论文摘要
以麝香百合(Lilium.longiflorum)、亚洲百合杂交系(Lilium.asiatic hybrids)两个品种‘Acuba’、‘Nove Cento’及卷丹(Lilium.lancifolium)的无菌苗为外植体,从培养条件入手,探索优化促进试管鳞茎膨大的培养基,为百合试管鳞茎的工厂化生产提供理论依据和关键技术。结论如下:1.以麝香百合的花丝、花梗等为外植体,诱导形成试管苗。研究发现,培养基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L适合花丝诱导愈伤和分化,适合花梗诱导愈伤及分化的培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L。MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L最适合无菌苗的继代,繁殖系数最高,为5.29。2.不同培养条件对试管鳞茎膨大的影响。在一定范围内,提高糖浓度会促进鳞茎的膨大,但浓度过高(120g/L)会影响鳞茎的形成,90g/L对于麝香百合和亚洲百合‘Acuba’都是最适合鳞茎化培养的浓度,鳞茎的平均鲜重分别为107.86mg和127.97mg。生长素NAA对于鳞茎的膨大也有促进作用。在培养基中附加0.5mg/L的NAA最适合麝香百合试管鳞茎的膨大,其鳞茎平均鲜重达122.64mg:而对于‘Nove Cento’,2.0mg/L的NAA适合鳞茎膨大培养,获得的鳞茎平均鲜重为124.22mg。在培养基中附加5mg/L的PP333可以使麝香百合获得最大鳞茎鲜重,为99.22mg;10mg/L的PP333适合‘Nove Cento’的鳞茎膨大培养,获得的平均鳞重为105.06mg。在正交试验中,‘Acuba’可选用90g/L蔗糖、10mg/L PP333和0.025mmol/L SA进行鳞茎化培养,获得鳞茎平均鲜重为161.17mg;‘Nove Cento’可选用90g/L蔗糖、1mg/L PP333和0.1mmol/L SA进行鳞茎化培养,获得鳞茎平均鲜重为209.93mg。活性炭具有很强的促进生长和生根效果,同时也具有较强的促进鳞茎形成效果,麝香百合和卷丹都可采用3g/L的AC进行鳞茎化培养,获得的鳞茎平均鲜重都为对照的2~3倍。茉莉酸甲酯(Me-JA)对麝香百合鳞茎的增重有效果,可以使鳞茎平均鲜重达到110.77mg;而对于卷丹,茉莉酸甲酯并没有显著作用。液体浅层静置由于更易于鳞茎对营养物质的吸收,因此促进鳞茎的膨大,麝香百合和卷丹在液体培养中都获得了最大的鳞茎鲜重,分别为161.62mg和249.84mg,超过8mm的大鳞茎分别达到48.53%和54.05%,这种培养方式还可以缩短鳞茎培养时间到60天。以液体培养基为基础,添加蔗糖和活性炭能够很有效地促进试管鳞茎膨大,这种培养基会强烈地促使叶片及根生长,还有试管鳞茎的膨大,比单独使用其中任何一种,效果都要好得多。60g/L蔗糖+3g/L活性炭最有利于麝香百合试管鳞茎膨大,平均鲜重达627.32mg,获得的13mm以上的鳞茎达39.02%;90g/L蔗糖+3g/L活性炭是促进卷丹试管鳞茎膨大的最适浓度,平均鲜重达479.17mg,获得的13m以上的鳞茎达10.25%。3.将固体培养基上获得的试管鳞茎按直径大小分成A:8mm以上、B:5-8mm及C:3-5mm三个等级,经播种栽培后麝香百合成活率分别为95.8%、81.9%、80.6%。亚洲百合‘Nove Cento’成活率分别为85.7%、68.3%、44.4%。萌发苗长势随直径的增大而增强。将液体培养基上获得的卷丹试管鳞茎按直径大小分成D:12mm以上、E:9-12mm和F:7-9mm三个等级,经播种栽培后卷丹成活率都在85%以上。12mm以上鳞茎萌发植株最健壮,60天后鳞茎平均直径仍在7mm以上。