0.2mg/L+AC2g/L培养基的生根效果较好,生根率达95.23%,并且组培苗生根效果良好、整体长势较一致,炼苗移栽时成活率也较高。在此培养基上,小叶杜鹃生长速度较快,长势整齐健壮,可以剪切成茎段进行增殖,增殖倍数为4。以茎段的方式进行增殖,不容易发生变异,并且此培养基同时具有壮苗、生根以及增殖的效果,可以将组织培养过程简化。8.愈伤组织的培养：在Read +2,4-D1.5mg/L+NAA 0.1mg/L培养基上,对无菌苗进行愈伤组织的诱导效果较好；叶片的诱导率要高于茎尖；Read +ZT 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L培养基较适合小叶杜鹃愈伤组织的增殖培养；Read +ZT0.8mg/L+NAA 0.08mg/L培养基较适合小叶杜鹃愈伤组织的分化培养。9.炼苗移栽：小叶杜鹃炼苗移栽应选择在温湿度都比较适宜的春秋季节进行,春季移栽成活率要高于秋季；在园土：草炭：腐殖土=1：1：1的基质上组培苗成活率最高；移栽环境以半光照较好。10.扦插生根：扦插生根培养在半光照环境较好；以苔藓为扦插基质的生根率较好；进行生根处理的要较未处理过的好。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 前言
  • 1.1 小叶杜鹃的生物学特性
  • 1.2 组织培养发展过程
  • 1.3 组织培养的应用
  • 1.4 杜鹃的组织培养研究进展
  • 1.5 杜鹃其他方面的研究进展
  • 1.6 杜鹃属植物在现代园林中的应用
  • 1.7 本试验的研究目的和意义
  • 第二章 试验材料与方法
  • 2.1 试验材料
  • 2.2 试验技术路线
  • 2.3 外植体的选择
  • 2.4 灭菌方法和时间
  • 2.5 启动培养
  • 2.6 增殖培养
  • 2.7 壮苗培养
  • 2.8 生根培养
  • 2.9 愈伤组织的培养
  • 2.10 炼苗移栽
  • 2.11 组培苗瓶外生根培养
  • 2.12 替代简化试验
  • 2.13 试验统计指标
  • 第三章 试验结果与分析
  • 3.1 灭菌方法及时间对小叶杜鹃接种效果的影响
  • 3.2 外植体的选择
  • 3.3 启动培养基的筛选
  • 3.4 增殖培养基的筛选
  • 3.5 壮苗培养基的筛选
  • 3.6 生根培养基的筛选
  • 3.7 愈伤组织的培养
  • 3.8 炼苗移栽
  • 3.9 不同处理生根苗对移栽的影响
  • 3.10 组培苗瓶外生根培养
  • 第四章 简化及优化试验
  • 4.1 不同活性炭用量的影响
  • 4.2 不同PH值的影响
  • 4.3 不同蔗糖用量的影响及替代试验
  • 4.4 不同水质的影响
  • 4.5 不同培养基的影响
  • 第五章 讨论
  • 5.1 外植体的采集
  • 5.2 外植体的灭菌
  • 5.3 不同培养基对组培苗的影响
  • 5.4 不同生长调节物质对组培苗的影响
  • 5.5 生根培养
  • 5.6 两种增殖途径的比较
  • 第六章 结论
  • 第七章 对进一步研究的内容建议
  • 参考文献
  • 致谢
  • 附图
  • 个人简介

    • 相关论文文献

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