类风湿关节炎外周血辅助性T细胞亚群平衡及Ⅱ型胶原治疗作用机制的研究

论文摘要

目的 拟研究类风湿关节炎（rheumatoid arthrtits,RA）外周血中辅助性T细胞（T-helper cell,Th）亚群Th0、Th1、Th2的状态及与RA病程、活动性等的关系,以探讨Th细胞各亚群在RA发病机制中的作用。同时观察口服Ⅱ型胶原（type Ⅱ collagen,CⅡ）对早期RA患者Th细胞各亚群的影响以探讨其作用机制。 方法 采用三色流式细胞仪（flow cytometry,FCM）检测技术,在外周血单个细胞水平上进行细胞膜表面标志和细胞内细胞因子的测定,检测33例活动期RA患者和16例正常对照组外周全血中CD3/CD4/CD8 T细胞及Th0/Th1/Th2细胞的阳性率。分析Th细胞与RA疾病活动的相关性;并将33例RA患者按病程（病程≤2年为早期RA）、X线、类风湿因子（rheumatoid factor,RF）情况分为:早期RA组（n=17）与非早期RA组（n=16）、骨侵蚀组（n=18）与无骨侵蚀组（n=15）、RF阳性组（n=23）与RF阴性组（n=10）,分析各组间Th细胞亚群的变化。10例早期RA患者口服Ⅱ型胶原治疗3月,检测口服Ⅱ型胶原治疗前后的Th细胞亚群的变化,并进行分析比较。 结果 1、RA患者淋巴细胞异常,Th0/Th1/Th2失衡:与正常对照组比较,RA患者外周血佛波酯（phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA）/离子霉素刺激前、后CD4-T细胞的表达均明显升高（P<0.05）;PMA/离子霉素刺激后CD8-T细胞的表达高于正常对照组（P<0.05）,但刺激前无差异;Th0、Th1细胞阳性率明显低于正常对照组（P<0.05）,Th2细胞与正常对照无差异。 2、RA患者Th1/Th2动态失衡与病程有关:早期RA患者CD4-T细胞、Th0细胞阳性

论文目录

• 一、英文缩略词表
• 二、中文摘要
• 三、英文摘要
• 四、正文
• 1.前言
• 2.实验材料与方法
• 2.1 标本来源
• 2.2 药物与试剂
• 2.3 仪器设备
• 3.实验方法
• 3.1 实验原理
• 3.2 实验步骤
• 3.2.1 试剂的配制与贮存
• 3.2.1.1 佛波酯的配制
• 3.2.1.2 离子霉素的配制
• 3.2.1.3 莫能菌素的配制
• 3.2.2 T淋巴细胞亚群（CD3／4／8）的检测
• 3.2.3 辅助性T淋巴细胞亚群（Th0／Th1／Th2）的检测
• 3.2.3.1 PMA刺激浓度与刺激时间的选择
• 3.2.3.2 细胞收集
• 3.2.3.3 细胞培养
• 3.2.3.4 洗涤
• 3.2.3.5 细胞固定
• 3.2.3.6 细胞膜打孔、细胞表面与细胞内细胞因子染色
• 3.2.3.7 流式细胞仪检测细胞内细胞因子
• 4.统计学分析
• 5.实验结果
• 5.1 PMA对细胞膜表面CD4的影响
• 5.2 刺激浓度与刺激时间的选择
• +T、CD3⁺CD4⁺T与CD3⁺CD8⁺T细胞的表达'>5.3 PMA刺激前RA患者外周血中CD3⁺T、CD3⁺CD4⁺T与CD3⁺CD8⁺T细胞的表达
• +T与CD8⁺T细胞的表达'>5.4 PMA刺激后RA患者外周血CD4⁺T与CD8⁺T细胞的表达
• +T、CD8⁺T细胞的表达与疾病活动性的关系'>5.5 PMA刺激前与刺激后RA患者CD4⁺T、CD8⁺T细胞的表达与疾病活动性的关系
• 5.6 RA患者外周血中Th0／Th1／Th2细胞亚群的表达
• 5.7 Th0、Th1、Th2细胞亚群的表达与RA疾病活动性的关系
• 5.8 早期RA与非早期RA患者外周血中Th0、Th1、Th2细胞亚群的比较
• 5.9 早期RA／非早期RA患者与健康对照组之间Th亚群的比较
• 5.10 早期RA／非早期RA Th亚群与疾病活动性的相关性
• 5.11 RA患者外周血Th细胞亚群随病程延长变化趋势
• 5.12 Th细胞亚群在骨质破坏组与非骨质破坏组之间的比较
• 5.13 Th细胞亚群在RF阳性组与RF阴性组间的比较
• 5.14 口服Ⅱ型胶原对早期RA患者Th亚群的影响
• 五、讨论
• 六、小结
• 七、参考文献
• 八、附录
• 九、综述
• 参考文献:
• 学位论文独创性声明
• 学位论文使用授权声明